Фенотип Du (слабая форма антигена D)

Фенотип D^u описан Stratton в 1946 г. [631] как новый вариант антигена си­стемы резус, слабо реагирующий с сыворотками анти-D. Частота D^u у ев­ропеоидов около 0,1 %. Находку подтвердили многие авторы [202, 218, 266, 329, 339, 429, 561]. Вскоре выяснилось, что различия между антигеном D и D^u имеют количественный, а не качественный характер [548, 578, 635]. Эритроциты D^u адсорбировали анти-О-антитела в меньшей степени, чем обыч­ные эритроциты D+, однако снятый с них элюат не проявлял какой-либо особой анти-О^и-специфичности.

Эритроциты D^u не реагируют в реакции солевой агглютинации с полными IgM анти-О-антителами, но реагируют с неполными IgG анти-О-антителами в коллоидных тестах, непрямой антиглобулиновой пробе. В ферментных методах они реагируют слабее (Stratton [632]). В отдельных случаях, при очень слабой вы­раженности антигена D^u, его выявляют только непрямой антиглобулиновой про­бой. Третьим элементом, отличающим фенотип D^u от D, является присутствие в этих эритроцитах примерно в 98 % случаев сильновыраженного антигена С.

Первоначальное обозначение D^u, данное Stratton, в настоящее время за­менено общим понятием «слабый D-антиген», или «слабый D-фенотип». Современные моноклональные реагенты анти-D агглютинируют большинство образцов крови, которые раньше при использовании поликлональных сыворо­ток были бы отнесены к слабому D-типу.

Эксперименты с поли- и моноклональными анти-О-антителами показали, что эритроциты D+ лиц CDe/cde и cDE/cDE несут соответственно около 10 тыс. и 30 тыс. участков антигена D на 1 эритроцит [364, 568]. На эритроцитах лиц Cde/cD^ue со слабым D-антигеном число антигенных участков снижено до 300 [648].

Beckers и соавт. [159] исследовали 6 человек со слабым D-антигеном и уста­новили, что число участков антигена D у них составило от 500 до 1000 на одну клетку; 4 обследованных имели фенотип D+C+c+E-e+, 2 - D+C-c+E+e+, т. е. не содержали антигена С. Все 6 человек имели ген RHD, который был абсолют­ен нормальным при исследовании в Саузерн-блоте и ПЦР. Авторы не приш­ли к какому-либо определенному выводу относительно механизма низкой (антигена D на эритроцитах исследованных людей. ВозможнЛэто связано с неэффективной транскрипцией или трансляцией участков нормально­го гена или другими механизмами, обусловливающими подавление продукции антигена.

По данным разных авторов, в среднем число антигенных участков на эритро­цитах со слабым D, снижено до 5-10 % от нормального уровня [157,187,648]. рНВ литературе обсуждаются 3 возможных механизма появления слабого фено­типа D.

Первый механизм обусловлен позицией транс генов С и D. В 1952 г. появи­лось сообщение Ceppellini и соавт. [204] о том, что у некоторых людей гаплотип Cde снижает продуктивность гена Д расположенного на другой хромосоме, т. е. находящегося по отношению к гену С в позиции транс. Слабый D-фенотип ча­сто обнаруживают у лиц с генотипом CDe/Cde и cDe/Cde [218, 329, 339,429].

Феномен ингибиции гена Д расположенного на одной хромосоме, генным комплексом Cde гомологичной хромосомы подтвержден другими авторами.

Гаплотип CdE в положении транс, как считают McGee и соавт. [470], так же как и гаплотип Cde, вызывает уменьшение продукции D-антигена.

То, что слабый D-антиген формируется в результате супрессирующего вли­яния гена С, стало ясно из семейных исследований. Ген D родителей, имевших слабый D-фенотип, кодировал у детей продукцию нормального D-антигена, ког­да передавался им по наследству с геном С в позиции цис. Наследование гена С в позиции транс сочеталось со слабым D-фенотипом.

Еще одно подтверждение высказанного положения: известно, что эритроциты лиц cDE/cDE, лишенные гена С, несут от 16 000 до 33 000 участков антигена D на одну клетку, а лица CDe/CDe - меньшее число антигенных участков - от 14 000 до 19 000.

Таким образом, существование слабого D-фенотипа у лиц, имеющих нор­мальный ген RHD, объясняется тем, что на экспрессию антигена D влияет ген С другого гаплотипа RH. Однако это правило не является абсолютным. Некоторые лица Cde/cDe имели слабый D-антиген, а на эритроцитах других людей с таким же генотипом D-антиген был выражен нормально [218, 612].

Второй механизм появления слабого D, серологически неотличимого от формы D^u, обусловлен отсутствием на полипептиде Rh некоторых эпитопов D. Необходимо отметить, что отсутствие одного или даже нескольких эпитопов не всегда проявляет себя как слабый D-фенотип. Большая часть эритроцитов с пар­циальными D-антигенами реагирует с анти-О-сыворотками так же активно, как если бы на веществе Rh присутствовали все эпитопы D [660, 661].

Третий механизм формирования слабого D связан с функцией редкого, с ча­стотой менее 0,1 %, аллеля RHD, который кодирует продукцию всех эпитопов D, но в меньшем количестве, чем обычно должно быть представлено на эритроцитах 'ШШ Такой тип слабого D хорошо прослеживается при семейных исследованиях,

дается от родителей детям [394,631,635]. При данном типе слабо­го D ген D не зависит от влияния гена С в положении транс или цис.

Молекулярно-биологические исследования лиц со слабым D-фенотипом по­зволили установить типичную для JWD-гена последовательность матричной

РНК с нормальной промоторной областью. Однако сравнительные исследо­вания с помощью ПЦР показали, что количество 1)-специфического транс­крипта у лиц со слабым D уменьшено. Низкая экспрессия D-антигена при сла­бом фенотипе D обусловлена, как полагают Beckers и соавт. [157] и Rouillac и соавт. [582], не мутациями в кодирующей последовательности RHD-гет, а уменьшением активности матричной РНК.

Другие исследователи (Wagner и соавт. [692]) отметили, что все образцы ге­номной ДНК, полученные от 16 лиц со слабым фенотипом D, высокогетероген-ны. Некоторые экзоны (4 и 5) в результате генной конверсии частично были за­мещены соответствующими последовательностями, характерными для RHCE-гена. Аминокислотные замены наблюдались в трансмембранном и внутри­клеточном сегментах протеина, но они не затрагивали экзофациалыгую часть, определяющую антигенную специфичность (табл. 4.11).

Считается, что при фенотипе D^u имеется селективная депрессия участ­ков гена D. При этом ген Сс/Ее не затронут. Указанная выборочная депрессия не связана с каким-либо повреждением структуры гена D и его промоторной последовательности в области от -600 до +41. Как показали Rouillac и соавт. [582], транскрипты генов D и D^u имели нормальную аминокислотную после­довательность, однако уровень D-экспрессии транскриптов у доноров D^u был в 4-5 раз ниже, чем в образцах с обычным фенотипом D. Экспрессия транскрип­тов СБ-гена была одинакова для лиц D^u и D+.

Не поврежденные по сравнению с нормой гены D и СЕ обнаружены у неко­торых лиц с фенотипом и Rh_null [214,233], что указывает на существование неизвестного пока регуляторного механизма помимо /?#-генного кодирования, который может влиять на экспрессию антигенов.

Вскоре после открытия D^u появились сообщения, что эритроциты со слабым D после трансфузии реципиенту D- могут вызвать у него продукцию анти-D-антител (Rosenfield и соавт. [578]), а реципиенты со слабым D-антигеном после переливания им резус-положительной крови с нормально выраженным антиге­ном D могут вырабатывать резус-антитела (Argall и соавт. [139]).

Ruffie и Carriere [588] получили анти-О-антитела в результате искусственной иммунизации добровольцев эритроцитами D^u.

В связи с подобными, однако не столь многочисленными наблюдениями, свиде­тельствующими об иммуногенности D^u, людей со слабым D-антигеном принято от­носить к D- если они являются реципиентами. Если люди со слабо выраженным D-антигеном (D^u) являются донорами, их причисляют к резус-положительным и их эритроциты переливают только резус-положительным больным.

Длительное время оставалось непонятным, почему в сыворотке крови лиц со слабым D-антигеном, имеющим количественное, но не качественное отличие от обычного D-антигена, могут присутствовать антитела анти-D.

Pietrusky [526] высказал предположение, что антиген D неоднороден и состо­ит из многочисленных парциальных вариантов: D_p D₂, D₃ и т. д. Полный набор парциальных вариантов соответствует полноценному D-антигену. Отсутствие какого-либо парциального фактора или одновременно нескольких факторов приводит к появлению ослабленных форм.

Лица, лишенные определенных парциальных антигенов, могут вырабаты­вать по отношению к ним антитела. В свою очередь сыворотки анти-D, по мне­нию Pietrusky, также могут содержать по отдельности или в разных комбинаци­ях антитела анти-D , анти-0₂, анти-0₃ и т. д. В связи с этим эритроциты со сла­бым D по-разному реагируют с набором сывороток анти-D. Некоторые образцы эритроцитов D^u агглютинируются одними и слабо или вовсе не агглютинируют­ся другими сыворотками, показывая большое разнообразие форм.

Серологические свойства эритроцитов D^u подробно изучены Т.М. Пискуновой [85, 86], обнаружевшей, что агглютинабельность эритроцитов D^u у разных лиц но­сителей этого фенотипа неодинакова. Она варьирует от очень слабой, выявляемой в антиглобулиновой пробе, до средней степени выраженности. В последнем случае антиген D может быть выявлен с помощью желатинового и других методов с при­менением коллоидов, а также в реакции агглютинации в солевой среде.

[Эритроциты со слабым D характеризуются низкой авидностью антигена и сниженной адсорбцией как полных, так и неполных анти-Б-антител. О низкой авидности антигена D^u можно судить по более легкой элюции антител анти-D с эритроцитов этого типа. В элюатах обычно присутствуют анти-О-антитела, идентичные тем, которые имелись в сыворотках, взятых для адсорбции. Элюаты с эритроцитов D^u и D по специфичности не отличаются. Последнее обстоятель­ство указывает на то, что антигены D^u и D качественно однородны. Какие-либо специфические анти-О^и-антитела не найдены.

Сегодня имеются все основания полагать, что лица, чей фенотип D^u обу­словлен генной ингибицией полипептида D (позиция транс гена RHC), а также лица, чей фенотип D^u обусловлен аллельным геном D", не могут вырабатывать анти-О-антитела, поскольку содержат все эпитопы D-антигена, хотя и в осла­бленной форме. Антитела анти-D (парциальные) могут вырабатывать лишь те люди, чей фенотип слабого, а также нормально выраженного D обусловлен от­сутствием нескольких важных для экспрессии антигена D эпитопов. Подобные варианты антигена правильнее относить к группе парциальных D-антигенов, а не к категории слабых D-фенотипов (собственно D^u). Такое разграничение принципиально важно для оценки значения этих двух групп антигенов в транс-фузиологии, поскольку специфические антитела к парциальным антигенам D являются реальностью, а антитела к антигену D^u до сих пор не найдены.

В настоящее время признано (Mollison и соавт. [476]), что продукция анти-D-антител лицами со слабым D-антигеном, получившими переливание крови D+, от­носительно редкое явление. Подавляющее большинство людей D+ не могут образо­вывать аллоиммунных анти-Б-антител. Такой же редкой является пгюдукция резус-антител лицами cde/cde после переливания им эритроцитов со слабым фенотипом D. о сводке Schmidt, Morrison и Shohl (цит. по Issitt и Anstee [374]), 45 ре­ципиентам D- было перелито 68 доз крови со слабым D и ни у одного из них не выработались анти-О-антитела. Крайне редко слабый D-антиген становил­ся причиной гемолитической болезни новорожденных. Тем не менее, боль­шинство специалистов-трансфузиологов разделяют мнение о том, что лиц D^u следует рассматривать как резус-положительных доноров, но как резус-отрицательных реципиентов.

Относительно применения у родильниц с фенотипом D^u иммуноглобулина анти-D с профилактической целью мнения расходятся. Одни авторы [394] пола­гают, что его назначать не следует в связи с редкостью такой сенсибилизации, а также с тем, что введенный препарат скорее всего адсорбируется на эритро­цитах женщины и не выполнит ожидаемой защитной функции. Другие высказывают опасение, что при рутинном определении резус-фактора в родильном Тв родильницы D^u будут фенотипированы как Rh- и им будет введен этот препарат понятно, что решение о введении анти-Б-иммуноглобулина родиль­ницам с фенотипом D^u требует индивидуального подхода и тщательного имму-носерологического обследования женщины в каждом конкретном случае.

Добавить комментарий