Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 22 апреля 2014

a Watkins [234] установил, что эритроциты, получившие Le^a или Le^b из плазмы, могут утрачивать эти антигены, если их поместить в плазму лица Le(a-b-).

Таблица 9.2

Замена антигенов Lewis на эритроцитах после инкубации в плазме доноров, имеющих другой фенотип Lewis*

Эти находки были дополнены Makela и соавт. [155], которые обнаружили, что слюна приводит к эффекту трансформации фенотипа Lewis, как и плазма.

Утрата антигенов Lewis может происходить не только in vitro, но и in vivo. Mollison и соавт. [173] отметили, что эритроциты Le(b+), перелитые реципиен­ту Le(a-b-), относительно быстро исчезают из кровяного русла, и их не находят у реципиента уже через 1-2 недели после трансфузии. Однако исчезновение эри­троцитов Le(b+) из кровотока не является следствием их разрушения. Используя различия по антигенным маркерам (например, донор М - реципиент N и др.) или радиоактивную метку Сг⁵¹, можно убедиться, что перелитые эритроциты цирку­лируют в кровяном русле реципиента продолжительное время. Отсутствие эри­троцитов Le(b+) свидетельствует лишь о том, что антиген Le^b перешел в плазму с поверхности перелитых клеток, и они приобрели фенотип Le(a-b-).

В настоящее время считается установленным, что субстанции Lewis фиксируются к мембране эритроцитов из плазмы в виде гликосфинголипидов (Marcus, Cass [157]). В слюне они присутствуют в виде гликопротеинов (Schenkel-Brunner [203]).

Levine и Celano [145] показали, что предварительная обработка эритроцитов дубильной кислотой (таннином) усиливает адсорбцию антигенов Lewis из слю­ны, однако эта реакция неспецифична, поскольку таннизированные эритроциты легко адсорбируют на своей поверхности другие мукоиды.

Напротив, протеолитические ферменты усиливают специфическое связыва­ние антигенов Lewis с одноименными антителами, что по сей день использут для идентификации Lewis-антигенов и Lewis-антител.

Makela и соавт. [155] изучили трансформацию эритроцитов Le(a-b-) в Le(a+) и Le(b+) при инкубации в плазме, содержащей субстанции Le^a или Le^b, и нашли, что ферменты плазмы не принимают участия в фиксации антигенов Lewis к эри-троцитарной мембране - этот процесс представляет собой пассивную адсорбцию.

Публикации, появившиеся вслед за открытием Le^a, характеризуют систему Lewis как сложную, не укладывающуюся в привычные представления о груп­повой дифференцировке крови человека. Многие годы не находили объяснения некоторые парадоксы, связанные с этой системой.

Andresen [15] первым обратил внимание на то, что родители Le(a-) имели де­тей как Le(a-), так и Le(a+), и в связи с этим полагал, что передача Le^a по наслед­ству носит рецессивный характер. Внешне это выглядело именно так (табл. 9.3), поскольку браки Le(a+) х Le(a+), хотя и редко, но давали потомство Le(a+) [55, 140,202], а браки Le(b+) х Le(b+) давали потомство Le(b+) и Le(b-) [54,202].

Таблица 9.3

Особенности наследования фенотипа Le(a+)

У родителей Le(a+) x Le(a+) дети с фенотипом Le(a-) бывают редко. У родителей Le(a~) х Le(a-) дети с фенотипом Le(a+) составляют 11,2 %. При смешанных браках Le(a+) х Le(a-) дети с фенотипом Le(a+) составляют 33,6 %, с фенотипом Le(a-) - 66,3 %.

Ясность в сложившееся несоответствие внесли исследования Grubb [92]. Оказалось, что результат определения Le^a в эритроцитах не всегда отражает ис­тинный Lewis-фенотип обследуемого, поскольку Le^aH Le^bHa эритроцитах могут отсутствовать, но при этом быть хорошо выраженными в слюне.

Многие авторы подтвердили выводы Grubb экспериментально, проследив характер наследования Le^a и Le^b в семьях и показав, что антигены Lewis не от­носятся к рецессивным признакам, а как все другие групповые антигены крови наследуются кодоминантно (Ceppellini, Siniscalco [55]; Ceppellini и соавт. [54], Lamm и соавт. [138], Andresen и соавт. [18], Jordal [123], Greenwalt [87]).

Длительное время оставался непонятным тот факт, что некоторые сыворотки awra-Le^b проявляют высокую активность только в том случае, если эритроциты, взятые для исследования, имеют группу О или А₂ [92, 166, 201]. Другие сыворотки aHTH-Le^b, как установил Brendemoen [40], лучше выявляют Le^b в эритроцитах А_г Упомянутые категории анти^е^ь-антител более подробно будут рассмотрены ниже.

В настоящее время сформировалась стройная концепция системы Lewis, сфор­мулированная Grubb [92], Ceppellini [53], Ceppellini и соавт. [54], Race и Sanger [197] и существенно дополненная современными молекулярно-биологическим исследованиями Schenkel-Brunner [203]. Суть ее заключается в том, гены Lewis относятся к системе секреторных генов, запускающих синтез соответствующих олигосахаридов в плазме и других жидкостях организма. Адсорбция олигосаха-ридов Lewis на эритроцитах - вторичный процесс.

Согласно этой концепции, поддерживаемой многими исследователями, гены Le и Se тесно взаимодействуют, но вместе с тем друг с другом не сцеплены (табл. 9.4).

В частности, при комбинации как минимум одного гена Le и одного Se ин­дивиды являются выделителями субстанций АВН и Lewis и имеют фенотип Le(a-b+c-d-).

Таблица 9.4

Антигены Lewis в слюне и на эритроцитах у лиц с различными комбинациями генов Lewis и Секреции

В отсутствие гена Se (комбинация Le/se) АВН-субстанций не выделяются, но сохраняется секреция вещества Le^a. Фенотип таких индивидов Le(a+b-c-d~).

При наличии гена Se и отсутствии Le (комбинация le/Se) индивиды имеют фенотип Le(a-b-c-d+), выделяют АВН-субстанций и некоторое количество субстанции Le^bH, структурно близкой к веществам Н и Le^d.

Антиген Le^c обнаруживают на эритроцитах, если индивид не имеет генов Se и /^(комбинация le/se). В этом случае антигены АВН и Lewis не вырабатывают­ся и прекурсорная субстанция, представляющая собой олигосахаридные цепи 1 типа, присутствует в секретах в чистом (не измененном) виде.

Анализируя табл. 9.4 можно сделать вывод, что Le^a и Le^b являются продук­том генов Le,se и Le,Se₉ a Le^c и Le^d - продуктом генов le.se и le_fSe. Graham и соавт. [86] убедительно показали, что это не так. Их рассуждение сводилось к следующему: если продукция Le^a и Le^c обусловлена геном Le и le в отсут­ствие гена Se₉ a Le^b и Le^d - геном Le и le в присутствии Se₉ то лица, гетеро­зиготные по Le и le несекреторы, должны иметь эритроциты Le(a+b-c+d-), а лица, гетерозиготные по Le и le секреторы, должны иметь эритроциты Le(a-b+c~d+). Однако при исследовании эритроцитов 98 взрослых лиц авто­ры нашли только по одному из 4 антигенов на каждом образце эритроцитов: Le^a, или Le^b, или Le^c, или Le^d. Результаты эксперимента свидетельствовали о том, что Le^c и Le^d действительно вырабатываются в отсутствие гена Le, но без какого-либо участия гена le.

Предполагается, что при отсутствии гена Le активность гена Se в секретор­ных клетках возрастает, в результате чего синтезируется больше олигосахарид-ных цепей 1Н-типа, т. е. антигена Le^d, а при отсутствии генов Le и Se (у лиц lese/lese) прекурсорные олигосахаридные цепи 1 типа остаются без изменения. Именно эти структуры (цепи 1 типа) распознаются анти-Ье^с-антителами.

Таким образом, при очевидной фенотипической связи антигенов Le^a, Le^b и Le^d, Le^c их генетическая связь подтверждения пока не находит.

Некоторые авторы полагают, что обозначение антигенных структур, выяв­ляемых антителами анти-Ье^ёи анти-Ье^с, символом Le(d+) и Ье(с+)не соответ­ствует существующим правилам, поскольку ген Lewis не имеет отношения к синтезу этих антигенов [115].

Высказывались предложения взамен обозначения Le^d использовать термин "Н тип Г

Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 22 апреля 2014

Антигены системы Lewis (Левис) не являются эритроцитарными, а адсорби­руются на эритроцитах из плазмы крови. Они тесно связаны с секрецией груп­повых антигенов в жидкостях организма и опосредованно влияют на экспрес­сию групповых антигенов АВО. Именно эта особенность системы Lewis при­влекает внимание трансфузиологов, судебных медиков, антропологов, медицин­ских генетиков и других специалистов.

История открытия

Приоритет открытия групп крови системы Lewis принадлежит Mourant [176]. В 1946 г. он нашел антитела у женщины по фамилии Lewis, названные aHTH-Le^a. Антиген Le^a, выявляемый с их помощью, встречается примерно у 22 % европей­цев и подобно другим групповым антигенам крови передается по наследству.

Двумя годами позже Andresen [17] нашел антитела, которые агглютинирова­ли эритроциты Le(a-), но не реагировали с эритроцитами Le(a+) и обозначил их anra-Le^b, полагая, что они выявляют антиген Le^b, антитетичный Le^a.

Как отмечают Race и Sanger [197], а также Issitt и Anstee [115], антиген Le^a был обнаружен в 1939 г. японцами Ейяма и Фурухата (Ueyama [229, 230], Furuhata, Ueyama [80]). Авторы установили, что сыворотки кур дают положи­тельную реакцию преципитации со слюной несекреторов АВН-субстанций, т. е. лиц Le(a+), и обозначили антиген слюны, вызвавший реакцию, буквой Т. Как теперь известно, сыворотки кур содержат естественные антитела против веще­ства Lewis, а слюна людей несекреторов АВН богата веществом Le^a.

В настоящее время установлено, что Le^a и Le^b не являются антитетичны­ми антигенами, а гены, инициирующие их продукцию, не являются аллельны-ми [115, 197, 203]. Антиген Le^a вырабатывается у людей, которые унаследовали от родителей комбинацию двух генов: Le и se (Lewis и несекреции). Такие люди имеют фенотип Le(a+b-) и не секретируют АВН-субстанций.

Люди, унаследовавшие гены Le и Se (Lewis и секреции), вырабатывают анти­ген Le^b и являются АВН-секреторами.

Таким образом, антигены Le^a и Le^b не имеют соответствующих генов Le^a и Le^b, как антигены А, В или Rh-Hr, а контролируются одним геном Le.

Ген Le в присутствии гена se кодирует ^е^-генспецифическую фукозилтрансфе-разу, осуществляющую синтез вещества Le^a, а в присутствии гена Se кодирует Ze^&-генспецифическую фукозилтрансферазу, осуществляющую синтез вещества Le^b.

На формирование антигенов Le^a и Le^b, а также антигенов, причисленных к системе Lewis в качестве коллекции - Le^d, Le^c, AjLe^b и других, большое влия­ние оказывают гены АВО и Н.

Гены Lele (Lewis), Sese (секреции), АВО (групп крови) и Hh (прекурсорных струк­тур) тесно взаимодействуют друг с другом в процессе синтеза антигенов указанных систем, в результате чего антигены Lewis, АВО и Н, присутствующие на клеточных элементах крови (эритроцитах, лейкоцитах, тромбоцитах), а также в жидкостях ор­ганизма человека, представляют собой структурно родственную группу.

Аллелем гена Le считается le - молчащий ген. Лица le/le не вырабатывают антигенов Le^a и Le^b и имеют фенотип Le(a-b-).

Третий антиген - Le^d, имеющий отношение к системе Lewis, обнару­жен М.И. Потаповым [8, 10]. Антитела aHTH-Le^d были получены им иммунизаци­ей коз слюной лиц OLe(a-b+) выделителей. Козьи сыворотки после адсорбции эритроцитами OLe(a+b~) содержали сильные антитела aHra-Le^b, агглютинирую­щие эритроциты Le(a-b+), и одновременно антитела, реагирующие с эритроцита­ми Le(a-b-), однако не со всеми. Реакцию наблюдали только с эритроцитами лиц Le(a-b-) невыделителей. С эритроцитами Le(a-b-) выделителей антитела не реа­гировали. На основании полученных данных М. И. Потапов не только открыл но­вый антиген, названный им Le^d, но и пришел к вполне обоснованному заключению о существовании четвертого антигена системы Lewis - Le^c, который следует искать на эритроцитах Le(a-b-) выделителей группоспецифических субстанций.

Вскоре после этого антитела atirra-Le^c именно с такой серологической ха­рактеристикой были обнаружены Gunson и Latham [95] в сыворотке женщины, имевшей в анамнезе 1 трансфузию и 4 беременности, а годом позже такие же анти-Ее^с-антитела получил М.И. Потапов [7, 9], иммунизируя коз слюной лиц Le(a-b-) невыделителей.

Поскольку антигены Le^d и Le^c присутствуют на эритроцитах, лишенных Le^a и Le^b, т. е. фенотипически с ними связаны, их относят к коллекции Lewis-отрицательных [Le(a-b-)] эритроцитов.

Andresen и Jordal [19,122,123] описали антитела airra-Le^x. Эти антитела реаги­руют как с эритроцитами Le(a+), так и Le(b+) и представляют собой комбинацию антител airra-Le^a+Le^b, которую, однако, не удается разделить дифференциальной адсорбцией эритроцитами Le(a+b~) и Le(a-b+). Считается (Jordal [122]), что анти­тела anra-Le^x (anra-Le^a+Le^b) выявляют антиген Le^x, присутствующий на эритроци­тах новоровденных, а последние, как известно, лишены антигенов Le^a и Le^b [15,39, 122,124]. Действительно, эритроциты новорожденных агглютинируются всеми сы­воротками anra-Le^x, но в то же время практически не реагируют с моноспецифиче­скими сыворотками анти-Le³ и aHTH-Le^b, за исключением очень активных сыворо­ток анти-Le³, используемых в непрямой антиглобулиновой пробе [122,218].

К настоящему времени известно 14 антигенов Lewis (табл. 9.1), 6 из которых (Le^a, Le^b, Le^x, Le^bH, AjLe^b и BLe^b) составляют собственно систему Lewis, 8 (Le^d, Le^c, Le^bL, AjLe*¹, BLe^d, Le^s, Le^ns и ILe^bH) условно отнесены к ней как коллекция.

Номенклатура антигенов Lewis

Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 20 апреля 2014

Полиморфизм антигенов Lu обусловлен молекулярными заменами (табл. 8.7).

Таблица 8.7

Молекулярная основа антигенов Lutheran

Действие ферментов

Антигены Lutheran разрушаются трипсином и а-химотрипсином. Папаин оказывает на них слабое редуцирующее действие. Моноклональные антитела aHTH-Lu^b не агглютинируют эритроциты, обработанные эндогликозидазой F, отщепляющей N-связанные олигосахариды, однако адсорбируются на моди­фицированных этим ферментом клетках и освобождаются при элюции (Parsons и соавт. [106]). Сульфгидрильные редуценты разрушают антигены Lutheran, что указывает на наличие в их структуре дисульфидных связей (Daniels [36], Levene и соавт. [81], Parsons и соавт. [106]).

Распределение в тканях, значение в биологии человека

Гликопротеины Lutheran широко представлены в тканях организма человека. Они обнаруживаются в печени с первых месяцев внутриутробного развития. Их находят в плаценте, стенках артерий различных органов, включая язык, мин­далины, трахею, пищевод, желудок, желчный пузырь, слепую и толстую киш­ки, кожу (Parsons и соавт. [105]). Транскрипты гена LU выявлены во всех изу­чавшихся тканях. Транскрипт размером 2,5 кб, кодирующий гликопротеиновый изомер с мол. масс. 85 кДа, не был выявлен только в клетках карциномы тол-стой кишки человека (Rahuel и соавт. [115]).

Гликопротеины Lutheran относят к семейству рецепторов адгезии и передачи межклеточных сигналов (Barclay и соавт. [7], Williams, Barclay [147]). Организация SF-доменов гликопротеина Lutheran (V-V-C2-C2-C2) идентична таковой маркера прогрессии меланомы [MUC18 (CD 146)]. Цитоплазматический домен изоформы 85 кДа содержит 8НЗ-связывающий мотив и 5 потенциальных участков фосфори-лирования, которые, по-видимому, выполняют функцию передачи сигналов в меж­клеточном взаимодействии (Parsons и соавт. [103,105], El Nemer и соавт. [48]).

Экстрацеллюлярные гликопротеины представлены ламинином, присутству­ющим во всех базальных мембранах. Он состоит из а-, 0- и у-цепей, контроли­руемых различными генами (Ayad и соавт. [5]). Предполагается существование 12 изоформ ламинина, образуемых 5 типами а-цепей, 3 типами (3-цепей и 3 ти­пами у-цепей. Гликопротеины Lutheran связывали ламинин в иммуноблоттин-ге и иммунопреципитации моноклональными антителами (Udani и соавт. [144]). Эритроциты лиц Lu_null рецессивного типа, которые не содержат гликопротеинов Lutheran, ламинин не связывали.

Изоформы гликопротеина 78 и 85 кДа одинаково связывают ламинин (Е1 Nemer и соавт. [50], Zen и соавт. [155]). Трансфекция человеческих и мьппиных эритролейкемических клеточных линий кДНК LUприводила к связыванию клет­ками растворимых и иммобилизированных форм ламинина (El Nemer и соавт. [50], Parsons и соавт. [103], Udani и соавт. [144]). Гликопротеин Lutheran специфи­чески и с высокой аффинностью связывался с изоформами ламинина, содержав­шими а5-цепи (Parsons и соавт. [103]). В экспериментах со связыванием ламинина различными изоформами гликопротеина Lu, в которых отсутствовали определен­ные домены, получены противоречивые данные. В одних случаях в связьшании ламинина участвовали терминальные N-домены (El Nemer и соавт. [49], Parsons и соавт. [103]), в других случаях -IgSF-домен 5 (Zen и соавт. [155]). Возможно гли­копротеин Lutheran имеет 2 участка для связывания ламинина.

Отмечено, что на эритроцитах больных серповидно-клеточной анемией кон­центрация гликопротеина Lu на 67 % выше, чем у здоровых, и эритроциты больных связывают большее количество ламинина (El Nemer и соавт. [50], [144, 155]). Адгезивные свойства таких эритроцитов повышаются. Прилипая к эндо­телию кровеносных сосудов, они вызывают окклюзии, характерные для патоге­неза серповидно-клеточной анемии.

Моделирование эритропоэза in vitro показало, что гликопротеины Lu появля­ются на эритроидных клетках позже протеина полосы 3 и Rh-протеина, прибли­зительно на стадии ортохроматических эритробластов (Bony и соавт. [10], Daniels, Green [37], Henke и соавт. [68], Southcott и соавт. [131]). Появление гликопротеи­нов Lu коррелирует со способностью связывать ламинин (El Nemer и соавт. [50]).

Parsons и соавт. [105,107] полагают, что вещество Lu способствует миграции эритроидных предшественников из печени плода в костный мозг.

У мышей обнаружен ген, кодирующий протеин, гомологичный на 72 % лами-нинсвязывающему белку человека (Parsons и соавт. [103], Rahuel и соавт. [114]).

Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 20 апреля 2014

Помимо антигенов Lu^a, Lu^b и Lu3 в систему Lutheran входят 16 других анти­генов: 12 часто встречающихся, 2 редко встречающихся и 2 с частотой 50-80 % (см. табл. 8.1). Шесть из них являются продуктами аллельных генов и образуют антитетичные пары: Lu6 и Lu9, Lu8 и Lul4, Au^a и Au^b. Антигены Lu4, Lu5, Lu7, Lul2, Lul3, Lu20 и Lu21 отсутствуют на эритроцитах Lu_null.

Антигены Lutheran локализуются в основном на гликопротеине Lu, многие слабо экспрессированы на эритроцитах новорожденных, не имеют рекомбина­ций и кроссинговера (Daniels и соавт. [33, 38], Levene и соавт. [80], Parsons и со­авт. [104], Reid и соавт. [116]).

Локализация детерминант Lull, Lul6 и Lul7 на гликопротеине Lu не доказа­на, поэтому по отношению к ним используют обозначение «пара-Lutheran».

Антигены Lull, Lul6 и Lul7 отсутствуют на эритроцитах Lu_null и In(Lu) рецессивного типа. Антиген Lul7 присутствует на эритроцитах Lu „ Х-ассоциированного типа.

Большинство антител Lutheran не вызывает гемолитических осложнений и ГБН.

Lu4

Bove и соавт. [12] нашли единственный образец антител airra-Lu4. Двое сибсов белой женщины группы Lu:-4, у которой были выявлены антитела, также имели фенотип Lu:-4. Все лица, кровь которых исследована с использованием указанной сыворотки (2700 человек, преимущественно доноров), имели фенотип Lu4+.

Антиген Lu4 размещается на втором IgSF-домене гликопротеина Lu (см. рис. 8.1).

Lu5

О выявлении антител к антигенам Lu5, Lu6 и Lu7 сообщил Marsh [87] на одном из рабочих совещаний Американской ассоциации банков крови.

Bowen и соавт. [13], Crawford [26], Marsh [87], Smart и соавт. [130] иденти­фицировали более 10 образцов антител анти-Ьи5. Эти антитела присутствова­ли как у европеоидов, так и у негроидов. При обследовании 423 неродственных лиц, преимущественно доноров европейцев, не было найдено ни одного с фе­нотипом Lu:-5 (Marsh [87]). Подобно антигенам Lu^a и Lu^b, антигенные участки Lu5 располагаются в N-терминальном домене IgSF гликопротеина Lu (Parsons и соавт. [104]) (см. рис. 8.1).

Lu6 и Lu9

Антигены Lu6 и Lu9 имеют высокую и низкую частоту соответственно, про­являют себя в серологических реакциях как продукты аллельных генов.

Антитела анти-Ьиб обнаружил Marsh [87]. Позднее появились другие сооб­щения о выявлении антител указанной специфичности (Dybkjaer и соавт. [47], Ellis и соавт. [52], Gibson и соавт. [56], Herron и соавт. [69], Issitt и соавт. [73], Wrobel и соавт. [151]).

Антиген Lu6 отсутствует на эритроцитах Lu _u всех трех указанных выше ти­пов (Marsh [87], Norman и соавт. [101]).

При исследовании выживаемости несовместимых эритроцитов, введенных сен-сибижзированным реципиентам, установлено, что антитела aHra-Lu6 клиниче­ского значения не имеют (Ellis и соавт. [52], Gibson и соавт. [56]). Аналогичные ис­следования, проведенные у пожилой женщины, имевшей антитела анти-Ьиб IgGl-субкласса, напротив, свидетельствовали об их способность вызвать разрушение эритроцитов in vivo. Этой больной были успешно перелиты эритроциты Lu_null.

По наблюдениям Herron и соавт. [69], эритроциты ребенка, родившегося у женщины, которая имела высокоактивные антитела anra-Lu6, давали отрица­тельную прямую пробу Кумбса; в сыворотке крови ребенка указанные антите­ла отсутствовали. Очевидно, антитела anra-Lu6 оказались не способны преодо­леть плацентарный барьер.

Molthan и соавт. [96] выявили антитела anra-Lu9 у родильницы одновре­менно с антителами airra-Lu^a. Антитела обнаружили с помощью прямой пробы Кумбса с эритроцитами всех трех ее новорожденных, однако каких-либо кли­нических проявлений ГБН не наблюдали. Отец детей имел фенотип Lu: 1,2,9. Исследование семьи показало, что антиген Lu9 контролируется локусом LU, хотя последний не являлся аллелем Lu^a и Lu^b. Среди 521 обследованного этой сывороткой 1,7 % имели антиген Lu9.

Еще один образец антител aHTH-Lu9 был найден у женщины, получившей множественные гемотрансфузии (Champagne и соавт. [21]).

Эритроциты выявленного Marsh [87] индивида Lu:-6, его сибсов, а так­же эритроциты другого из найденных лиц Lu:-6 реагировали с антителами анти-Ьи9. Это послужило доказательством того, что антигены Lu6 и Lu9 анти­тетичны и являются продуктами аллельных генов Lu⁶uLu⁹.

Эритроциты Lu_null всех трех типов были Lu:-6,-9. Описана семья, в кото­рой один индивид Lu:-6 (вероятно Lu⁶/Lu⁶) имел слабый антиген Lu9, а эри­троциты других его родственников (L^/Lu⁹) интенсивно реагировали с анти­телами анти-Ьи9. Антиген Lu^b у всех членов данной семьи был выражен нор­мально. Угнетение экспрессии антигена Lu9 в данной семье осталось без объ­яснения (Daniels [34]).

Полагают, что эпитопы Lu9 находятся на четвертом IgSF-домене гликопротеина Lutheran (Parsons и соавт. [104]).1).                            

Lu7

Антитела анти-Ьи7 субкласса IgG3 были найдены Marsh [87] у женщины Lu:-l,2,-7. Прямая проба Кумбса с эритроцитами родившегося у нее ребенка была отрицательная. Среди 285 обследованных доноров европейцев не оказалось ни одно­го Lu:-7 (Marsh [87]). Так же как и Lu9, антигенные эпитопы Lu7 находятся на чет­вертом IgSF-домене гликопротеина Lutheran (Parsons и соавт. [104]) (см. рис. 8.1).

Lu8 и Lul4

Антитела airra-Lu8 обнаружены МасШгоу и соавт. [83] в 1972 г. Позднее были описаны другие образцы антител этой специфичности (Kobuszewski и соавт. [78], Shirey и соавт. [126], Watt и соавт. [146]). Один из них показал положительные ре­акции в пробе с монослоем моноцитов и, очевидно, явился причиной умеренно выраженной посттрансфузионной реакции (Kobuszewski и соавт. [78]).

Антигенные эпитопы Lu8 находятся на втором IgSF-домене гликопротеина Lutheran (Parsons и соавт. [104]) (см. рис. 8.1).

В 1977 г. Judd и соавт. [74] описали антитела у женщины, получившей гемо­трансфузии и сеансы гемодиализа. Антитела реагировали с эритроцитами 14 из 580 доноров (2,4 %). Их обозначили aHTH-Lul4. Они реагировали с эритроцита­ми трех неродственных лиц Lu:-8, что дало основание считать антигены Lu8 и Lul4 антитетичными. Антиген Lul4 чаще присутствовал у лиц Lu(a-b+), чем у лиц Lu(a+b+), что дало основание предполагать аллельные взаимоотноше­ния контролирующих генов. Моноклональные антитела aHra-Lu^b реагировали более интенсивно с эритроцитами Lu:14 по сравнению с эритроцитами Lu:-14 (Zelinski и соавт. [153]).

Cantrell и соавт. [19], Marsh и соавт. [90], Crawford [26] выявили много дру­гих образцов анти-Lu 14-антител. В одном случае антитела анти-Lu 14 класса IgG имели естественное происхождение.

Частота антигена Lul4 среди 610 датских и 600 английских доноров соста­вила 1,5 и 1,8 % соответственно.

Lul2

Первый образец антител анти-Ьи12 был выявлен Sinclair и соавт. [128] у жен­щины польско-украинского происхождения. Ее эритроциты были Lu(a-b+^w), антиген Lu^b был слабо выражен. Эритроциты ее отца содержали слабый ан­тиген Lul2, ее сестра имела фенотип Lu(a-b+^w) со слабо выраженным Lu^b. Другие антигены Lutheran на эритроцитах женщины были выражены слабо. При обследование семьи выявлена рекомбинация генов, контролирующих анти­ген Lul2 и выделительство групповых субстанций АВН. Вероятность того, что синтез антигена Lul2 находится под контролем гена LU, составила 9:1.

Эритроциты всех 1050 канадских доноров, исследованные с помощью сыво­ротки анти-Ьи12, дали положительную реакцию. В одном случае реакция была слабо выражена: донор имел фенотип Lu(a-b+^w).

Второй образец антител анти-Lu 12 был найден у женщины белой расы с фе­нотипом Lu:-12. Двое ее сибсов также имели группу Lu:-12 (Shirey и соавт. [127]). В экспериментах по выживаемости эритроцитов in vivo указанные анти­тела вызывали ускоренное разрушение эритроцитов Lul2.

Локализация антигенных эпитопов Lul2 на гликопротеине Lutheran точно не установлена. Результаты иммунопреципитации специфическими антителами по­зволили предположить, что участок Lul2, вероятно, расположен вблизи Lu^b, на первом IgSF-домене гликопротеина Lutheran (Parsons и соавт. [104]) (см. рис. 8.1).

Lul3

Сообщение о выявлении первого образца антител анти-Lu 13 (антител Hughes) не было опубликовано. Второй образец антител этой специфичности был выявлен у финской женщины, однако исследовать ее эритроциты с антите­лами Hughes не удалось (Sistonen и соавт. [129]). В этой финской семье, помимо пропозиты, трое сибсов имели фенотип Lu:-13 (Marsh и соавт. [88]).

Установлено (Parsons и соавт. [104]), что эпитопы Lul3 находятся на пятом IgSF-домене гликопротеина Lutheran (см. рис. 8.1).

Аи^аиАи^ь^

Антигены Auberger (Оберже*) - Au^a (LU18) и Au^b (LU19) - представляют четвертую пару антитетичных антигенов системы Lutheran. В течение мно­гих лет антиген Аи^а рассматривали как фактор, представляющий самостоя­тельную групповую систему независимую от локуса LU. Основанием для это­го служило описание семьи, в которой была обнаружена рекомбинация ге­нов Аи^аи Lu^a (Salmon и соавт. [120]). При повторном обследовании указанной семьи сыворотками анти-Аи^а и анти-Аи^ь выявлена неточность первоначаль­ного заключения. Напротив, полученные данные указывали на связь антиге­нов Auberger и Lutheran (Daniels и соавт. [39]). Синтез указанных антигенов

I   В английской фонетике правильным считается произношение Обэджи, но не Аубергер (Issitt, Anstee [72]), в русской фонетике В Оберже (П.Н. Косяков [2], М.А. Умнова [1]).

контролировал один и тот же ген (Zelinski и соавт. [153]). Эритроциты лиц Lu_null имеют фенотип Au(a-b-) (Crawford и соавт. [28], Frandson и соавт. [54], Norman и соавт. [101]).

Первый образец антител анти-Аи^а был идентифицирован в 1961 г. Salmon и соавт. [121]. Миссис Auberger получала многократные гемотрансфузии, в сыво­ротке ее крови содержались также антитела анти-Е, анти-К, aHra-Fy^b и HLA.

Drachmann и соавт. [42], Race и Sanger [113] сообщили о выявлении двух об­разцов анти-Аи^а-антител, при этом обе сыворотки содержали другие антиэри-троцитарные антитела.

Антитела анти-Аи^ь, открывающие антиген Au^b, антитетичный Аи^а, были описаны в 1989 г. Frandson и соавт. [54], сыворотка содержала также анти-1д1^а-антитела. Вскоре были найдены 3 другие сыворотки анти-Аи^ь, во всех сы­воротках также содержались антитела анти-Lu³ (Moulds и соавт. [98]).

Антиген Аи^а имеет частоту 80-90 %, Au^b - 50 % среди европеоидов, 68 % среди негроидов (Frandson и соавт. [54]). Частота генов и фенотипов Auberger приведена в табл. 8.6.

Таблица 8.6

Частота генов и фенотипов Оберже

Методами иммунопреципитации и иммуноблоттинга показана локализа­ция антигенных эпитопов Аи^а и Au^b на гликопротеине Lutheran, Au^b локализо­ваны на самом близком к поверхности мембраны IgSF-домене (Parsons и соавт. [104]). Секвенирование экзонов 11 и 12 гена LU выявило в последнем точко-вую мутацию А 1637 G, приводящую к замене аминокислот в положении 539. Антигенные различия Au^a/Au^b обусловлены присутствием в позиции 539 трео­нина (Аи^а) или аланина (Au^b) (Parsons и соавт. [104]).

Lu20

Антитела aHTH-Lu20 были найдены Levene и соавт. [80] в сыворотке больно­го талассемией, получавшего многократные гемотрансфузии. Помимо указан­ных антител сыворотка больного содержала антитела анти-С, анти-К и анти-Fy^b. Наследование гена LU20 в семьях не было прослежено.

arsons и соавт. [104]) установили, что антигенные эпитопы Lu20 располага-тся на третьем IgSF-домене гликопротеина Lutheran (см. рис. 8.1).

Lu21

Первые данные о выявлении антител против еще одного часто встречающегося антигена системы Lutheran (Lu21), появились в 2002 г.; результаты исследования опубликованы в 2004 г. (Katamatic Crew и соавт. [76]). Подобно другим антигенам системы Lutheran Lu21 был слабо выражен на эритроцитах новорожденных и отсутствовал на эритроцитах Lu   всех трех типов.                                                                                                                                                                                                                                                   

Секвенирование локуса LU сенсибилизированной женщины Lu:-21, цинственной носительницы aHTH-Lu21 -антител, выявило гомозиготность о точковой мутации С 282 в экзоне 3, ведущей к аминокислотной замене sp 4 Glu. Антитела aHTH-Lu21 не вызвали ГБН ни у одного из четырех де-ей указанной женщины, несмотря на то, что их эритроциты содержали ан­тиген Lu21.

I Пара-Lutheran

К указанной группе антигенов относят Lull, Lul6 и Lul7.

Антитела анти-Lull, обнаруженные Gralnic и соавт. [59] у женщины европейки, реагировали положительно с эритроцитами 500 обследованных доноров. Позднее было найдено еще 2 образца антител со специфичностью анти-Lull (Crawford [26]).

Антитела анти-Lu 16 были обнаружены Sabo и соавт. [119] вместе с анти-Lu^b у негритянки, имевшей фенотип Lu(a+b-). Результаты обследования ее семьи не позволили судить о характере наследования гена, контролирующе­го синтез Lu 16.

Единственный образец антител anra-Lul7 был выявлен Turner [143] у ита­льянской женщины. Антитела укорачивали продолжительность жизни эритро-

цитов Lu:17 в тестах in vivo (Heddle, Moorphy [67]). шНаряду с антителами анти-Lull, -Lul6 и -Lul7 были описаны антитела, ко­торые идентифицировали часто встречающиеся антигены, напоминавшие по воим серологическим параметрам пара-Lutheran. Однако окончательного за-ючения по этим находкам не сделано.

Описан редко встречающийся антиген «Singleton». Полагали, что он нахо-|игся в антитетичной связи с Lu5 и присвоили ему обозначение LulO. Однако исследования остались незавершенными, в связи с чем антиген Singleton ис­ключен из системы Lutheran, и обозначение LulO более не используют.

Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 20 апреля 2014

В 1986 г. Norman и соавт. [101] обследовали большую австралийскую семью (рис. 8.4), пятеро членов которой имели фенотип Lu_null с характеристиками как ре­цессивного, так и доминантного типа. Эритроциты типировались как Lu(a-b-), слабо адсорбировали анти-Ьи^ь-антитела, содержали антиген AnWj; экспрессия антигена i была повышена. Экспрессия антигена Р1 была слабой, хотя это могло быть обусловлено присутствием слабого гена Р1 в данной семье.

Х-сцепленное наследование Lu [101]. Темными фигурами обозначены лица Lu(a-b-), светлыми - Lu(a-b+). Все лица Lu _ц - мужчины (XS2/Y), унаследовавшие ген XS2 от своих матерей, являющихся гетерозиготами XS2/XS1.

Особенностью обнаруженного варианта Lu_nu являлось наследование иницииру­ющего гена. Возникновение фенотипа Lu в указанной семье не могло быть обу­словлено геном In(Lu), поскольку родители троих лиц Lu имели группу Lu(a-b+). Возможную гомозиготность по рецессивному гену Lu также исключили, поскольку в этом случае ген Lu должен был иметься одновременно у 5 различных неродственных лиц, что представляется маловероятным. Характер наследования гена указы-
вал на его рецессивный тип, ассоциированный с Х-хромосомой. Все лица Lu_null были мужчинами, среди представителей следующего поколения не было лиц указанного фенотипа (см. рис. 8.4). Регуляторный локус был маркирован как XS, обычный часто
встречающийся аллель - XS1, а редкий ингибиторный, вызывающий супрессию генов LU, -XS2. В данной семье мужчины с фенотипом Lu_null были гемизиготными по ингибиторному аллелю (XS2/Y), женщины - гетерозиготными (XS1/XS2).

Williamson и соавт. [148] привели случай аутоиммунной тромбоцитопении у мужчины, временно утратившего антигены Kell и имевшего антитела анти-Ku (KEL5). Его эритроциты нормально экспрессировали антигены Lu^a, Lu^b и антиген LW^a системы LW. Через год экспрессия антигенов Kell нормализовалась, анти-Ku-антитела исчезли, однако имела место утрата антигенов Lutheran, а сыворотка крови содержала антитела анти-ЬиЗ. Экспрессия антигена LW^a резко снизилась.

Poole и соавт. [111] наблюдали еще одого больного группы Lu(a-b+) с ауто­иммунной тромбоцитопенической пурпурой. В течение заболевания его фено­тип сменился на Lu(a-b-), экспрессия антигенов AnWj и LW оставалась нор­мальной. Сыворотка крови содержала анти-Ьи-подобные антитела.

Категория: Системы Lutheran и Lewis

Опубликовано: 20 апреля 2014

Обнаружение антител анти-ЬиЗ в сыворотке крови одной американской не­гритянки давало основания полагать, что она имела рецессивный тип Lu_nulI, од­нако при обследовании ее семьи это доказать не удалось (Melonas, Note [91]).

Дополнительные сведения в пользу существования молчащего аллеля Lu были получены Brown и соавт. [15]. Авторы нашли семьи, в которых родители Lu(a+b+) х Lu(a-b+) имели детей с фенотипом Lu(a+b-). Вероятно, в этих случаях имела место гетерозиготность родителей Lu(a-b+) по гену Lu'. В браках родителей Lu^a/Lu^bх Lu^b/Lu~ были дети Lu^a/Lu~₉ что фенотипически проявлялось как Lu(a+b-).

На эритроцитах лиц с рецессивным типом Lu_null все, без исключения, анти­гены системы Lutheran отсутствуют. Их не удавалось обнаружить методом ад­сорбции - элюции.

В одной японской семье пробанд Lu(a-b-), имевший антитела анти-ЬиЗ, оказался гомозиготным по нонсенс-мутации С 733 А в экзоне 6 гена LU. Последняя преобразует кодон Cys 237 в стоп-кодон (Mallinson и соавт. [85]). Родители пробанда были гетерозиготными по указанной мутации.

Lu_null доминантного типа

Обследование трех поколений семьи первого из выявленных пробандов Lu_nullпоказало, что этот признак находится под контролем гена, имеющего доминантный тип наследования (Crawford и соавт. [27]). Позднее появились другие аналогичные сообщения (Contreras, Tippett [25], Gibson [57], Rowe и соавт. [118], Shaw и соавт. [123], Stanbury, Francis [133], Taliano и соавт. [134], Wright, Moore [150]).

В отличие от лиц Lu _u рецессивного типа, которых выявляли случайно в свя­зи с наличем у них антител, лиц Lu " доминантного типа обнаруживали при плановом фенотипировании доноров сыворотками анти-Lu³ и aHra-Lu^b.

В обследованных семьях 52 пробанда Lu_null имели 63 сибса Lu_null и 61 сибса не Lu_null (Gibson [57], Race, Sanger [113], Rowe и соавт. [118], Shaw и соавт. [123]). Статистический анализ результатов обследования детей у ро­дителей Lu_null х He-Lu_null показал, что соотношение частоты фенотипов рав­но 1:1. Таким образом, имелись все основания полагать, что ген Lu „ является кодоминантным.

Taliano и соавт. [134] обозначили супрессорный ген, приводящий к Lu_nп доминантного типа, буквами In(Lu). Авторы предположили, что должен су­ществовать его аллель in(Lu), не оказывающий супрессорного эффекта на антигены системы Lutheran. Однако последующее открытие супрессорно­го действия In(Lu) на антигены Р1 и i, не входящие в систему Lutheran, по­будило Race и Sanger [113] высказать сомнения относительно концепции Taliano и соавт.

Marsh и соавт. [89] предлагали переименовать In(Lu) в SYN-1 и SYN-1В, нарушающие нормальный биосинтез некоторых групповых антиге­нов, и SYN-1A, в присутствии которого биосинтез происходит нормально.

Эта номенклатура была признана неудовлетворительной, поскольку в ней подразумевалось, что ген In(Lu) модифицирует биосинтез на уровне субстанций-предшественников, в то время как механизм действия этого гена неизвестен (Shaw, Tippett [124]). По этой причине в настоящее время предпочитают использовать обозначения In(Lu) (для гена) и In(Lu) (для фе-нотипических проявлений).

Эритроциты лиц, имеющих ген In(Lu), не обладают истинным феноти­пом Lu_null, поскольку способны адсорбировать антитела системы Lutheran (Moulds, Shah и соавт. [97], Stanbury, Francis [133], Telen и соавт. [136], Tippett [139]). Однако отрицательные результаты экспериментов с адсорбцией - элю-цией антител системы Lutheran нельзя расценивать как абсолютное доказа­тельство того, что обследуемый относится к группе Lu _п рецессивного типа.

Некоторым исследователям не удавалось элюировать антитела Lutheran с эритроцитов In(Lu) (Crawford и соавт. [27], Wright, Moore [150]).

В то же время адсорбция - элюция антител aHTH-Lu^a и aHTH-Lu^b позволяют выявить истинный рецессивный тип Lu_null у некоторых лиц In(Lu). Посемейные исследования выявили рекомбинацию генов LU и In(Lu) (Taliano et. al. [134]). На рис. 8.2 представлена родословная семьи, показывающая независимость су­прессорного гена In(Lu) от локуса LU. Исследования в других семьях позволи­ли установить рекомбинации In(Lu) и генов, контролирующих системы АВО, MNS, PI, Rh, Kell, Kidd, Cartrwrigh, Colton, Se и HLA (Rowe и соавт. [118], Shaw и соавт. [123]). Статистический анализ подтвердил отсутствие коррелятивной связи гена In(Lu) с перечисленными локусами групп крови.

О выявлении каких-либо антител системы Lutheran в сыворотках крови лиц, имеющих фенотип In(Lu), ни разу не сообщалось. Вероятно, иммунная система таких индивидов не реагирует на антигенные детерминанты указан­ной системы как на чужеродные. Антитела не были найдены в сыворотках крови 12 женщин группы In(Lu), родивших детей с нормально выраженны­ми антигенами Lu (Shaw и соавт. [123], Wright, Moore [150]).

Ген In(Lu) подавляет синтез антигенов Lutheran. Кроме того, на эритроцитах лиц In(Lu) снижена экспрессия ряда других антигенов, не относящихся к систе­ме Lutheran. Интересен тот факт, что у индивидов с рецессивным типом Lu_nullэти антигены выражены нормально.

Присутствие гена In(Lu) вызывает супрессию антигена Р1, хотя этот эф­фект менее выражен, чем в отношении факторов Lutheran. Crawford и со­авт. [27], Gibson [57], Shaw и соавт. [123] привели данные обследования 236 человек, членов 41 семьи, среди которых были индивиды In(Lu) (табл. 8.5). Распределение антигенов ¥_х и Р₂ среди носителей фенотипа In(Lu) существен­но отличалось от распределения этих антигенов у лиц с фенотипом He-In(Lu). У 36 лиц Lu_null антиген ?_х был выражен нормально, что могло быть обусловле­но присутствием высокоактивного аллеля Р1⁺, или гомозиготностью по нему, или обеими причинами одновременно. У лиц с рецессивным типом Lu л вы­раженность антигена ?_х также не отличалась от нормы. В 3 семьях у родите­лей P₂Lu_null х P₂Lu(a-b+) были дети PjLu(a-b+), что подтверждает ингибиру-ющий эффект гена In(Lu) на ген Р¹

Наследование фенотипа In(Lu) в семье жителей о. Сардиния. Италия. Ген In(Lu) (черные фигуры) и фенотипы членов семьи по системе Р1 [25]. Члены семьи II-1 и Ш-4 имеют фенотип Р₂ в отсутствие теш1п(Ьи)₉ в то время как 1-2 имеет фенотип Pj и обладает геном In(Lu), 1-2, вероятно, гомозиготна по гену Р1 • поэтому экспрессирует Р1 в присутствие тев&1п(Ьи).

Ген In(Lu) угнетает также экспрессию антигенов системы Knops: Кп^а, МсС^а, Sl^a и антигенов Yk^a, Cs^a коллекции 205 Cost (Daniels и соавт. [40]). Известно,

что указанные антигенные детерминанты являются рецепторами компонентов СЗ/С4 системы комплемента, CR1 (CD35), однако In(Lu) не влияет на экспрес­сию CR1 (Moulds, Shah [97]).

Ингибирующий эффект In(Lu) установлен также в отношении антигена MER2 системы RAPH (Daniels [36]).

Интересный феномен, связанный с фенотипом по системе Lutheran, обна­ружен в экспериментах с лошадиным антилимфоцитарным иммуноглобули­ном, который применяют в трансплантологии для профилактики кризов от­торжения. Оказалось, что он значительно слабее реагирует с эритроцитами In(Lu) по сравнению с любыми другими, включая Lu_null (Anderson и соавт. [4], Postoway, Garratty [112]).

Слабая агглютинация эритроцитов In(Lu) отмечена также с конканавали-ном А - растительным лектином, агглютинирующим эритроциты человека. Указанный лектин реагирует главным образом с протеином полосы 3 (band 3 protein), транспортером анионов. В связи с этим высказано предположение, что гликозилирование анионных транспортеров на клетках In(Lu) отличается от нормального (Udden и соавт. [145]).

Вместе с тем на эритроцитах имеется уникальная структура - CDw75, вы­раженность которой усиливается в присутствии гена In(Lu). Этот лиганд, по­мимо эритроцитов, содержится в лимфоцитах и распознается моноклональ-ными антителами. Биохимическая природа и физиологические функции эпи-топа CDw75 до конца не выяснены, известно лишь, что для его экспрессии необходимо присутствие N-гликанов с остатками а2,6-сиаловых кислот (Bast и соавт. [8], Guy и соавт. [63, 64]). Эпитоп CDw75 выражен нормально на эритроцитах лиц Lu_null рецессивного типа, но отсутствует у индивидов Lu_nullХ-ассоциированного (Tippett, Guy [141]). На эритроцитах пуповинной крови CDw75 отсутствует.

Лица, имеющие фенотип In(Lu), соматически здоровы и не обнаруживают каких-либо признаков анемии (снижение уровня гемоглобина, ретикулоцитоз), хотя у членов трех семей, наследовавших In(Lu), имелся акантоцитоз (Ballas и соавт. [6], Udden и соавт. [145]). Выживание аутологичных эритроцитов In(Lu) in vivo было нормальным (Ballas и соавт. [6]), осмотическая резистентность эри­троцитов соответствовала норме. Инкубация эритроцитов In(Lu) в плазме в те­чение 24 ч при 37 °С повышала их осмотическую резистентность. При этом от­мечали утрату значительной части ионов калия и относительное повышение со­держания натрия; в целом концентрация катионов снижалась. Эти изменения позволяют объяснить повышение осмотической резистентности (Udden и соавт. [145]). Выраженный гемолиз эритроцитов In(Lu) наблюдали при хранении их в растворе Алсевера (глюкозидцитратный консервант для эрмассы) при 4 °С, раз­рушение клеток уменьшалось после добавлении глюкозы или АТФ.

По мнению Tippett [140], ингибирующий эффект гена In(Lu)₉ оказываемый одновременно на несколько различных локусов, контролирующих групповые антигены эритроцитов, является уникальным. Моделей, которые могли бы объ­яснить этот феномен, пока не предложено.

Marcus и соавт. [86] высказали предположение, что Lu_null доминантного типа может быть результатом действия гликозилтрансферазы, присоединяющей до­полнительные сахара к структуре-предшественнику.

Udden и соавт. [145] полагают, что частичное редуцирование рецепторов для конканавалина А на эритроцитах In(Lu) обусловлено необычным гликозижровани-ем углеводных последовательностей, общих для гликопротеинов и гликолипидов.

Shaw и Tippett [124] считают, что в присутствии In(Lu) могут возникать кон-формационные изменения некоторых мембранных структур, затрудняющие их связывание с антителами.

По мнению Daniels и соавт. [40], ген In(Lu) кодирует ДНК-связывающий про­теин или какой-либо из факторов транскрипции, ингибирующий функции ге­нов, ответственных за синтез мембранных структур.