Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

Аутоантитела со специфичностью анти-Кр^ь обнаружили Manny и соавт. 157] у больной, в эритроцитах которой не содержалось антигена Кр^ь. Ее фе­нотип соответствовал k Kp(a+b-) Js^b. Антигены к и Js^b на эритроцитах боль­ной были слабо выражены, антиген Кр^а имел сильную экспрессию. Прямая проба Кумбса была положительная. Элюаты, снятые с эритроцитов, содер­жали Кр^ь-антитела. Клинические симптомы разрушения собственных эри­троцитов in vivo отсутствовали. Перелитые донорские эритроциты Кр(Ь+), меченные Сг⁵¹, выживали нормально. Через 9 мес. анти-Кр^ь-антитела у па­циентки исчезли, прямая проба Кумбса с эритроцитами стала отрицатель­ной, восстановилась нормальная экспрессия антигенов к и Js^b, характерная для фенотипа Кр(а+Ь-). После выздоровления эритроциты больной утрати­ли способность реагировать с собственной сывороткой, оставленной от пер­вого исследования и сохраненной в замороженном состоянии. Авторы пред­положили, что причиной аутоиммунизации послужил Кр^ь-подобный антиген микробного происхождения, который адсорбировался на эритроцитах и сти­мулировал образование аутоантител.

Brendel и соавт. [112] нашли аутологичные анти-Кр^ь-антитела у больной, пе­ренесшей операцию. У больной наблюдали слабоположительную прямую анти-глобулиновую пробу и одновременно сниженную экспрессию антигенов k, Кр^ь и Js^b. Данные о том, что аутоантитела оказывали какое-либо патологическое действие in vivo, отсутствовали. Донорские эритроциты, перелитые женщине, так же как и в наблюдении Vengelen-Tyler и соавт. [380], утрачивали выражен­ность Kell-антигенов. Через 2 недели лечения экспрессия антигенов k, Кр^ь и Js^b на эритроцитах больной восстановилась, аутоантитела исчезли. Этот факт, а также то, что пациентка имела бактериальную инфекцию, позволили предполо­жить, что ослабление экспрессии Kell-антигенов могло быть обусловлено сеп­тицемией. К такому же заключению пришли Beck и соавт. [101] и Marsh и соавт. [265], полагая, что антигены Kell деградируют под действием ферментов, выде­ляемых микобактериями, и становятся мишенями для аутоагрессии.

Issitt и соавт. [206] обратили внимание на то, что аутоантитела к антиге­нам Kell чаще выявляют у пациентов, перенесших черепно-мозговые травмы. Авторы высказывают предположение, что эта связь не случайна. Поврежденная ткань мозга несет на себе, вероятно, иммуногенную Kell-подобную субстан­цию, которая при контакте с макрофагами и иммуноцитами вызывает появле­ние аутоантител против антигенов Kell.

Ауто-18^ь-антитела

Eveland [162] описал ауто-^-антитела у больных хронической почеч­ной недостаточностью, имевших фенотип Js(a-b+). Аутоантитела слабо реагировали в прямой антиглобулиновой пробе, но хорошо - в пробе с по-лиэтиленгликолем.

Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

Cчитается, что естественные анти-К-антитела не вызывают посттрансфузион-ных реакций, как аллоиммунные. Естественные антитела являются парциальны­ми, тогда как аллоиммунные антитела направлены ко всем антигендоминантным эпитопам Kell-гликопротеина и вступают с ним в сильное взаимодействие, кото­рое проявляется посттрансфузионными гемолитическими реакциями.

Известно, что агглютинирующие свойства Kell-антител усиливаются после об­работки эритроцитов протеолитическими ферментами. Issitt и соавт. [205] провели специальное сравнительное исследование с целью установить существование ан­тител, которые реагируют только с энзимированными эритроцитами и не реагиру­ют с нативными. Среди 10 ООО исследованных образцов авторы нашли 7 сыворо­ток, которые агапотинировали эритроциты К+, обработанные фицином*, но не ре­агировали с нативными эритроцитами в непрямой антиглобулиновой пробе, выпол­ненной в низкоионной среде (LISS-IAT), и идентифицировали эти сыворотки как анти-К. Обработка дитиотрейтолом, редуцентом IgM, показала, что 6 из 7 сыворо­ток содержали антитела анти-К IgM, 1 - анти-К IgG. Авторы подчеркивают, что ис­следование было ретроспективным, поэтому сделать заключение о клиническом значении энзимзависимых анти-К-антител не представилось возможным.

В том же исследовании Issitt и соавт. выявили 19 сывороток с антителами Rh-Hr, которые подобно 7 упомянутым анти-К-антителам реагировали толь­ко с энзимированными эритроцитами. Пациенты, у которых были обнаруже­ны антитела, получили 32 дозы резус-положительных эритроцитов, но толь­ко у 1 из них отмечали отсроченную посттрансфузионную реакцию. У осталь­ных 18 пациентов признаков посттрансфузионных реакций не зарегистрирова­но. Экстраполируя полученные данные на все антиэритроцитарные энзимзави-симые антитела, авторы делают вывод, что анти-К-антитела, обнаруживаемые в ферментных тестах, клинически безвредны.

Усиление реактивности некоторых антител системы Kell наблюдается, когда вместо фицина используют папаин**. Напротив, обработка эритроцитов трипси­ном*** реактивность антител системы Kell не усиливает.

Некоторые серии моноклональных К-антител проявили разную специфич­ность с нативными и энзимированными эритроцитами. Так, МКА со специфич­ностью анти-К, установленной по нативным эритроцитам, реагировали с эри­троцитами, обработанными АЕТ, который полностью разрушает антигены Kell на поверхности клеток [289] (см. Химические свойства К).

Клинически неопасными являются кратковременно появляющиеся, тран-зиторные, аутоантитела анти-К, не вызывающие разрушения эритроцитов. Антитела, похожие на аллоантитела анти-К, но аутоиммунной природы описа­ли Viggiano и соавт. [381].

Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

Понятие «естественные» (naturally-occurring), или спонтанные, антите­ла в значительной мере условно. Оно означает лишь то, что выявленные ан­титела не имеют причинно-следственной связи с трансфузиями компонен­тов крови или беременностями, и истинная причина их возникновения не известна. В большинстве случаев антитела, именуемые естественными, или спонтанными, являются иммунными по своей природе и появляются в от­вет на стимуляцию группоспецифическими антигенами экзогенного проис­хождения (алиментарными, бактериальными, вирусными) или эндогенного происхождения, возникшими в результате соматических мутаций или других взаимодействий.

Возможен и другой путь возникновения спонтанных антител, а именно трансплацентарный перенос антителопродуцирующих клеток от матери пло­ду в процессе родов [27] (см. Причины иммунизации антигенами Kell).

Естественные антитела против антигенов Rh-Hr встречаются чаще, чем против антигенов системы Kell. Так, Harrison [193] показал, что более 60 % встречающихся анти-Е-антител не были стимулированы эритроцитами и имели естественное происхождение. Случай спонтанных анти-Е-антител описан в отечественной литературе [28].

Описаны лишь единичные случаи спонтанных анти-Ке11-антител.

Kanel и соавт. [221] нашли анти-К-антитела у пациента, не имевшего трансфузий эритроцитов. Антитела агглютинировали эритроциты К+ при комнатной температуре. Меркаптоэтанол подавлял активность антител, что указывало на их принадлежность к IgM. Авторы связывают появление этих антител с имевшимся у пациента легочным туберкулезом. Подобные анти-К-антитела обнаружили Morgan и Bossom [287] , Clark и соавт. [130] у лиц, так же как и в упомянутом случае, не имевших переливаний крови.

Allen и Lewis [87] нашли спонтанные антитела анти-Кр^а (Penney) у ан­гличанина, страдавшего системной красной волчанкой - заболеванием, от­носящимся к категории аутоиммунных. Естественные анти-Кр^а-антитела об­наружили Darnborough и Dunsfbrd [151], McNtil и Newman [280Щ

Ito и соавт. [209] описали естественные анти-Js^а-антитела в японской семьей

Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

AHTH-Js^b

Все анти-^-антитела, описанные в литературе, обнаружены у негров [255, 314, 319]. Подобно многим другим антителам системы Kell, анти-^-антитела являются аллоиммунными IgG и лучше всего реагируют в непрямой пробе Кумбса. Известен случай аутоиммунных .^-антител [162] (см. Аутоантитела к антигенам Kell).

Chu и соавт. [128] получили моноклональные ^-антитела иммунизацией мышей трансфектными клетками мышиной эритромиеломы, экспрессирующи-ми человеческий Kell-гликопротеин.

Waheed и Kennedy [385] нашли аллоиммунные антитела анти-Js¹⁵, которые образовались у пациентки Js(b+) и явились причиной отсроченной гемолити­ческой реакции после переливания эритроцитов донора одноименной, Js(b+), группы. Описанный авторами случай, хотя и единственный, указывает на то, что антиген Js^b имеет парциальные варианты и содержит как минимум 2 имму-ногенных эпитопа, один из которых может отсутствовать на эритроцитах.

AHTH-Js^b антитела вызывали тяжелую ГБН [255,280, 314, 319], вплоть до ги­бели плода от водянки [180, 319].

Ratcliff и соавт. [319] описали родильницу с .^-антителами, которой по ви­тальным показаниям перелили 275 мл эритроцитов Js(b+) за неимением кро­ви Js(b-). Реакции на трансфузию не было. Время приживления эритроцитов Js(b+) в кровотоке женщины (исследование проводили с помощью проточ­ной цитометрии) оказалось уменьшенным. Через 19 ч после трансфузии более 50 % эритроцитов Js(b+) нормально выжили. На 4-й день после несовместимой трансфузии в кровотоке женщины не осталось ни одного эритроцита Js(b+). щ Комментируя приведенный случай, Issitt и Anstee [204] подчеркивают, что лучше перелить несовместимую кровь, когда нет другой, чем дать пациенту умереть от кровопотери.

Анти-К17 (Wk^a)

В литературе описан только один случай обнаружения анти-К17-антител [356], хотя, как указывает Daniels [141], известны и другие, неопубликованные, находки.

Анти-Kll (Cote)

Известно несколько случаев обнаружения анти-КП-антител. 

В 2 случаях [185,335] антитела были найдены у женщин, которые никогда не по­лучали трансфузий, но имели беременности (1 из них имела 9 беременностей [185]).

В 3 случаях [356] анти-КП присутствовали у женщин, имевших беременно­сти и трансфузии эритроцитов, Ш

Kelley и соавт. [223] наблюдали реципиента с анти-К 11-антителами, ко­торому было перелито 11 доз эритроцитов К11+ без каких-либо клинических проявлений несовместимости/Меченные Сг⁵¹ эритроциты К11+ приживали in vivo нормально. В экспериментах in vitro с моноцитарным монослоем увеличе­ние реактивности моноцитов авторы не отметили.

Sabo и соавт. [335] привели случай мертворождения у женщины с анти-Kll-антителами. Неудачно закончившаяся беременность была 2-й. Аутопсия показала признаки гемолитической болезни плода. У 3-го ребенка при рож­дении прямая антиглобулиновая проба положительная, однако лечение не потребовалось.

Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

Антитела анти-Kell имеют, как правило, аллоиммунное происхождение: по­являются в результате контакта с эритроцитами К+ при трансфузии или бере­менности. Естественные антитела, направленные против отдельных антигенов Kell (К, Кр^а, Кр^ь и др.), встречаются редко. Описано лишь несколько случаев [87, 209, 318] (см. Естественные Kell-антитела).

Анти-К

Наибольшее клиническое значение имеют антитела анти-К [7-12,14-21,23]. Другие антитела, относящиеся к системе Kell, не имеют столь большого значе­ния в практике переливания крови.

По данным Mollison и соавт. [284], примерно у 10 % реципиентов К-, полу­чивших трансфузию одной дозы эритроцитов К+, образуются анти-К-антитела. Для сравнения: среди реципиентов D-, получивших трансфузию крови D+, примерно у 80 % образуются анти-D. По расчетам Giblett [174], антиген К в 14 раз менее иммуногенен, чем D, но в 2,5 раза более иммуногенен, чем с (hr^f).

Частота К-антител у жителей Москвы в разные годы, по нашим данным, со­ставляла 5,6-7,8 % [24].

Анти-К часто находят в сыворотках, содержащих анти-Б-антитела, или ан­титела к другим часто встречающимся антигенам системы Kell (М.А. Умнова и

др. [73], Issitt и соавт. [203, 207], Archer и соавт. [93] (см. Сочетанием аллоимму-низация DuK, эффект усиления).

Большинство К-антител относится к IgGl-субклассу IgG, обладает высокой адсорбционной способностью и хорошо реагирует в непрямой антиглобулино-вой пробе [84, 250]. Примерно половина образцов также содержит IgG3 и/или IgG4. Около 20 % образцов К-антител активируют СЗ-компонент комплемента, однако гемолиза in vitro не вызывают [284].

Некоторые сыворотки, содержащие анти-К IgG, непосредственно агглюти­нируют эритроциты К+, другие (еще более редкие сыворотки анти-К IgM) реа­гируют только с энзимированными эритроцитами.

Распределение антител по специфичности и частоте у жителей Москвы по данным за 1997-2002 гг.*

* По данным кооперированных исследований лаборатории стандартизации групп крови ГНЦ РАМН

Около 75 % лиц с IgG-аутоантителами, относящимися к Kell-системе, содер­жат циркулирующие анти-К-антитела со свойствами аллоиммунных [146,240].

Longster, Major [254] обнаружили анти-К-антитела IgG в асцитической жид­кости. Титр антител в асците и сыворотке крови был одинаков, хотя, как показа­ли Derrington и Soothill [153], концентрация IgG в асците составляет 0,1-0,2 г/л, т. е. более чем в 50 раз ниже, чем в сыворотке крови взрослого человека.

Kornstad, Heisto [229] описали образование анти-К-антител у К-положительных реципиентов.

Категория: Система Kell

Опубликовано: 20 апреля 2014

Серологически выявляемый полиморфизм антигенов KEL обусловлен то­чечными мутациями, проявляющимися в замещении отдельных аминокислот (табл. 5.2).

Серологические различия двух основных антигенов системы Kell (К и к) об­условлены заменой Т на С в экзоне 6 (строки 1 и 2 табл. 5.2). Если 193-й ами­нокислотный остаток Kell-гликопротеина представлен метионином (Met), то субстрат является антигеном Келл (KEL1). Если замена Т на С произошла, то в 193-й позиции метионин заменяется на треонин (Thr) и субстрат приобретает серологическую специфичность антигена Челлано (KEL2).

То же самое происходит с другими антитетичными антигенами.

KEL3, KEL4 и KEL21 (группа 2 из 3-х антитетичных антигенов, строки 3, 4 и 5) отличаются мутацией в одном и том же, 281 кодоне экзона 8. KEL4 кодиру­ется как CGG, 281-й аминокислотный остаток его представлен аргинином (Arg). KEL3 кодируется как TGG (замена С на Т) и в 281 позиции происходит замена Arg на триптофан (Trp). KEL21 кодируется как С AG (замена G на А по отноше­нию к KEL3 и KEL4) и имеет в 281-й позиции глютамин (Glu).

Антигены третьей антитетичной пары (KEL6 и KEL7, строки 6, 7), отлича­ются заменой Т на С в экзоне 17, в результате чего на Kell-гликопротеине в по­зиции 597 вместо лейцина (Leu), характерного для KEL7, прикрепляется про-лин (Pro), обусловливающий специфичность KEL6.

KEL11 и KEL17 обусловлены заменой Т на С в экзоне 8, приводящей к ами­нокислотному замещению важна (Val) на аланин (Ala) в кодоне 302.

Мутации, обусловливающие специфичность антигенов Kell *

* Сводные данные из опубликованных источников (Lee [231], Lee и соавт. [234], Uchikawa и соает. [373] и др. ([141, 204, 341]).  

KEL14 и KEL24 объединены в пару благодаря мутации G на С в экзоне 6, коди­рующей в позиции 180 замену Arg (KEL 14) на Pro (KEL24). Lee и соавт. [234] наш­ли у двух не связанных родством лиц К14-К24+ трансверсию G 659 С в экзоне 6. Uchikawa и соавт. [373] исследовали ДНК 2 не связанных родством японцев, имев­ших фенотип К14-, и нашли 2 другие мутации: G 659 А, кодирующую Arg 180 Cys.

KEL 10 и KEL23 не являются антитетичными, их структура кодируется в раз­ных экзонах - 13 и 10 соответственно. Они объединены в одну группу лишь по тому признаку, что редко встречаются. Для антигена KEL10 характерна мутация Glu на Val в 494 аминокислотном остатке, для антигена KEL23 - замена глицин

(Gin) на Arg в остатке 382. Lee [231] показал, что 2 члена семьи, имевшие фе­нотип К23+, были гетерозиготны по транзиции А 1265 G, кодирующей Gin 382

Arg и создающей участок рестрикции Всп\.

Антигены с высокой частотой встречаемости формируются следующими аминокислотными заменами:

KEL12 - замена гистидина на аргинин в кодоне 548 экзона 15. Lee [231] по­казал у 2 не связанных родством лиц К12- замену А1763 G в экзоне 15, кодиру­ющую His 548 вместо Arg;

KEL 18 # имеет альтернативную мутацию в кодоне 130 экзона 4: Arg на Trp или Gin. Несмотря на фенотипическую идентичность, 2 не связанных родством пробанда К18- с анти-К18-антителами имели различные мутации в том же ко­доне экзона 4, кодирующие различные аминокислотные замены: С 508 Т, Arg 130 Thr и G 509 A, Arg 130 Gin (Lee [231]);

KEL 19 - Arg на Gin в кодоне 492 экзона 13. Lee [231] при исследовании мо­лекулярной основы фенотипа К19- нашел, что оба пробанда имели транзицию G 1595А в экзоне 13, кодирующую замену Arg 492 Gin;

KEL20 - аминокислотные замены не установлены;

KEL22 - Ala на Val в кодоне 322, экзон 9;

KEL26 - Arg на Gin в кодоне 406, экзон 11. У 3 TOU-отрицательных лиц из 2 семей Lee [231] констатировал одинаковую транзицию G 1337 А в экзоне 11, ко­дирующую Arg 406 Gin;

KEL27 - Lee и соавт. [235] нашли у КЕЕ27-отрицательной женщины замену G 865 А, которая кодировала замещение Glu 249 Lys.

Слабые фенотипы K_mod характеризуются заменами Thr на Arg в кодоне 193 экзона 6 и Ala на Val в кодоне 423 экзона 11.