Напишите нам

Поиск по сайту

Наш блог

Как я заболел во время локдауна?

Это странная ситуация: вы соблюдали все меры предосторожности COVID-19 (вы почти все время дома), но, тем не менее, вы каким-то образом простудились. Вы можете задаться...

5 причин обратить внимание на средиземноморскую диету

Как диетолог, я вижу, что многие причудливые диеты приходят в нашу жизнь и быстро исчезают из нее. Многие из них это скорее наказание, чем способ питаться правильно и влиять на...

7 Фактов об овсе, которые могут вас удивить

Овес-это натуральное цельное зерно, богатое своего рода растворимой клетчаткой, которая может помочь вывести “плохой” низкий уровень холестерина ЛПНП из вашего организма....

В какое время дня лучше всего принимать витамины?

Если вы принимаете витаминные и минеральные добавки в надежде укрепить свое здоровье, вы можете задаться вопросом: “Есть ли лучшее время дня для приема витаминов?”

Ключ к счастливому партнерству

Ты хочешь жить долго и счастливо. Возможно, ты мечтал об этом с детства. Хотя никакие реальные отношения не могут сравниться со сказочными фильмами, многие люди наслаждаются...

Как получить сильные, подтянутые ноги без приседаний и выпадов

Приседания и выпады-типичные упражнения для укрепления мышц нижней части тела. Хотя они чрезвычайно распространены, они не могут быть безопасным вариантом для всех. Некоторые...

Создана программа предсказывающая смерть человека с точностью 90%Смерть научились предсказывать

Ученые из Стэнфордского университета разработали программу предсказывающую смерть человека с высокой точностью.

Зарплата врачей в 2018 году превысит средний доход россиян в два разаЗП докторов

Глава Минздрава РФ Вероника Скворцова опровергла сообщение о падении доходов медицинских работников в ближайшие годы. Она заявила об этом на встрече с журналистами ведущих...

Местная анестезия развивает кардиотоксичностьАнестетики вызывают остановку сердца

Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения озвучила тревожную статистику. Она касаются увеличения риска острой кардиотоксичности и роста сопутствующих осложнений от...

Закон о праве родителей находиться с детьми в реанимации внесен в ГосдумуРебенок в палате

Соответствующий законопроект внесен в палату на рассмотрение. Суть его заключается в нахождении одного из родителей в больничной палате бесплатно, в течении всего срока лечения...


Ген AQP3, контролирующий синтез акваглицеропорина-3, носителя антигена GIL, представлен 6 экзонами

Строение гена AQP3

Строение гена AQP3

Кодируемый гликопротеин состоит из 342 аминокислот (рис. 29.2), содержит один Л^гликан и 6 цистеиновых остатков. Он пересекает мембрану эритроцита 6 раз (рис. 29.3), имеет мол. массу 46 кДа. На одном эритроците насчитывается около 26 тыс. антигенных участков GIL.

MGRQKELVSR

CGEMLHIRYR

LIRQALAECL

GTLILVMFGC

GSVAQVVLSR

50

GTHGGFLTTIN

LAFGFAVTLG

ILIAGQVSGA

HLNPAVTFAM

СFLAREPWIK

100

LPIYTLAQTL

GAFLGAGIVF

GLYYDAIWHF

ADNQLFVSGP

NGTAGIFATY

150

PSGHLDMING

FFDQFIGTAS

LIVCVLAIVD

PYNNPVPRGL

EAFTVGLVVL

200

VIGTSMGFNS

GYAVNPARDF

GPRLFTALAG

WGSAVFTTGQ

HWWWVPIVSP

250

LIGSIAGVFV

YQLMIGCHLE

QPPPSNEEEN

WKLAHVKHKE

QIMGRQKELV

300

SRCGEMLHIR

YRLLRQALAE

CLGTLILVMF

GCGSVAQVVL

SR

342

Рис. 29.2. Аминокислотная последовательность гликопротеина AQP3.

Молекулярной основой нулевого фенотипа системы GIL является гомозигот-ность по мутации в участке g>a интрона 5 гена AQP3. Она приводит к смеще-даю рамки считывания и остановке трансляции

Физиологические функции

Функции акваглицеропорина-3 в организме точно не установлены. Этот бе­лок представлен на мембране эритроцитов димерами, тримерами и тетрамера-ми. Помимо эритроцитов, он содержится в эпителии почек, желудка, тонкого и толстого кишечника, селезенки, верхних дыхательных путей, кожи, глаз. На тромбоцитах он не выявлен.

Есть основания полагать, что акваглицеропорин-3 участвует в транспорте небольших по размеру молекул глицерина и мочевины. Эритроциты лиц GIL-обладали пониженным сродством к глицерину.

 

Система GIL

О выявлении aHTH-GIL-антител, открывающих одноименный часто встреча­ющийся антиген, сообщили Frederick и соавт. [2] в 1981 г. Антиген традиционно получил обозначение по имени женщины, у которой впервые были обнаружены упомянутые антитела. Позднее были выявлены еще 4 женщины GIL-, имевшие анти-01Ь-антител (Daniels и соавт. [1]).

К настоящему времени система представлена одним антигеном GIL и двумя фенотипами: GIL+ и GIL-.

В 2002 г. Rodier и соавт. [4] установили локализацию детерминант GIL, кото­рые расположены на акваглицеропорине-3 (AQP3).

Синтез вещества GIL контролируется геном AQP3, который картирован на хромосоме 9 в позиции 9р13 и не зависит от других групповых антигенных си­стем эритроцитов.

Серология

Daniels и соавт. [1] провели детальное серологическое обследование 5 жен­щин GIL-, европеек, имевших aHTH-GIL-антитела.

Наблюдение 1. Миссис Gil, американка, группа крови А(П), гемотрансфузий не было. Эритроциты ее первого ребенка давали слабоположительную реакцию в прямой антиглобулиновой пробе. Каких-либо проявлений ГБН не наблюдалось. У второго ребенка прямая проба Кумбса при рождении была отрицательной, однако его эритроциты реагировали invitroс сывороткой крови матери. Три сибса мис­сис Gil имели фенотип GIL+, родители не были кровными родственниками.

Наблюдение 2. Миссис Boi, француженка, группа крови 0(1). После пере­ливания крови во время хирургического вмешательства у нее развилась гемо­литическая трансфузионная реакция, обусловленная, как позже выяснилось, aHTH-GIL-антителами. Интересно отметить, что эритроциты женщины реаги­ровали в прямой антиглобулиновой пробе. Через 3 мес. после трансфузион-ной реакции титр aHTH-GIL-антител снизился с 1 : 1024 до 1 : 2. Эритроциты 2 сибсов женщины и 6 детей реагировали с сывороткой ее крови. Ни у одно­го из детей признаков ГБН не отмечалось. Эритроциты миссис Boi не реаги­ровали с сывороткой Gil в антиглобулиновой пробе. Отсутствие на них анти­гена GIL подтверждалось отрицательными результатами адсорбции - элюции. Вместе с тем активность сыворотки миссис Boi полностью устранялась путем адсорбции аллогенными эритроцитами GIL+.

Реализации анти-А-антител группоспецифической субстанцией А не реа­гировала с эритроцитами Gil+.

Эритроциты миссис Boi, исследованные 13 годами позже, давали слабополо­жительную реакцию с сывороткой Gil, а также с элюатом сыворотки Hun.

Наблюдение 3. Миссис Hun, немка, группа крови 0(1). После родов в сы­воротке ее крови обнаружены антитела с высокой частотой реагирования. Эритроциты новорожденного давали сильную (3+) реакцию в прямой ан-тиглобулиновой пробе, однако симптомов гемолитического заболевания у ребенка не было. Девять лет спустя антитела в сыворотке миссис Hun по-прежнему выявлялись. В очередной раз их выявили в другой лаборатории после рождения еще одного здорового ребенка. Эритроциты миссис Hun не реагировали с сывороткой Gil, а эритроциты Gil не реагировали с сыворот­кой миссис Hun.

Наблюдение 4. Миссис Gou A(II), в анамнезе четыре беременности, гемо-трансфузий не было. Ее сыворотка давала слабоположительную реакцию с эри­троцитами миссис Hun, но не реагировала с эритроцитами миссис Gil.

Наблюдение 5. Миссис Mil, американка, 78 лет, в анамнезе одна беремен­ность. За 5 недель до обнаружения антител ей перелили две дозы эритроци­тов. Антитела до трансфузий отсутствовали. Эритроциты миссис Mil не реаги­ровали с aHTH-Gil-антителами. Элюаты, полученные с эритроцитов GIL+ после контакта с сывороткой миссис Mil, не реагировали с эритроцитами миссис Gil и эритроцитами миссис Gou. Адсорбция сыворотки миссис Mil эритроцитами GIL- не влияла на ее активность.

Перекрестная адсорбция указанных пяти сывороток эритроцитами GIL+, специально отобранными для этой цели, показала, что в четырех из них при­сутствовали aHTH-GIL-антитела, пятая сыворотка (Mil) содержала анти-GIL-антитела и сопутствующие им анти-Pj -антитела.

Детальное изучение двух образцов aHTH-GIL-антител позволило установить принадлежность их к субклассам IgG. Так, антитела сыворотки миссис Gil от­носились к субклассу IgGl, антитела сыворотки миссис Hun были представле­ны смесью IgGl и IgG2.

Антитела сыворотки миссис Boi (женщины, перенесшей гемолитическую постгрансфузионную реакцию) обладали способностью связывать комплемент. Другие aHTH-GIL-антитела комплемент не связывали. Ни один из образцов ан­тител не обладал агглютинирующей способностью по отношению к эритро­цитам GIL+. Все образцы антител обладали сенсибилизирующими эритроци­ты свойствами и их можно было выявить только в непрямой антиглобулиновой пробе. Реакция усиливалась при энзимировании эритроцитов.

Антиген GIL устойчив к действию папаина, фицина, трипсина, химотрип-сина. протеазы и сульфгидрильных реагентов (Reid и Lomas-Francis [3]). Активность антител не ингибировалась плазмой и сывороткой крови, слюной, молозивом, мочой, а также группоспецифическими субстанциями Lewis.

Исследование сывороток миссис Gil и миссис Hun в реакции с монослоем моноцитов показало, что aHTH-GIL-антитела, содержащиеся в них, потенциаль­но способны вызвать разрушение эритроцитов GIL+ invivo.

Среди обследованных доноров (23 449 европеоидов, 2 841 негроид и 101 монголоид) индивиды, имеющие фенотип GIL-, не выявлены.

Посемейные исследования из-за ограниченности данных не позволили пока­зать передачу молчащего гена GIL- по наследству, в связи с чем антиген GIL не был включен в номенклатуру ISBT. Статус системы он обрел в 2002 г., после того как была установлена его локализация и идентифицирован соответствующий ген.

Daniels и соавт. [1] полагают, что, хотя отдельные образцы aHTH-GIL-антител в эксперименте проявляют себя как потенциально клинически значимые, пря­мых доказательств этого нет. Единственный случай гемолитической трансфу-зионной реакции у миссис Boi, по их мнению, недостаточно документирован и не убеждает в том, что посттрансфузионную реакцию обусловили именно aHTH-GIL-антитела.

К коллекции 208 отнесены три антигена: 2 часто встречающихся (Ега и ЕгЗ) I), встречающийся крайне редко (табл. 28.1). Известен нулевой фенотип-ir(a b ). Антигены Ега и Егь - антитетичны. Коллекция Ег не получила статус групповой антигенной системы, поскольку не установлена хромосомная лока­лизация генов ER.

Таблица 28.1 Антигены Ег

 

Обозначение

Частота, %

традиционное

ISBT

Ега

ER1

208001

>99,9

Егь

ER2

208002

<0,01

ЕгЗ

ЕЮ

208003

>99,9

Серология антигенов Ег

Антиген Ег3 описали Daniels и соавт. [2] в 1982 г., обнаружив у одного из паци­ентов не идентифицированные ранее антитела. Антитела такой же специфичности находили и другие исследователи. В соответствии с их обозначениями антиген Ега именовался как Rosebush, Ros, Min и Rod (Reid, Lomas-Francis [9). Сравнение анти­тел показало, что они реагируют с одним и тем же антигеном - Ег3.

В 1988 г. Hamilton и соавт. [5] нашли у женщины, имевшей пять беременно­стей, антитела с очень низкой частотой реагирования. Они взаимодействовали с пятью из шести образцов эритроцитов Ег(а-). Открываемый ими антиген полу­чил обозначение Егь.

Интересна семья Rod., в которой были обнаружены анти-Егь-антитела. В двух поколениях этой семьи были лица Ег(а+Ь+), Ег(а-Ь+) и Ег(а-Ь-), и это позволи­ло Hamilton и соавт. показать, что гены Егаи Егьнаследуются кодоминантно, а редкий нулевой фенотип является следствием гомозиготности по молчащему ал-лелю ER, также передаваемому по наследству в соответствии с законом Менделя.

Следует упомянуть еще одну работу, дополняющую серологическую характе­ристику коллекции 208. Arriaga и соавт. [1] обнаружили индивида Ег(а-Ь-), сыво-рота® крови которого реагировала с эритроцитами как Ег(а-Ь+), так и Ег(а+Ь-). Алргела не удавалось разделить путем дифференциальной адсорбции, в связи с чем они были первоначально обозначены как анти-ЕгаЬ (далее анти-ЕгЗ), а анти­ген, открываемый ими, - ЕгЗ. Родители указанного выше носителя редкого фено­типа и антител являлись кровными родственниками. Других лиц, имеющих нуле­вой фенотип Ег:-1,-2,-3, среди европеоидов не найдено.

Необычный фенотип Ег(а-) в японской семье описали Naoki и соавт. [8]. Эритроциты трех сестер Ег(а-) агглютинировались тремя из восьми сывороток анти-Ег8, найденных в Европе. Одна из сестер имела анти-Ега-антитела, что ука­зывает на существование либо двух вариантов антигена Ега, либо еще одного, четвертого, антигена этой коллекции, отличающегося от Ега. Известны и дру­гие образцы сывороток анти-Ега, которые реагировали с эритроцитами Ег(а-). Результаты перекрестных реакций при сравнении этих сывороток в разных ла­бораториях не всегда совпадали, однако во всех случаях свидетельствовали о гетерогенности вещества Ег и анти-Ег-антител.

Лиц, имеющих фенотип Ег(а-), крайне мало. Daniels и соавт. [2], Gale и со­авт. [4] и Thompson и соавт. [11] не нашли ни одного Ег(а-) из 63 762 обследо­ванных европейцев. Naoki и соавт. [8] обследовали 13 521 японца и также не нашли ни одного Ег(а-), за исключением упомянутой выше уникальной наход­ки. Среди 605 обследованных доноров 4 имели фенотип Ег(Ь+).

По расчетным данным, генная частота аллеля Егасоставляет 0,9967, аллеля Егь - 0,0033. Частота фенотипа Ег(а-) у европеоидов соответствует 1 на 100 тыс.

Популяционные, в том числе посемейные, исследования показали, что ан­тигены Ег не связаны с группами крови ABO, MN, P, Duffy, Kidd и Dombrock (Daniels и соавт. [2], Hamilton и соавт. [5], Naoki и соавт. [8]).

Антиген Ега полностью развит к моменту рождения, устойчив к действию трипсина, химотрипсина, папаина, фицина, проназы и сульфгидрильных реа­гентов (Daniels и соавт. [2, 3], Liew, Uchikawa [6]). Экспозиция эритроцитов в ЭДТА с глициновым буфером приводила к утрате эритроцитами антигена Ега. Полное исчезновение Ега наблюдалось при рН 2,0; при рН 2,5 утрата носила ча­стичный характер (Liew, Uchikawa [6]).

Антиген Erb также оказался устойчивым к действию протеаз и сульфги­дрильных реагентов (Hamilton и соавт. [5]).

Анти-Ег-антитела

В анамнезе всех без исключения носителей анти-Ега-антител были гемо-трансфузии или беременности (Daniels и соавт. [2], Lylloff и соавт. [7], Naoki и соавт. [8], Rowe [10], Thompson и соавт. [11]). Антитела относились к клас­су IgG, способностью связывать комплемент не обладали (Daniels и соавт. [2], Naoki и соавт. [8], Thompson и соавт. [11]). У 2 реципиентов, имевших анти-| после переливания им эритроцитов Ег(а+) наблюдали положи­тельную прямую антиглобулиновую пробу, однако признаков гемолиза invivoне ИИН1 (Daniels и соавт. [2], Thompson и соавт. [11]). Эксперименты с моно-ИД моноцитов показали, что указанные антитела не относятся к клинически значимым. У 2 новорожденных, матери которых имели анти-Ега-антитела, была положительная прямая проба Кумбса, однако симптомов гемолитической болезни не наблюдали.

К сожалению, образец анти-Егь-антител, полученный Hamilton и соавт. [5$, остается единственным. Исследователи констатируют, что осталось небольшое количество указанной сыворотки лишь для крайне необходимого сопоставления и она в настоящее время практически недоступна.

Для более полной оценки степени значимости и места Холодовых антител в по­вседневной практике приведем высказывания современных классиков иммуносе-рологии P. Issitt и D. Anstee: «.. .Хотя только примерно один из 10 000 взрослых лю­дей имеет фенотип i, сыворотки всех людей содержат антитела анти-1. Часто необ­ходима постановка реакции при 4 °С, чтобы выявить аутоанти-1-антитела, если об­разцы крови не были охлаждены до отделения сыворотки, иначе может показать­ся, что антитела анти-1 в исследуемом образце отсутствуют. Это связано с тем, что слабые аутоанти-1-антитела могут быть полностью адсорбированы собственными эритроцитами I+. Иногда аутоанти-1-антитела могут быть выявлены в тестах, вы­полненных при комнатной температуре. Хотя такие антитела могут создать пробле­мы при выполнении пробы на совместимость, существует естественный выход из положения. Скрининг антител и пробы на совместимость при комнатной тем­пературе не являются необходимыми, нет проблемы в том, что клинически незна­чимые холодовые антитела присутствуют у пациента и могут быть не выявлены. Редко клинически незначимые формы аутоанти-1-антител могут искажать результа­ты тестов, выполненных при температуре выше комнатной. Если у больного нет признаков болезни Холодовых агглютининов, т. е. антитела доброкачественные (не агрессивны invivo), то основания для беспокойства отсутствуют. Антитела этого типа могут быть удалены из сыворотки пациента с помощью аутоадсорбции. Более эффективной, чем обычные методы, может быть аутоадсорбция с использованием эритроцитов больного, предварительно обработанных филином, папаином или бро-мелином. Те варианты аутоанти-1-антител, которые вызывают болезнь Холодовых агглютининов, иногда очень трудно удалить из сыворотки путем аутоадсорбции.

По-видимому, клинически незначимые (доброкачественные) холодовые агглюти­нины, включая анти-1, продуцируются в наибольших количествах в возрасте от 11 до 25 лет, затем уровень их продукции снижается. Существует определенная корреляция между уровнем IgM и количеством Холодовых агглютининов у здоровых людей, но намного сильнее она выражена при наличии патологических Холодовых аутоантител.

Когда у взрослого человека с фенотипом i в сыворотке есть антитела анти-1, для трансфузии традиционно намереваются использовать кровь доноров с фе­нотипом i. Однако всегда ли обязательна такая процедура. В то время как было показано, что один из образцов анти-1 от человека с фенотипом i по своей при­роде относился к классу IgM и мог фиксировать комплемент при 37 °С, иссле­дования на приживление эритроцитов invivoне проводились. В другом случае, когда у взрослого больного с фенотипом i в сыворотке имелись анти-1-антитела, введенные эритроциты 1+ случайно выбранного донора были быстро элимини­рованы из кровотока (99 % эритроцитов элиминировано в течение 30 мин при первом исследовании, 92 % эритроцитов элиминировано за 90 мин при повтор­ном исследовании через 10 мес. с использованием тех же донорских эритроци­тов I+). Однако эритроциты дочери больного (фенотип 1+) сохранялись в кро­ви больного в течение времени, близкого к нормальному. Не вполне ясно, яв­ляется ли этот случай исключением или правилом? Авторы этого наблюдения расценили обнаруженное явление быстрого удаления эритроцитов 1+ как «на­столько неожиданное», что стали искать объяснение в разрушении эритроци­тов антителами анти-1, но признаков разрушения не нашли. В других случаях наблюдалось несколько человек с фенотипом i, у которых анти-1-антитела при­сутствовали и не отличались по температурному оптимуму и титру от образ­цов анти-1-антител, полученных от лиц I+. Таким образом, имеющиеся в насто­ящее время данные позволяют полагать, что взрослые с фенотипом i и наличи­ем анти-1-антител в сыворотке не всегда нуждаются в переливании эритроци­тов i, но это положение не может быть принято безоговорочно. Серологические эдактеристики анти-1-антител, особенно температурные границы активности, должны быть оценены в каждом конкретном случае.

Возможна ситуация, когда у человека с эритроцитами 1+ и наличием доброка­чественных аутоанти-1-антител в сыворотке может наблюдаться серологическая картина, создающая видимость фенотипа «взрослый i». Если в сыворотке паци­ента есть неполные формы анти-1-антител, то его эритроциты могут быть блоки­рованы ими и выглядеть как I-отрицательные. Если предполагается такая ситуа­ция, эритроциты больного должны быть заготовлены и сохраняться до исследо­вания при 37 °С, после чего их следует трехкратно отмыть физиологическим рас­твором, нагретым до 37-40 °С. После этого они могут быть исследованы в реак­ции с анти-1-антителами. Цель указанного методического приема заключается в том, чтобы предотвратить фиксацию сывороточных неполных анти-1-антител на эритроцитах и блокаду участков 1-антигена.

Кроме случаев болезни Холодовых агглютининов, некоторых вторичных Холо­довых гемолитических анемий, обусловленных аутоантителами, и других эпизо­дов гемолиза, антитела анти-1 и анти-i не могут считаться причиной деструкции эритроцитов в организме. Даже у пациентов, подвергшихся гипотермии при хи­рургических процедурах, доказательств вызванной антителами анти-1 или анти-i деструкции эритроцитов не получено».

Связь с заболеваниями

Эритроциты больных с нарушениями эритропоэза часто имеют повышенную экс­прессию антигена i (Т.Н. Горская и соавт. [1, 2], Pruzanski и Delmage [121], Giblett и соавт. [58], Crookston [22], Reid и Bird [128], Navenot и соавт. [106]). Это наблюдает* ся при талассемии, серповидно-клеточной анемии, дизэритропоэтической анемии П типа (HEMPAS), синдроме Даймонда - Блекфена (В12-дефицитная анемия), ми-елобластном и сидеробластическом эритропоэзе, рефрактерных анемиях, холодо-вой пароксизмальной гемоглобинурии и острых лейкозах. Эритроциты с повышен­ной экспрессией антигена i обнаруживали в периферической крови лиц, подвергну­тых повторным флеботомиям. Экспрессия антигена I у них при этом не изменялась (Hillman, Giblett [69], Crookston [22]). В тех случаях, когда в процессе эритропоэза об­разуется недостаточное количество эритроцитов, пролиферативный стресс приво­дит к ускоренному созреванию эритроидных предшественников до того, как они мо­гут появиться в периферической крови. Количество клеток с повышенной экспресси­ей антигена i в периферической крови может быть подсчитано (Giblett и соавт. [58], Crookston [22], Hillman, Giblett [69]). При пароксизмальной холодовой гемоглобину­рии усиление экспрессии антигена i было выявлено как на измененных (CD59~), так и на нормальных (CD59+) эритроцитах. Navenot и соавт. [106] рассматривают усиле­ние экспрессии антигена i как симптом гематопоэтического стресса.

При хроническом лимфолейкозе экспрессия антигена i на лимфоцитах сни­жена (Shumak и соавт. [154]), при остром лимфобластозе - в норме. Ослабление антигена i отмечено у больных острым миелолейкозом (Shumak и соавт. [155]). Лимфобласты можно отличить от миелобластов по экспрессии антигена i. Этот прием используют при дифференциальной диагностике острого лимфолейкоза и хронического миелойкоза (Shumak и соавт. [153]).

Другие холодовые агглютинины

Помимо антител анти-I и анти-i идентифицировано много других Холодовых агглютининов (табл. 27.2) (Roelcke и соавт. [131, 133], Gottsche и соавт. [63]). Все они соответствуют характеристикам Холодовых антител и, за исключением анти^-антител, относятся к моноклональным антителам IgMic.

После антител анти-I наиболее распространенными являются анти-Рг-антитела. Они реагируют с чувствительными к протеазам детерминантами, рас­положенными в области О-связанных три- и тетрасиалосахаридов эритроцитар-иых сиалогликопротеинов. Последние входят в состав гликофоринов А сущих антигены системы MNS.

Агглютинины Pr подразделяют на анти-Pr,, анти-Рг2 и анти-Рг3, ко-торш отличаются по способности реагаровать с эритроцитами, модифицирован-нщи с помощью различных методов (Roelcke [131]). Антитела анти-Рг и анти-Рг3 в свою очередь подразделяют на анти-Рг]1п и анти-Ргзь по способности реаги­ровать с эритроцитами различных видов: анти-Рг и анти-Рг311 реагируют только с эритроцитами человека, в то время как анти-Рг135т и анти-Рг19т агглютинируют также эритроциты собак (Roelcke [131]). Холодовые^гглютинины анти-Sa, так же как и анти-Рг2, выявляют антиген на гликофорине А и некоторых ганглиозидах (Dahr и соавт. [23], Uemura и соавт. [174]). Некоторые антитела анти-Рг и анти-Sa представляли собой IgAK (Pereira и соавт. [115], Roelcke и соавт. [136]). Антитела анти-Рг выявлены у больных краснухой (инфицированных вирусами Rubella). У одного из них отмечался выраженный гемолиз (Konig и соавт. [88]).

Таблица 27.2 Характеристика Холодовых агглютининов

Антитела к антигену

Реакция с эритроцитами

Биохимические особенности

вз

нов

B3i

пап

сиа

I

+

ел

ел

+

+

Разветвленные гликопротеины и гликолипиды

i

ел

+

+

+

+

Линейные гликопротеины и гликолипиды

1т

ел

 

ел

+

+

 

J

+

+

+

+

+

Линейные и разветвленные гликопротеины и гликолипиды

Ш

+

+

+

-

-

О-гликаны и гликофорины

Рг

а

+

+

; +

-

+

 

Sa

+

+

+

ел

-

О-гликаны гликофоринов и ганглиозидов

Sia-Ibl (Gdj)

+

+

+

+

-

Сиалилированные разветвленные гликофорины

Sia-Ib2 (Gd2)

+

+

+

+

-

Сиалилированные линейные и разветвленные гликолипиды

Sia-bl (Fl)

+

ел

ел

+

-

Сиалилированные разветвленные гликолипиды

Sia-Il (Vo)

ел

+

+

+

ел

Сиалилированные линейные гликолипиды

Li

ел

+

+

+

-

Сиалилированные линейные гликолипиды

Lud

+

ел

+

ел

-

 

Me

+

+

 

+

+

Экспрессия усиливается молозивом

Orn

+

+

 

+

+

Экспрессия не усиливается молозивом

Ju

 

 

 

ел

ел

 

IgMWoo

,

-

-

-

+

Цепи 1-го типа

Rx (Sdx)

+

ел

+

+

+

Оптимум реагирования при рН 6,5

Примечание, вз - взрослые, нов - новорожденные, вз i - лица с фенотипом «взрослый i», пап ! папаинизированные эритроциты, сиа - эритроциты, обработанные сиалидазой, « + » -реакция положительная, ел - слабоположительная,« - » - отрицательная.

Иггерогенной группой антител, выявляющих устойчивые к протеазам, но рркггвительные к сиалидазе антигены, активированные в результате а2 3-еиалилирования веществ I и i (разветвленных и линейных) (Roelcke и соавт. [138, 142, 143]). Антитела анти-Sia-Ibl (анти-Gd,) распознают структуру с тер­минальным остатком сиаловой кислоты (NeuNAc<x,2,3-), в то время как анти-Sia-Ib2 (aHTH-Gd2) реагируют с субтерминальным участком, содержащим га­лактозу (NeuNAca,2,3-3Gaipi-) (Roelcke, Brossmer [135]). Антитела анти-Sia-Ib также связываются с сиалилированными антигенами Lea (sLea) и Lex (sLex), экс-прессированными на клетках (Gallart и соавт. [53]).

Антиген Sia-bl(Fl) расположен на разветвленных сиалилированных гликоли-пидах, в то время как Sia-Il(Vo) и Li представлены на а,2,3-сиалилированных линейных структурах гликолипидов (Loonies и соавт. [94], и соавт. [130], Roelcke и соавт. [132,137,138,141]).

О биохимической природе антигенов Lud, Om, Me и Ju известно немно­го. Антитела анти-Lud распознают а,2,3-сиалилированную структуру на це­пях 1-го типа (Roelcke и соавт. [134, 137]). Активность антител анти-Ме уси­ливается в присутствии предварительно подогретого грудного молока, а имен­но сахарами, входящими в его состав (Salama и соавт. [148]). Активность Холо­довых агглютининов анти-Om снижалась в присутствии молока, и это отличало их от анти-Ме-антител (Kajii и Ikemoto [85]). Атитела анти-Ме и анти-Om могут быть идентифицированы как анти-j из-за их сходства (Roelcke и соавт. [139]). Холодовые агглютинины IgMw°, агглютинирующие эритроциты, обработан­ные сиалидазой, распознают цепи 1-го типа: Gal{31 —| 3GlcNAcpi —► 3Gaipi —> 4Glc/GlcNAc (Picard и соавт. [118]). Агглютинины анти-Rx вначале получили обозначение aHra-Sdx, поскольку их активность ингибировала моча лиц Sd(a+), но не Sd(a-) (Marsh и соавт. [99, 100]). Bass и соавт. [4] полагают, что ингиби-ция указанных Холодовых антител является неспецифической и, вероятно, обу­словлена рН-зависимостью антител.

Анти-1

Аллоиммунные антитела анти-I с высокой активностью обычно присутству­ют в сыворотках крови взрослых с фенотипом i (Race, Sanger [126]). Хотя эри­троциты таких людей не лишены полностью антигена I, выявляемые у них ан­титела квалифицируют как аллоиммунные по своей природе. Эти антитела от­носятся к классу IgM, имеют низкий температурный оптимум реагирования. В редких случаях аллоиммунные анти-1-антитела принадлежали к классу IgG, были активны при 37 °С и обладали при этом гемолитической активностью (Marsh и соавт. [98]).

В исследованиях invivoс эритроцитами, имеющими радиоактивную метку, было показано, что через 15 мин после введения эритроцитов 1+ больным с ал-лоиммунными анти-1-антителами в кровотоке сохранялось менее 1 % введен­ных эритроцитов. Такие результаты, безусловно, свидетельствуют о высоком ге­молитическом потенциале аллоиммунных анти-1-антител (Chaplin и соавт. [14]). В другом наблюдении разрушение эритроцитов под действием аллоиммунных анти-1-антител invivoпроисходило не столь интенсивно (Clafin [17]).

По заключению Issitt и соавт. [73, 76], холодовые агглютинины являются смесью фракций анти-I и анти-i, которые могут быть разделены с помощью ме­тода адсорбции - элюции.

Известны лектины с анти-1-подобной активностью. Лектины из икры мор­ского моллюска Aplysiadepilansобладали специфичностью анти-I в серологи­ческих реакциях. Другие виды анти-1-подобных лектинов проявляли разную специфичность в зависимости от присутствия антигенов АВО, Н или Р (Gilboa-Garber и соавт. [59]).

Аллоиммунные антитела со специфичностью анти-i не описаны. Активные анти-ьантитела по своей природе, как правило, аутоиммунные.

Анти-j

Roelcke и соавт. [143] нашли у 2 больных холодовые агглютинины, реагиро­вавшие одинаково интенсивно с эритроцитами взрослых и новорожденных. Эти антитела с двойной специфичностью анти-Ii получили обозначение анти-j. Они реагировали с эритроцитами, обработанными протеазой и сиалидазой. С эритро­цитами, обработанными эндо-р-галактозидазой, которая расщепляет олигосаха-ридные цепи 2-го типа, эти антитела не реагировали. Активность aHra-j-антител угнеталась линейными (i) и разветвленными (I) олигосахаридами 2-го типа.

Дjказанные 2 образца анти-j-антител отличались от обычных Холодовых аг-рютннинов и представляли собой иммуноглобулины Мк.

Анти-1

Впервые описанные анти-1-антитела имели аутоиммунную природу и послу­жили причиной развития гемолитической анемии (Wiener и соавт. [180]). Позднее были описаны другие образцы аутоанти-1-антител, которые имели высокий титр и вызывали прямую агглютинацию эритроцитов (Crookston и соавт. [21], Weiner и соавт. [178], Van Loghem и соавт. [175]). Холодовые антитела, способные вызвать болезнь Холодовых агглютининов, обычно имеют анти-1-специфичность. Эти ау­тоантитела по своему происхождению являются моноклональными, хотя и прояв­ляют некоторую гетерогенность, в большей мере обусловленную особенностями эритроцитов. Аутоантитела чаще относились к типу IgMK, описаны также IgGX и IgG (Roelcke [131], Mollison и соавт. [104], Pruzanski, Shumak [124, 125], Feizi [42]). Они вызывали прямую агглютинацию 1-положительных эритроцитов при 4 °С, большинство образов аутоантител не проявляло активности при температу­ре выше 30 °С. В случаях развития болезни Холодовых агглютининов, аутоанти­тела представляли собой смесь высокоактивных IgG и IgM с легкими к-цепями. В сыворотках больных также присутствовали низкоактивные агглютинины со спец­ифичностью анти-Ii (Terness и соавт. [166]).

С помощью кроличьих антител к очищенным Холодовым агглютининам анти-I- и анти-i было показано, что они имеют разные идиотипы и отличают­ся от Холодовых агглютининов со специфичностью анти-Рг (Feizi и соавт. [49]). Крысиные преципитирующие антиглобулиновые МКА распознавали перекрест­но реагирующие идиотипические детерминанты, которые имелись на практиче­ски всех образцах антител анти-I и анти-i. Указанные МКА специфически ин-гибировали гемагглютинацию, вызываемую аутоиммунными анти-I- и анти-i-антителами (Stevenson и соавт. [162, 163]). Ингибиции не отмечено по отноше­нию к Холодовым агглютининам других специфичностей (Smith и соавт. [161]). Эпитоп, распознаваемый крысиными МКА, располагался в вариабельной обла­сти тяжелой цепи IgM, контролируемой геном V4-34 (Grillot-Courvalin и соавт. [64], Leoni и соавт. [91], Pascual и соавт. [113], Silberstein и соавт. [159]). Все ау­тоантитела анти-i содержат сегмент, кодируемый геном V4-34 (Schutte и соавт. [151]). Аутоанти-1-антитела такого сегмента не содержат (Jefferies и соавт. [78]).

Большинство антител системы Rh также имеют участок, кодируемый геном V4-34, поэтому в дополнение к Rh-специфической активности такие антитела обладают свойствами Холодовых агглютининов и направлены одновременно к антигенам Ii (Thorpe и соавт. [170, 171]).

Появление транзиторных моно- или поликлональных аутоантител анти-I мо­жет провоцировать Mycoplasmapneumoniae. У 50 % больных с респираторной инфекцией, вызванной этим возбудителем, в сыворотке крови выявляют холо­довые агглютинины в высоком титре (Roelcke [131]). Предполагают, что ми-|Шяазмы способны модифицировать сиалилированные I-активные структуры таким образом, что последние становятся иммуногенными и стимулируют син-т специфических антител (Feizi, Taylor-Robinson [50], Loomes и соавт. [93, 94]). Сиалилированные I-детерминанты распознаются Холодовыми агглютини­нами, получившими обозначения amn-Sia-Ib2 (анти-Gd) и анти-Sia-bl (анти-F1). Указанные антитела практически всегда присутствует вместе с анти-1-антителами (Issitt, Jackson [74], Konig и соавт. [87], Roelcke и соавт. [140]).

Анти-i

Первые 3 образца аутоиммунных анти-ьантител были найдены у боль­ных ретикулезом, один из них умер от аутоиммунной гемолитической анемии (Race, Sanger [126], Jenkins и соавт. [80], Tippett и соавт. [172]). Четвертый обра­зец аутоанти-ьантител был получен от больного с миелолейкозом (Van Loghem и соавт. [175]). У пациентов с болезнью Холодовых агглютининов аутоанти-i-антитела иногда определялись вместо анти-I (Mollison и соавт. [104]). Специфичность аутоанти-ьантител была оценена как гетерогенная (Doinel и со­авт. [28], Feizi, Kabat [46], Dzierzkowa-Borodej, Voak [36]). Синтез этих антител кодируется исключительно локусом V4-34 igM(Schutte и соавт. [151]).

Аутоантитела анти-i часто присутствуют у больных инфекционным монону-клеозом. По данным разных авторов, частота их у больных с этой патологией варьировала от 8 до 90 %, однако лишь в редких случаях имели место эпизо­ды гемолиза invivo, осложнявшие течение заболевания (Jenkins и соавт. [79], Rosenfield и соавт. [144], Сарга и соавт. [13], Hossaini [71]). Эти антитела отно­сились к IgM (Jenkins и соавт. [79], Hossaini [71], Troxel и соавт. [173], Wilkinson и соавт. [181], Burkart, Hsu [11], Gronenmeyer и соавт. [65]), иногда в комби­нации с IgM находили анти-IgG (ревматоидный фактор) (Сарга и соавт. [13], Gronenmeyer и соавт. [65]). Один из образцов антител анти-i напоминал двух­фазные гемолизины Доната - Ландштейнера. Эритроциты, сенсибилизирован­ные этими антителами при 4 °С (1-я фаза), гемолизировались при последующей инкубации пробы при 37 °С (2-я фаза) (Burkart, Hsu [11]).

Один образец аутоанти-ьантител IgG был найден Shirey и соавт. [152] у больного пароксизмальной холодовой гемоглобинурией.

Присутствие аутоантител анти-i нередко сопровождалось иммунодефицит-ными состояниями. Так, указанные антитела были выявлены у 50 % больных синдромом Вискотта - Олдрича, редким наследственным Х-ассоциированным заболеванием (Grillot-Courvalin и соавт. [64]) и у 64 % больных ВИЧ-инфекцией (McGinnis и соавт. [103]).

Материнские аутоантитела анти-i IgG способны преодолевать плаценту, вы­зывать положительную прямую антиглобулиновую пробу с эритроцитами ново­рожденного и инициировать умеренную желтуху в ранний постнатальный пери­од (Gerbal и соавт. [57]). Описано развитие острого внутрисосудистого гемолиза у больного с антич-антителами. Реакция развилась после переливания двух доз эритроцитов (Judd и соавт. [84]).

Hirohashi и соавт. [70] получили гетерогибридому, продуцирующую моно-клональные антитела анти-i, посредством слияния мышиной миеломы с лим­фоцитами больного раком легкого. Другая гетерогибридома, продуцирующая анти-ьантитела, получена Grillot-Courvalin и соавт. [64] путем гибридизации спленоцитов больного синдромом Вискотта-Олдрича.

Нормальные антитела

В сыворотке здоровых взрослых людей присутствуют в разных соотношени­ях нормальные естественные холодовые агглютинины, отличающиеся по своей специфичности.

Анти-Р, анти-Fи анти-Р

В 1971 г. Marsh и соавт. [102] получили данные, свидетельствующие о неод­нородности анти-1-антител, которая проявлялась в серологических реакциях с разными образцами эритроцитов, в том числе с эритроцитами взрослых и ново­рожденных. Эти исследователи обозначили компонент антигена I, который при­сутствует на эритроцитах пуповинной крови, IF, и предположили, что количе­ство этого антигена не меняется столь значительно, как содержание антигена I, вращающегося из расходуемого i. Антиген I, который не содержится на эри-|ЩЬцитах пуповинной крови и развивается по мере снижения уровня i, был на­ши ID. Другими словами, эритроциты пуповинной крови содержат антигены i иР, а эритроциты взрослых - антиген ID и следовые количества антигенов i и В Далее авторы показали, что анти-Р-антитела нейтрализуются грудным моло­ком, содержащим антиген I, а анти-Р-антитела молоком не нейтрализуются.

Marsh и соавт. [102] обнаружили, что обычные анти-1-антитела, содер­жащиеся в сыворотке практически всех здоровых людей, как правило, име­ют анти-Р-специфичность. Эти антитела реагируют с эритроцитами взрос­лых и не реагируют с эритроцитами пуповинной крови. В то же время анти-1-антитела, имеющиеся у пациентов с болезнью Холодовых агглютининов пред­ставляли собой смесь анти-Р- и анти-Р-антител и одинаково реагировали с эритроцитами взрослых и новорожденных. У отдельных больных антитела проявляли только анти-Р-специфичность и реагировали только с эритроцита­ми пуповинной крови.

Issitt и Anstee [73] констатировали случаи, когда анти-1-антитела выходили за рамки этой классификации, а именно хорошо реагировали со всеми образ­цами эритроцитов новорожденных. Как полагают авторы, антиген IF представ­лен структурой разветвленных цепей олигосахаридов, уже присутствующих на эритроцитах индивида к моменту рождения, в то время как антиген Р представ­ляет собой структуру цепей, которые превращаются в разветвленные в первые в 18 мес. жизни.

Обозначение «анти-Р-антитела» использовали Dzierzkowa-Borodej и соавт. Так они назвали анти-1-антитела, которые полностью ингибировались иммуно­глобулином А, выделенным из грудного молока или молозива. Детерминанта Isне является самостоятельной и входит в состав антигена I.

Анти-Р

Антитела анти-1т хорошо реагируют с эритроцитами новорожденных, гораз­до слабее с эритроцитами взрослых и очень слабо - с эритроцитами взрослых с фенотипом i. Холодовые агглютинины анти-1т выявлены у 76 % коренных жите­лей Папуа - Новой Гвинеи! Шесть образцов сывороток были детально изучены, при этом установлено, что в 5 из них антитела имели специфичность анти-1т, в одном - анти-I (Booth и соавт. [9]).

Антитела анти-1т выявлены у 84 % венесуэльских индейцев племени янома-ма (Layrisse [90]).

Первые 4 образца антител анти-1т среди лиц белой расы были найдены у па­циентов с болезнью Ходжкина. В 3 случаях они обладали свойствами гемолизи­нов и вызвали аутоиммунную гемолитическую анемию (Garratty и соавт. [55,56]).

Аутоантитела анти-1т класса IgM, способные вызвать гемолитическую ане­мию, описали Schmidt и соавт. [150] и Postoway и соавт. [120].

Аутоантитела анти-1т класса IgG не были отнесены к клинически значимым по результатам изучения в пробах in vitr.

Новости медицины

Рассматривая статины?

Много миллионов человек в мире принимают статины, но исследования показывают, что только 55% из тех, кому рекомендуется принимать статины, принимают их. Это большая проблема, потому что исследования также показывают, что те из группы...

Высокое АД во время беременности может повлиять на сердце женщины в долгосрочной перспективе

Связанное с беременностью высокое кровяное давление может привести к долгосрочным сердечным рискам, показывают новые исследования.

Отмена приема опиоидов по рецепту имеет болезненные последствия для пациентов

Кэролин Консия, столкнулась с более серьезными последствиями репрессий против назначения опиоидов, когда узнала, почему сын ее подруги покончил с собой в 2017 году.

Психическое заболевание не является причиной массовых расстрелов

Новое исследование показывает, что психические заболевания не являются фактором большинства массовых расстрелов или других видов массовых убийств.




Тесты для врачей

Наши партнеры