Часто встречающиеся антигены (серия 900) продолжение

Таблица 31.2 Распределение антигенов серии 901 у разных народов

Sd^a

Антиген Sd^a (Sid) встречается среди европеоидов с частотой более 90 %, что послужило основанием для включения его в серию 901. Он занимает осо­бое место среди других часто встречающихся антигенов. Не исключено, что этот антиген представляет самостоятельную групповую систему. Задолго до того, как Macvie и соавт. [57], Renton и соавт. [87] сообщили о выявлении анти-Sd^a-aHTHTe^ образцы сывороток, содержавшие такие же антитела, изучали в не­скольких лабораториях.

Агтлютинабельные свойства эритроцитов Sd(a+) варьируют в широких пре­делах. Примерно в 1 % случаев наблюдались относительно крупные агглютина-ты, состоявшие из 10-20 эритроцитов, в 80 % случаев реакция была выражена умеренно, слабые реакции показали около 10 % образцов эритроцитов (Macvie и соавт. [57]). Антитела анти-Sd³ низкой активности реагировали только с неко­торыми образцами эритроцитов Sd(a+). В связи с этим они могли быть ошибоч­но приняты за антитела другой специфичности.

Агглютинация эритроцитов Sd(a+) носит смешанный характер: в поле зрения наряду с агглютинатами присутствует много свободных эритроцитов, не извлеченных в агглютинаты. Если из пробы отделяли неагглютинированные эритроциты и проводили с ними реакцию повторно, то вновь наблюдали карти­ну смешанной агглютинации (Renton и соавт. [87]).

В 1968 г. Cazal и соавт. [20] обнаружили в одной мавританской семье редко встречающийся антиген Cad. Агглютинация эритроцитов Cad+ была сильно выра­жена и вызывалась практически любой аллогенной сывороткой. Эритроциты Cad+ обладали полиагглютинабельными свойствами. Отличительной особенностью эри­троцитов Cad+ являлось то, что они реагировали с лектином Dolichosbiflorusне­зависимо от принадлежности к группе крови О, А или В системы АВО. Известно, что этот лектин агглютинирует только эритроциты А .

Sanger и соавт. [89] пришли к выводу, что антиген Cad в действительности пред­ставляет собой полиагглютинабельный вариант антигена Sd^a. Агглютинабельность эритроцитов Sd(a+) с лектином Dolichosbiflorusварьировала так же сильно, как и с аллогенными сыворотками airra-Sd^a. На основании этого рядом авторов выделен фенотип Sd(a++), или супер Sid (Cazal и соавт. [18, 19], Yamaguchi и соавт. [120], Lewis и соавт. [53], Lopez и соавт. [55], Gerbal и соавт. [41]).

Для дифференцировки фенотипов Sd(a++) и Sd(a+) по агтлютинабельно-сти Cazal и соавт. [18, 19] предложили обозначения Cadi, Cad2, Cad3 и Cad4. Эритроциты Sd(a-H-), дающие с лектином Dolichosbiflorusнаиболее интенсив­ные реакции, отнесены к Cadi.

Эритроциты членов упомянутой выше мавританской семьи давали положи­тельные реакции с большинством аллогенных сывороток и маркировались как Sd(a++) супер Sid (Cazal и соавт. [20]).

Полиагтлютинабельные свойства некоторых образцов эритроцитов Sd(a++) проявлялись только при использовании высокочувствительных методов иссле­дования (Lopez и соавт. [55], Gerbal и соавт. [41]).

По своему характеру агглютинабельность эритроцитов Sd(a-H-) отличается от других форм полиагглютинабельности.

Высказано предположение (Race, Sanger [84]), что слабые анти^^а-антитела присутствуют в сыворотках крови большинства людей, поэтому способны аг­глютинировать эритроциты Sd(a++). Интересен тот факт, что сыворотки лиц Sd(a++) не реагируют с эритроцитами Sd(a++).

Способность различных образцов эритроцитов адсорбировать анти-Sd^a-aHTHTefla зависит от степени экспрессии антигена Sd^a на клетках. Наиболее выраженной адсорбционной способностью обладают эритроциты Sd(a-H-) (Stringarm и соавт. [102]).

Вещество Sd^a присутствует в слюне лиц Sd(a+), о чем свидетельствовала нейтра­лизация сывороток aHTH-Sd⁸ их слюной (Macvie и соавт. [57], Morton и соавт. [65]). Эта субстанция определялась также в сыворотке крови и молозиве. Количество веще­ства Sd^a у новорожденных больше чем у взрослых. Наиболее высокие концентгжции вещества Sd^a обнаружены в меконии и моче новорожденных (Morton и соавт. [65]).

Для определения Sd^a-4>eHOTHna наиболее приемлемым в практическом от­ношении оказался метод ингибиции анти^^а-антител мочой обследуемых. Эритроциты Sd(a-) не обладали способностью адсорбировать группоспецифи-ческое вещество Sd^a из содержащих его жидких субстратов. Они не агглютини­ровались антителами анти-Sd⁸ после инкубации в плазме лиц Sd(a+) и Sd(a++) (Macvie и соавт. [57], Race и Sanger [84]).

Группоспецифическая субстанция Sd^a обнаружена у 12 видов млекопита­ющих (Morton и соавт. [65]). В моче морских свинок ее концентрация оказа­лась исключительно высокой и поэтому этот материал считается наилучшим для идентификации антител анти-Sd³ методом ингибиции гемагглютинации. Вещество Sd^a отсутствовало у птиц (Morton и соавт. [65]).

У человека высокие концентрации группоспецифического вещества Sd^aобнаружены в почках (Morton и соавт. [65, 66]). Высказывались предполо­жения, что эта особенность почечной ткани влияет на приживление транс­плантированного органа (Morgan и соавт. [64]). Субстанция Sd^a присутству­ет также в тканях толстой кишки и желудка, в то время как в тонкой киш­ке, мышцах, печени, селезенке и головном мозге она отсутствует (Pickles, Morton [78]).

Антиген Sd^a встречается у европейцев с частотой 89,3-91,4 % (Macvie и со­авт. [57], Renton и соавт. [87], Conte, Sefanini-Cessi [23]). Однако эти данные по­лучены при исследовании эритроцитов. При определении антигена Sd^a методом ингибиции антител мочой обследуемых установлена более высокая частота это­го антигена - 93,4-96,1 % (Morton и соавт. [65], Conte, Sefanini-Cessi [23]).

По расчетным данным, частота генотипа Sd^a/Sd^a- 64,48 %, Sd^a/Sd- 31,64 %, Sd/Sd-3,SS%-

Фенотип супер-Sid [Sd(a++)] у жителей Европы встречается редко. В стра­нах Дальнего Востока его частота несколько выше (табл. 31.3).

При обследовании 168 членов 55 семей установлен доминантный тип насле­дования гена Sd" (Cazalи соавт. [18-20], Yamaguchi и соавт. [120], Lewis и соавт. [53], Gerbal и соавт. [41], Stringarm и соавт. [102], Lopez и соавт. [56]).

Таблица 31.3 Частота фенотипа Sd(a++) в некоторых популяциях

Исследования показали, что антиген Sd^a не относитсяИРсте-Ш«даО, MNS, PI, RH, LU, KEL, FY, Ж, Xg, DO и ХК (Macvie и соавт. [57], Lewis и соавт. [53], Gerbal и соавт. [41]).

В одной канадской семье выявлена слабая ассоциация фенотипа Sd(a+) с ан­тигеном Wr(a+) системы Diego (Lewis и соавт. [53]).

По наблюдениям Macvie и соавт. [57], Renton и соавт. [87], Pickles, Morton [78], эритроциты всех без исключения новорожденных были Sd(a-). В течение 10 недель после рождения они трансформировались в Sd(a+). Эритроциты ре­бенка, который имел отца Sd(a++), на момент рождения не агглютинировались лектином Dolichosbiflorus, однако через полгода обрели эту способность, т. е. стали Sd(a++) (Gerbal и соавт. [41]).

У беременных частота фенотипа Sd(a-) выше, чем у небеременных (Macvie и соавт. [57], Pickles, Morton [78], Spitalnik и соавт. [99]). В течение I триместра беременности этот фенотип выявлен у 22 % женщин, ближе к родам - у 36 %, после родов - у 25 % (Spitalnik и соавт. [99], Pickles, Morton [78]). У большин­ства беременных Sd(a-) группоспецифическое вещество Sd^a, отсутствовавшее на эритроцитах, определялось в моче (Morton и соавт. [65]).

Macvie и соавт. [57], Renton и соавт. [87] при исследовании сывороток крови доноров эритроцитами Sd(a+) показали, что примерно 1 % здоровых лиц содер­жат анти-8ё^а-антитела. Антитела выявляли чаще, если для скрининга использо­вали эритроциты Sd(a++) супер-Sid.

Эритроциты Cad агглютинируются большинством аллогенных сывороток aHTH-Sd^a. Эти антитела обычно представлены IgM и проявляют активность при 20 °С (Macvie и соавт. [57], Renton и соавт. [87], Pickles, Morton [78]). Найдены также анти^^а-антитела IgG (Spitalnik и соавт. [99], Silvergleid и соавт. [94]).

В большинстве случаев антитела анти-Sd³ не проявляли себя как клиниче­ски значимые (Macvie и соавт. [57], Pickles, Morton [78], Spitalnik и соавт. [99], Colledge и соавт. [22]). Однако трансфузии эритроцитов Sd(a+) реципиентам Sd(a-), имевшим анти^^а-антитела, еще более усиливали антителогенез, за­метно повышая долю анти^^а-антител класса IgG (Spitalnik и соавт. [99]).

Эксперименты по приживлению эритроцитов Sd(a+) у сенсибилизирован­ных реципиентов показали, что антитела анти-Sd³ существенно не сокраща­ли срок циркуляции эритроцитов, даже если последние содержали антиген Sd(a++) супер-Sid (Peetermans, Cole-Dergent [77], Reznicek и соавт. [88]).

Тем не менее имеется два описания гемолитических посттрансфузионных реакций у лиц, имевших антитела класса IgM, после переливания им эритро­цитов Sd(a++) супер-Sid (Peetermans, Cole-Dergent [77], Reznicek и соавт. [88]).

Как отмечалось выше, антиген Sd^a может быть выявлен как с помощью ал-лоиммунных сывороток, так и лектина Dolichosbiflorus, который реагирует с ^-терминальным участком Л^-ацетилгалактозамина. Лектин Dolichosbiflorusдалютинирует эритроциты А,, Тп+ и Sd(a++), которые несут специфическую ,|р®рминанту, распознаваемую этим лектином (Bird [3], Bird, Wingham [5].

Stringarm и соавт. [102]). Указанная детерминанта наиболее выражена на эри­троцитах Sd(a++). Реакция ингибируется iV-ацетилгалактозамином. В опреде­ленных разведениях или после частичной адсорбции обычными эритроцита­ми экстракты из Dolichosbiflorusпригодны для поиска эритроцитов Sd(a++). Повторные адсорбции лектинов Dolichosbiflorusэритроцитами А, Тп+ и Sd(a++) приводили к полному истощению их специфической активности.

Агглютинацию эритроцитов Sd(a++) вызывают также лектины из семян шал­фея Salviahorminum, Salviafarinaceaи пустырника обыкновенного Leonuruscar-diaca(Bird, Wingham [4,6], Moore, Marsh [63]), а также экстракты из печени вино­градных улиток Helixpomatiaи Helixaspersa(Cazal и соавт. [19], Myllida и соавт. [68], Bird, Wingham [7], Uhlenbruck и соавт. [109], Bizot [8]). Агглютинация, как и в случае с лектином Dolichosbiflorus, ингибировалась А/-ацетилгалактозамином (Bird, Wingham [4-7], Uhlenbruck и соавт. [109]). Специфическую активность лек­тинов из семян шалфея по отношению к эритроцитам Sd(a++) и Тп+ удавалось разделить путем дифференциальной адсорбции эритроцитами соответственно Тп и Sd(a++) (Bird, Wingham [6]). Лектины из пустырника реагировали с эритроцита­ми Тп+ слабо, поэтому путем небольшого разведения их можно было превратить в реагент для идентификации группы Sd(a++) (Bird, Wingham [4]). Интересно от­метить, что лектины из бобов Phaseoluslunatisи Phaseoluslimensis, специфичные по отношению к антигену А,, не агглютинировали эритроциты Sd(a++), несущие высокоагтлютинабельный антиген Sd^a (Myllida и соавт. [68], Bird, Wingham [7], Uhlenbruck и соавт. [109]).

Сыворотки крови цыплят содержат естественные антитела, реагирующие с эри­троцитам Sd(a++) (Bizot, Cayla [9]). После иммунизации кур эритроцитами Sd(a++) сыворотки их крови приобретали способность агглютинировать все образцы эри­троцитов Sd(a+) человека в непрямой антиглобулиновой пробе (Bizot, Cayla [9]).

Отделяемую фракцию анти-Тп-антител обнаружили Lockyer и соавт. [54] в сыворотке крови африканского иероглифового питона Pythonsebae. Змеи это­го вида неядовитые. Осталось неизвестным, содержатся ли антитела (агглюти­нирующие или гемолизирующие) в сыворотке крови ядовитых змей, яд которых при попадании в кровь человека вызывает гемолиз эритроцитов.

Исследования с различными образцами лектинов показали, что степень экспрессии антигена Sd^a зависит от того, посредством какой связи, а или р, TV-ацетилгалактозамин соединяется с галактозой (Bird, Wingham [7], Uhlenbruck и соавт. [109], Donald и соавт. [30]).

В 1970 г. Morton и Тепу [67] выделили Sd^a-aicraBHbm субстрат из мочи че­ловека посредством преципитации этиловым спиртом. Десятью годами позд­нее было показано, что Sd^a-aicraBHocTb мочи обусловлена белком Тамма -Хорсфалла, который содержится в моче в больших количествах (Son и соавт. [98], Kokot, Dulawa [50]). Этот гликопротеин имеет мол. массу 78 кДа. Он со­стоит из 70 % белков и 30 % углеводов и выделяется почками в виде Л^гликана (Fletcher [36]), в котором 7 из 8 участков гликозилированы (Van Rooijen и соавт.

Р11 ]). #Дна Hi форм этого гликопротеина, получившая название уромодулин, Щ^сутствует в моче беременных женщин и относится к ингибиторам пролифе­рации Т-лимфоцитов (Easton и соавт. [35]).

Аминокислотная последовательность протеина Тамма - Хорсфалла у лиц Sd(a+) и Sd(a-) оказалась идентичной (Morgan и соавт. [64], Soh и соавт. [98]). Протеин, обладающий Sd^a-cepoлoгичecкoй активностью, выделен посредством иммунопреципитации лектином Dolichosbiflorusи Helixpomatia, а также им-мунопреципитацией аллогенными aнти-Sd^a-aнтитeлaми (Morgan и соавт. [64], Serafini-Cessi, Conte [90]). У лиц Sd(a+) белок Тамма - Хорсфалла содержал до 2 % N-ацетилгалактозамина, у лиц Sd(a-) он отсутствовал.

Donald и соавт. [29, 31, 32] изучили углеводные остатки протеина Тамма -Хорсфалла, выделенного из мочи лиц Sd(a+) и Sd(a-). Они представлены те-тра- и пентасахаридами. Пентасахариды из мочи лиц Sd(a-) не обладали спец­ифической серологической активностью, тогда как пентасахариды из мочи Sd(a+) ингибировали аллогенные анти^^а-антитела и лектин Dolichosbiflo­rus. Исследователи пришли к выводу, что экспрессия антигена Sd^a обусловлена А'-ацетилгалактозаминовыми остатками. Их отщепление приводило к исчезнове­нию Sd^a-cepoлoгичecкoй активности (Cartron и соавт. [15], Donald и соавт. [33]).

Cartron и Blanchard [15] установили, что гликофорины А и В, присутству­ющие на эритроцитах Sd(a++), имеют более высокую мол. массу по срав­нению с гликофоринами эритроцитов Sd(a+) и Sd(a-). Это обусловлено до­полнительным ТУ-ацетилгалактозаминовым остатком, присоединенным к гликофоринам через Р-связь (Blanchard и соавт. [11]). Авторы полагают, что именно увеличение мол. массы за счет JV-ацетилгалактозамина обусловлива­ет способность пентасахаридов из эритроцитов Sd(a++) ингибировать лек­тин Dolichosbiflorus. Это свойство было также у гликофоринов А и В с из­мененной структурой на эритроцитах Sd(a++) (Blanchard и соавт. [10, 11, 14], Herkt и соавт. [46]). На эритроцитах Cad+ выявлена более высокая мол. масса фактора деградации комплемента (decay acceleration factor, CD55). Spring и соавт. [100] связывают это также с присутствием дополнительных ЛГ-ацетилгалактозаминовых групп. Кроме того, на эритроцитах Cad+ выяв­лен необычный ганглиозид, обладающий способностью ингибировать ак­тивность лектинов. По своей природе он является сиалопараглобозидом. Структура его терминального участка идентична структуре аналогичного участка Sd^a-aKTBHoro пентасахарида, входящего в состав протеина Тамма -Хорсфалла (Blanchard и соавт. [12], Gillard и соавт. [42]). Этот ганглиозид не найден на эритроцитах Sd(a-), в связи с чем Blanchard и соавт. [12] пришли к заключению, что указанный ганглиозид играет определяющую роль в экс­прессии антигена Sd^a.

Полагают, что ген Sd^aкодирует р1,4-Л^ацетилгалактозаминтрансферазу, ко­торая присоединяет соответствующие остатки к трисахаридной структуре-предрественнику. Фермент, проявляющий подобную активность, обнаружен в моче лиц Sd(a+). В моче лиц Sd(a-) этот фермент отсутствовал (Donald и соавт [31], Serafini-Cessi и соавт. [92]).

Ацетилгалактозаминтрансфераза обнаружена в почках (РШег и соавт. [79]) и толстой кишке человека (Malagolini и соавт. [59], РШег и соавт. [80]), почках морских свинок (Serafini-Cessi и соавт. [91], Soh и соавт. [97]). Препараты из по­чек человека ускоряли присоединение N-ацетилгалактозамина к сиалозилпа-раглобозиду. По отношению к нативному гликофорину А ацетилгалактозамин­трансфераза активности на проявляла, хотя указанный гликофорин считается хорошим акцептором подобных терминальных углеводных групп (Blanchard и соавт. [12], РШег и соавт. [79], Watkins [117]).

Субстрат, кодирующий Sd^a-тpaнcфepaзy, удалось получить из РНК слизистой оболочки желудка человека с помощью обратной ПЦР. При этом были исполь­зованы праймеры, имитирующие аминокислотную последовательность предпо­лагаемого гена мышиной р1,4-М-ацетилгалактозаминтрансферазы (Dohi и со­авт. [28]). Исследователи не исключают, что антиген Sd^a может получить статус самостоятельной групповой системы как только будет установлена хромосом­ная локализация гена, кодирующего Sd^a-тpaнcфepaзy.

Вещество Sd^a играет определенную роль в биологии человека. Cartron и соавт. [16] отметили, что эритроциты Sd(a++) членов семьи Cad обладали повышенной устойчивостью к инвазии малярийным паразитом Plasmodiumfalciparum. Для про­никновения плазмодия через мембрану эритроцитов требуется присутствие глико-форинов, содержащих доступные для связывания сиаловые кислоты. Однако участ­ки выхода сиаловых кислот, расположенные на 0-гликанах эритроцитов Cad+, экранированы дополнительными iV-ацетилгалактозаминовыми группами, поэтому недоступны для химических рецепторов плазмодия малярии (Cartron и соавт. [16]).

По данным Рак и соавт. [76], белок Тамма - Хорсфалла, несущий Sd^a-cneun^H4HOCTb, препятствует адгезии кишечной палочки Escherihiacoliк эпителию мочевыводящих путей и тем самым играет важную роль в защите ор­ганизма от урогенитальной инфекции из кишечного тракта. Этот белок специ­фически связывается с чувствительными ворсинками эшерихий, блокирует их и лишает эти бактерии способности прилипать к эпителию.

Duclos

Антиген Duclos описан Habibi и соавт. [44] в 1978 г. Антитела в сыворот­ке миссис Duclos реагировали со всеми образцами эритроцитов, за исключе­нием собственных и эритроцитов Rh_nullU- и Rh_modU-. Женщина имела фено­тип DCceeU^weak. Сначала антиген Duclos включили в систему Rh под номером Rh38. Позднее были получены aHTH-Duclos-подобные мышиные МКА (Von dem Borne и соавт. [116]), специфичность которых отличалась от специфичности анти-Duclos (LePermec и соавт. [51]). С помощью иммуноблоттинга с мышины-ми МКА было показано, что антигенные детерминанты Duclos расположены на Й^гсоциированном гликопротеине (RhAG) (Mallinson и соавт. [60]).