Опубликовано: 20 апреля 2014

Система Кх

Система Кх включает 1 антиген - Кх (ISBT 019001 или ХК1). Redman и соавт. [326] выделили протеин Кх посредством иммунопреципи­тации анти-Кх-антителами и определили его мол. массу, составляющую око­ло 37 кДа. Затем было установлено, что Кх-протеин фосфорилируется и паль-митилируется [120, 121], но не гликозилируется [198, 224]. Он представлен в мембране эритроцитов 10 трансмембранными доменами [198], состоящими из 444 аминокислот (рис. 5.5).

Предполагаемая топология Кх-протеина в мембране эритроцита пред­ставлена на рис. 5.1. Белок Кх связан дисульфидной связью через Cis 347 с Cis 72 гликопротеина Kell. Терминальные участки Кх-протеина, N и С, по­гружены в клетку.

По мнению Russo и соавт. [331], комплекс Кх - Kell формируется в эн-доплазматическом ретикулуме и транспортируется к клеточной поверхно­сти. Отсутствие вещества Кх в эритроцитах приводит к уменьшению экс­прессии Kell-антигенов на поверхности клеточной мембраны (фенотипу McLeod).

Система Кх кодируется Х-сцепленным геном, ХК, и является самостоятель­ной антигенной системой независимой от Kell, хотя и тесно с ней связанной.

Кх-протеин выражен на эритроцитах лиц с фенотипом К_о сильнее, чем на эритроцитах с обычным Kell-фенотипом [267]. Однако указанная особен­ность, как полагают Lee и соавт. [238], Carbonnet и соавт. [122], обусловле­на не столько количеством Кх-протеина на этих клетках, сколько тем, что в эритроцитах обычного Kell-фенотипа Кх-протеин связан с белком Kell, что мешает ему с той же силой участвовать в реакции агглютинации с сыворот­кой анти-Кх.

В противоположность антигенам Kell антиген Кх не денатурируется дити-отрейтолом (ДТТ) и 2-аминоэтилизотиоурониумбромидом (АЕТ), которые раз­рушают дисульфидные связи. Эритроциты, обработанные ДТТ и АЕТ, приобре­тают серологические свойства эритроцитов К_о с высокой степенью экспрессии Кх-антигена [102,111].

Анти-Кх

У пациента Klaas, имевшего фенотип McLeod (см. Антиген KL), развилась гемолитическая трансфузионная реакция, вызванная антителами анти-KL, ко­торые, как вскоре выяснилось, представляют собой смесь двух антител разной специфичности и могут быть отделены друг от друга с помощью адсорбции и последующей элюции (Van der Hart и соавт. [377], Marsh и соавт. [258, 267]). Антигены, выявляемые с помощью этих антител, получили обозначение Кх и Km, а соответствующие им антитела - анти-Кх и Km.

Анти-Кх-антитела, как установили Marsh и соавт. [267], сильно реагиру­ют с эритроцитами К_о, но не реагируют с эритроцитами McLeod

С эритроцитами обычного Kell-фенотипа они взаимодействуют слабо. Таким образом, антиген Кх присутствует на эритроцитах К_о, отсутствует на эритроци­тах McLeod, выражен, хотя и слабо, на эритроцитах лиц, имеющих нормальный Kell-фенотип.

Таблица 5.5

Выраженность антигенов Кх, Km и Kell на эритроцитах лиц с нормальным и Kell-дефицитными фенотипами

« + » - антиген слабо выражен;

« ++++ » - антиген сильно выражен;

« - » - антиген отсутствует.

Анти-Кт-антитела, как установили те же авторы [267], реагируют с эри­троцитами обычного Kell-фенотипа, но не реагируют с эритроцитами К и McLeod. Считается (Daniels [141]), что антиген Km формируется в том случае, если на поверхности эритроцита экспрессированы оба белка, Кх и Kell. Если один из них редуцирован, антиген Km отсутствует. Похожая ситуация имеет место в системе Rh-Hr (эффект г/иопозиции). Если гены с и Е наследуются в положении цис, помимо антигенов с и Е вырабатывается сопутствующий ан­тиген сЕ. Этот специфический антиген не является смесью антигенов с и Е. Сыворотки анти-сЕ не реагируют ни с антигеном с, ни с антигеном Е в эри­троцитах лиц СЕ/се и се/се, но реагируют с антигеном сЕ в эритроцитах лиц cE/ce_f где с и Е расположены на одной хромосоме. При наследовании указан­ных генов в положении транс антиген сЕ не вырабатывается.

Антителаити-1^|+ анти-Кт (анти-KL) вырабатываются у лиц с фенотипом McI||o& Анти-Кт-антитела могут вырабатываться также у гомозигот К°/К°, ко­торые не содержат антигена Km. Причиной появления антител являются транс­фузии эритроцитов [114, 177, 267, 377], однако известны антитела нетрансфузи-онного происхождения. Carstairs и соавт. [123] привели случай обнаружения та­ких антител у пациента, не получавшего трансфузий. Антитела у него вырабо­тались после перенесенного септического шока.

Антитела анти-Кх и анти-Km могут вырабатываться как вместе, так и по отдельности. White и соавт. [395] описали пациента с McLeod-синдромом, который выработал только анти-Кт-антитела. Кх-антитела в его сыворотке отсутствовали.

Аналогичный случай привели Sharp и соавт. [345]. У больного имелись анти-Кт-антитела, в связи с чем ему потребовался индивидуальный подбор крови. После пяти трансфузий эритроцитов К_о и K_mod, содержащих сильный Кх-антиген, антитела анти-Кх у больного, вопреки ожиданию, не выработались. Авторы отме­чают хороший терапевтический эффект трансфузий. Реакцией отсутствовали.

Russo и соавт. [332] нашли анти-Кх-антитела у пациента с McLeod-синдромом, которому в связи с анемией, развившейся вследствие желудочно-кишечного кро­вотечения, перелили 4 дозы эритроцитов.

Sullivan и соавт. [358] обнаружили анти-Кх-антитела у больного, имев­шего обычный Kell-фенотип. Антитела оказались клинически не значимыми и, по-видимому, имели аутоиммунную природу. Они не гемолизировали ни собственные эритроциты пациента, ни перелитые ему эритроциты, содержа­щие антиген Кх.

Возможная роль антител анти-Кх и анти-Km в развитии ГБН остается для исследователей невыясненной, поскольку эти антитела у женщин не встречают­ся, а содержатся только у мужчин.

Опубликовано: 20 апреля 2014

Опубликовано: 20 апреля 2014

Daniels и соавт. [150], Yazdanbakhsh и соавт. [404] полагают, что Кр^а-эффект проявляется только низкой синтезирующей способностью Хр^а-аллеля, в ре­зультате чего количество гликопротеинов Kell на эритроцитах снижено. Конформационные изменения в Kell-гликопротеине, которые могли бы препят­ствовать связыванию Kell-антигенов с антителами, не столь выражены.

Waheed, Kennedy [385] на модели экспрессии кДНК-конструктов в клет­ках эмбриональной почки человека нашли, что Кр^а (Тгр 281) замедляет про­движение Kell-гликопротеинов к поверхности клетки, удерживая их на уровне аппарата Гольджи. Для того чтобы обеспечить более эффективное продвиже­ние Kell-гликопротеинов к клеточной поверхности, возникли мутации: часто встречающаяся - Kp^b (Arg 281) и редко встречающаяся - Кр^с (Glu 281).

Daniels и соавт. [150] описали фенотип К_о, который на самом деле тако­вым не являлся. Несмотря на то что эритроциты этого человека не содер­жали Kell-антигенов, тем не менее они адсорбировали анти-к-антитела, ко­торые затем обнаруживали в элюате. Кроме того, на эритроцитах пробанда отсутствовал антиген Кх, наличие которого является характерным призна­ком К_о-фенотипа. Наконец, 3 детей пробанда были Кр(а+Ь+), и маловероят­но, что пробанд имел ген К°. Анализ экзона 8 показал, что пробанд был го­мозиготен по гену Кр". Авторы отметили также мутации в Ж-гене, что по­зволило в итоге диагностировать у пробанда фенотип McLeod. Как считают авторы, Kell-ингибирующий эффект, приведший к К_о-подобному фенотипу, был обусловлен двумя причинами: гомозиготностью по гену Кр^аи дефици­том Кх-протеина.

Необходимо отметить, что ^"-эффект проявляется только в отношении часто встречающихся Kell-антигенов. Редкие антигены Kell (имеющие ча­стоту менее 10 %): К, Js^a, Кр^а, Кр^с и др. - не подвержены ингибиции, по­скольку ген Кр^аи гены К, Js^a, Кр^а, Кр^с в одном гаплотипе, в положении цис, не встречаются (см. Ожидаемые, но не встречающиеся гаплотипы KEL).

Kikuchi и соавт. [225] привели данные, показывающие, что в отличие от гена Кр^а его редко встречающийся аллель Кр^с не влияет на гены KEL, с кото­рыми он находится в положении цис, как это имеет место при Кр^а-эффекте. Авторы не отметили подавления экспрессии антигенов k, Js^b и других часто встречающихся антигенов Kell и napa-Kell на эритроцитах лиц с фенотипом Кр(а-Ь-с+).

Опубликовано: 20 апреля 2014

К выводу о том, что локус KEL расположен на хромосоме 7, пришли Zelinski и соавт. [406], Parsons и соавт. [303]. Авторы обнаружили связь между генами KEL и геном пролактининдуцирующего протеина (PIP), который локализован на хромосоме 7 в позиции q32-q36.

Purohit и соавт. [315] нашли, что локус KEL связан с геном цистофиброза, ко­торый, так же как PIP, локализован на длинном плече хромосомы 7.

Последующие исследования, проведенные Murphy и соавт. [295], Lee и со­авт. [244] с помощью методов гибридизации in situ и метода клонирования Kell-специфической кДНК, подтвердили расположение генов KEL на участке 7q33-7q35.

Генный комплекс Kell включает 19 экзонов и занимает примерно 21,5 кб (Lee и соавт. [242]).

Экзон 1 содержит 5^!-нетранслируемую область, кодон метионина 1, иници­ирующий трансляцию, SP1- и GATA-1 -связывающие участки. Как полагают Camara-Clayette и соавт. [119], экзон 1 вовлечен в отрицательную регуляцию промотора в неэритроидных тканях.

Экзон 2 кодирует цитоплазматический домен и, возможно, второй иницииру­ющий трансляцию метионин 20.

Экзон 3 кодирует трансмембранную, наиболее короткую часть Kell-пожпептида, которая состоит примерно из 20 аминокислотных остатков (см. рис. 5.2).

Экзоны 4-19 ответственны за экстрацеллюлярный, самый протяженный до­мен. Аминокислотная последовательность, придающая Kell-протеину свойства цинкзависимой металлопротеиназы, кодируется экзоном 16, который, по дан­ным Lee и соавт. [242], на 54,5 % идентичен эквивалентному участку гена NEP, кодирующего вазоконстриктор неприлизин.

Lee и соавт. [242] нашли, что 5'-латеральная область от -176 до -1 нуклеоти-да содержит три участка, связывающих GATA-1. По мнению Shivdasani и Orkin

м. ZU4], GATA-1 является транскрипционным фактором, необходимым для формирования эритроидных тканей.

Мутации в участке связывания GATA-1 приводят к нарушению синтеза на эритроцитах гликопротеина Duffy; эти мутации наблюдают у большинства лю­дей с фенотипом Fy(a-b-). Неизвестно, определяют ли эти мутации отсутствие белка Kell на эритроцитах людей с фенотипом К_о.

Lee и соавт. [242] полагают, что локус KEL регулируется эритроидными фак­торами транскрипции. 

Организация гена KEL*