Структура очищенного от углеводов Kell-полипептида исследована Lee и соавт. [242, 243]. Этот белок является мембранным протеином II типа, имеет мол. массу 82,8 кДа и состоит из 732 аминокислот (рис. 5.2).
![Аминокислотная последовательность Kell-протеина по Lee и соавт. [242,243 ]. Полужирным шрифтом выделен гидрофобный участок трансмембранного домена, полу¬жирным шрифтом с подчеркиванием - участки N-гликозилирования.](/images/stories/stat/ad2.jpg)
Аминокислотная последовательность Kell-протеина по Lee и соавт. [242,243 ]. Полужирным шрифтом выделен гидрофобный участок трансмембранного домена, полужирным шрифтом с подчеркиванием - участки N-гликозилирования.
Аминокислотная последовательность, обусловливающая специфичность Kell-антигенов, имеет большое сходство с аминокислотной последовательностью цин-ксвязывающих эндопептидаз [135, 234], найденных почти у всех животных [214]. Эти эндопептидазы, широко представленные в клетках и тканях, участвуют в превращении, главным образом инактивации пептидных гормонов, таких как энцефа-лин, нейротензин, ангиотензин, окситоцин, брадикинин. В противоположность эн-допептидазам, присутствующим во многих клетках, Kell-протеин экспрессиру-ется только в эритроидных клетках [244], осуществляя, возможно, некое представительство цинксвязьшающих эндопептидаз на эритроцитах. Не исключено, что указанное сходство обеспечивает определенные физиологические функции Kell-полипептида на мембране эритроцитов, связанные с транспортом гормонов.
Белок Kell практически повторяет аминокислотную последовательность эндотелин-конвертирующего энзима 1 и 2 (ЭКЭ-1 и ЭКЭ-2) и нейтральной эн-допептидазы-24-11 (CD 10). Эти белки образуют подсемейство мембранных металлопротеиназ М13. Структурная модель Kell-гликопротеина, представленная выше (см. рис. 5.1), построена на основе структурной модели ЭКЭ-1.
Kell-полипептид имеет небольшой гидрофобный внутримембранный домен, высокогидрофильный Af-терминальный цитоплазматический домен, состоящий из 27-47 аминокислот, и большой С-терминальный экстрацеллюлярный домен, состоящий из 665 аминокислот.
Внеклеточная часть Kell-полипептида содержит 6 гликозилируемых участков (позиции 94, 115, 191, 345, 627 и 724), хотя считается, что аспарагин 724 не пригоден для гликозилирования на участке 6, поскольку расположенный рядом пролин 725 ингибирует гликозилирование.
В экстрацеллюлярном домене Kell-полипептида имеется 15 цистеиновых остатков, предполагающих наличие 7 дисульфидных связей, что согласуется с имеющимися данными о высокой чувствительности антигенов Kell к тиоловым реагентам (Branch и соавт. [109]). В трансмембранной области имеется дополнительный цистеиновый остаток.
Redman и Lee [322] считают, что цистеиновые остатки, располагающиеся вдоль молекулы, нужны для поддержания вторичной структуры Kell-протеина. Согласно концепции авторов, экстрацеллюлярная часть Kell-протеина состоит из двух доменов, соединенных между собой дисульфидными связями и отделяющихся один от другого длинным пептидным сегментом. Цистеиновый остаток в позиции 72 Kell-протеина обеспечивает сцепление с цистеиновым остатком в позиции 347 Кх-протеина [333], формируя таким образом Kell-иммуноген полной длины. В то же время антитела к Kell-протеину удалось получить иммунизацией кроликов коротким пептидом, состоящим из 30 аминокислот, который был синтезирован с помощью кДНК клеток костного мозга человека.
