Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

Рекомбинантные А-В-гликофорины GP.Mur (Mi.III) и GP.Hil (Mi.V) co-ержат антигены Mur (MNS10) и Hil (MNS20), которые идентифицируют­ся соответствующими антителами - анти-Mur и анти-Hil. Экспрессия анти­генов М или N на эритроцитах Mur+ и НП+ ослаблена, отсутствует антиген *N' (MNS30). В то же время выраженность антигена s повышена. Найдены варианты А-В-гликофорина (GP.Hil) с необычным антигеном S, выявляе­мым лишь некоторыми образцами антител. Позднее было установлено, что все несущие антиген S гибридные А-В-гликофорины экспрессируют еще один редкий антиген - TSEN (MNS33) (Reid и соавт. [204]). Молекулярно-генетические исследования последних лет позволили подразделить ген GYP(A-B) на аллели GYP(A-B)Hil и GYP(A-B)JL. Помимо гибридиза­ции эти гены претерпели точковую мутацию в экзоне 4 с заменой треони­на на метионин в положении 29 (Huang и соавт. [101], Reid и соавт. [204]). Аминокислотная замена в этом участке определяет специфичность антиге­нов S и s.

г*Гибридный гликофорин А-В несет также редкий антиген SAT (MNS36), от­крытый в 1991 г. Daniels и соавт. [60]. Этот гликофорин обозначен GP(A-B)TK. В отличие от других гибридных А-В-гликофоринов, описанных выше, GP(A-B) Ж не экспрессирует антигены S, s и U. Молекулярно-генетический анализ по­зволил установить, что контролирующий этот гликофорин ген образовался в ре­зультате слияния экзонов 1-4 GYPA и 5-6 GYPB и кроссинговера внутри нитро­на 4. Таким образом, антитела анти-SAT распознают вновь образовавшуюся по­следовательность аминокислот Ser-Glu-Pro-Ala-Pro-Val, кодируемую частью эк­зонов 4 GYPA и 5 GYPB. Возникновение указанной редкой антигенной детерми­нанты Daniels и соавт. [60] связывают также со вставкой в молекулу гликофо-рина А последовательности Ala-Pro-Val.

Другим проявлением гибридного гена GYP(A-B) является гликофорин-А-дефицитный фенотип En (а-). Он является результатом неполного кроссингове­ра между участком GYPA, кодирующим антиген М, и фрагментом GYPB, кон­тролирующим экспрессию фактора S (Huang и соавт. [105, 107]). Некоторые образцы антител анти-М, распознающие серии в положении 1, реагируют с эри­троцитами лиц En(a-)UK (Daniels [56]).  отличие от GP(A-B) рекомбинантные гликофорины GP(B-A) несут другие антигены, которые отнесены в группу анти-Lepore [см. Антигены GP(B-A)].

Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

В 1978 г. Anstee и соавт. [17], изучая серологические свойства антигена GP.Hil (Mi.V), предположили, что он является фенотипическим проявлением гена, образовавшегося в результате кроссинговера между GYPA и GYPB. При этом, как полагали авторы, образуются 2 новых гибридных аллеля: GYP(A-B) и GYP(B-A), контролирующих синтез реципрокных гликофоринов, - GP(A-B) и GP(B-A) соответственно.

Последующие серологические и молекулярно-генетические исследования, проведенные Huang и соавт. [97,99,101-107], подтвердили предположение ука­занных выше авторов. Гибридные гликофорины были обнаружены и подразде­лены на типы Lepore и анти-Lepore.

Иногда образуются более сложные гибридные гены: GYP(A-B-A) и GYP(B-А-В). Полагаю!; что такая рекомбинация является результатом повторного кроссинговера (Huang и соавт. [102]). Новые последовательности приводят к за­менам аминокислот в различных участках пептидных цепей гликофоринов, что соответственно сопровождается появлением новых антигенов и их сочетаний (табл. 6.6 и 6.7). Включение в структуру GYPB активных сайтов сплайсинга из GYPA делает возможной трансляцию псевдоэкзона ЧВЗ гена GYPB (Huang и со­авт. [103], Reid, Lomas-Francis [202]). В других случаях рекомбинация способ­ствует образованию стоп-кодонов, прерывающих считывание генетической ин­формации. Фенотипически это проявляется в виде ослабленных антигенов и ну­левых фенотипов, таких как М^к и En(a-)UK.

Гибридные гликофорины и ассоциированные с ними антигены системы MNS

Фенотипы, генотипы и варианты гибридных гликофоринов

Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

Подсистема Мильтенбергер представляет собой серию редких антигенов и фенотипов, ассоциированных с антигенами системы MNS и друг с другом. Антитела, реагирующие с антигенами подсистемы, иногда дают перекрестные реакции (Chandanyingyong и соавт. [36-38], Giles и соавт. [84]).
Систематизация антигенов Мильтенбергер начата в 1966 г. с выделения первых четырех классов антигенов, вошедших в указанную подсистему (Cleghorn [44]). В последующие десятилетия идентифицировано еще 7 классов подсистемы (Akane и соавт. [10], Anstee и соавт. [16], Blackall и соавт. [25], Blanchard и соавт. [27], Broadberry и соавт. [32, 33], Chandanayingyong и соавт. [36-38], Crossland и соавт. [51], Dahr [53], Giles и соавт. [84], Johe и соавт. [121], Langley и соавт. [141], Skov и соавт. [229], Vengelen-Tyler и соавт. [254],
Webb и соавт. [258]).

Редкие антигены, входящие в подсистему, присутствовали преимущественно у монголоидов (Akane и соавт. [10], Baldwin и соавт. [19], Judd и соавт. [125], Konugres и соавт. [131], Kornstad и соавт. [132], Lewis и соавт. [146], Lin и со­авт. [147], Lin-Chu и соавт. [148], Metaxas-Buhler и соавт. [163], Nguen ТЫ Huingh и соавт. [174]).

Выделение классов в подсистеме Мильтенбергер основывалось на различи­ях, улавливаемых серологическими методами, другие методы исследования в те годы не применяли. В настоящее время ряд специалистов считают способ обо­значения антигенов Мильтенбергер устаревшим и не находят целесообразным выделение в ней новых классов (Dahr [53], Reid и соавт. [209], Tippett и соавт. [247]). Предложен другой способ обозначения гликофоринов: после аббревиату­ры GP пишут сокращенное имя первого пробанда (табл. 6.6). Например, старое обозначение Mi.HI пишут как GP.Mur, обозначение GP(B-A-B)Mur соответству­ет варианту гликофорина, обозначение GYP(B-A-B)Mur - варианту гена, контро­лирующего фенотипические проявления (Reid и соавт. [209]).

Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

Антиген U описали в 1953 г. Wiener и соавт. [262], обнаружившие соответ­ствующие анти-и-антитела. Обозначение U (universal) было дано этому антиге­ну из-за его универсальной встречаемости среди представителей разных рас. У 1 % негроидов этот антиген отсутствовал (Hoekstra и соавт. [95], Lowe и соавт. [152], Wiener и соавт. [262]).     

В 1954 г. Wiener и соавт. [262] нашли 2-й образец антител анти-U. Серологические реакции показывали, что антиген, открываемый указанными антителами, ассоциирован с системой MNS. Все U-отрицательные лица не име­ли также антигенов S и s. Стало очевидным, что фактор U - еще один серологи­ческий продукт локуса Ss (Wiener и соавт. [262]).

Антитела анти-U имеют, как правило, иммунное происхождение и считают­ся клинически значимыми, поскольку были причиной как трансфузионных ре­акций, так и ГБН, в ряде случаев с летальным исходом (Giblett и соавт. [81], РШау [184], Rothman и соавт. [211, 212], Smith и соавт. [231], Taliano [242], Wiener и соавт. [262]).

В отличие от антител к антигенам М, N, S и s анти-и-антитела сохраняют свою активность и специфичность в тестах с энзимированными эритроцитами. Эффекта дозы у антигена U не отмечено (Issitt и соавт. [117]).

Лица, не имеющие антигена U (все фенотипы S-s-), встречаются почти ис­ключительно в негроидных популяциях (Allen и соавт. [12], Francis и соавт. [71], Hoekstra и соавт. [95], Reid и соавт. [208], Sanger и соавт. [222], Wiener и соавт. [261]). Фенотип S-S-TJ- среди европеоидов регистрируют крайне редко (Moores и соавт. [168], Sondag-Thull и соавт. [232]). Примерно 42 % негроидов S-s- со­держат слабый антиген U (U^var), обнаруживаемый адсорбцией - элюцией (Allen и соавт. [12], Francis и соавт. [71], Reid и соавт. [208], Stony и соавт. [239]).

Проблема поиска совместимой крови для реципиентов с антителами анти-U актуальна для стран, где диаспора негроидов значительна по числен­ности. Так, в США наиболее частыми запросами в регистр редких доноров Американского Красного Креста являются заявки на U-отрицательную кровь. Например, с сентября 1995 г. по август 1996 г. запросов на U-отрицательную кровь было почти в 4 раза больше, чем заявок на эритроциты редких феноти­пов Vel- и Yt(a-) - 49 и 13 соответственно. При лечении ГБН, обусловленной антителами анти-U, из-за редкой встречаемости U-отрицательных доноров в США прибегают к обменному переливанию U-положительной крови. Для по­лучения удовлетворительного клинического эффекта достаточно 2-4 доз до­норской крови (Reid и соавт. [208]).

При сравнительном изучении образцов анти-и-антител выявлена их гетеро­генность. Для обозначения вариантов антигена U и анти-и-антител предложены обозначения U^A, U^B, U^XU^Z (Issitt, Anstee [113], Mentor и соавт. [158], Read и соавт. [193], Stony и соавт. [238]). Результаты дальнейших исследований показа­ли, что перечисленные антигены и соответственно антитела отличаются друг от друга по количественным, но не качественными параметрам (Issitt [112]).

Помимо аллоиммунных, описаны также аутоантитела анти-U (Bell и со­авт. [24], Chiofolo и соавт. [42], Kessey и соавт. [129], Marsh и соавт. [155], Nugent и соавт. [177], Roush и соавт. [214], Sacher и соавт. [216]). Эритроциты S-s-Ц- лишены гликофорина В, клетки S-s-U^var+ содержат его в следовых количествах (Blanchard [26]).

Фенотип S-*-s-U- является следствием делеций экзонов 2-6 GYPB и 1 GYPE (Huang и соавт. [101], Reid, Lomas-Francis [202]). Возникновение фенотипа S-s~U^var+ связывают с эффектом GyP^-подобного гена, экзон 2 которого со­держит кодон для антигена Не (MNS6) (Huang и соавт. [99]). Этот фенотип обозначают как GRHe(P₂) (см. Гибридные гликофорины).

Категория: Система MNS

Опубликовано: 20 апреля 2014

Гликофориндефицитные фенотипы

Низкое содержание гликофоринов А и В на эритроцитах обусловлено ча­стичной или полной делецией генов GYPA и GYPB.

GPA-дефицитные фенотипы  Еп(а-)

В 1969 г. Darnborough и соавт. [63] обнаружили в сыворотке крови бере­менной женщины, англичанки по происхождению, антитела к антигену очень высокой частоты. Исследователи обратили внимание на необычное реагиро­вание эритроцитов женщины и некоторых членов ее семьи. В серологических тестах эритроциты проявляли повышенную агглютинабельность и напомина­ли клетки, предварительно обработанные протеолитическими ферментами. Авторы предположили, что эти эритроциты, подобно энзимированным, лишены определенного поверхностно расположенного оболочечного вещества, назван­ного ими клеточным конвертом (cell envelope). Новый антиген и выявляющие его антитела обозначены Еп^а и анти-Еп^а соответственно.

Лица редкого фенотипа Еп(а-) с наличием антител анти-Еп^а вскоре были найдены другими исследователями (Furuhjelm и соавт. [75], Gahmberg и со­авт. [76], Inglis и соавт. [Ill], Issitt и соавт. [116], Moulds и соавт. [171], Tanner и соавт. [244]), в том числе среди японцев (Okubo и соавт. [179]), пакистан­цев (Rapmi и соавт. [192]), финнов (Walker и соавт. [255]) и во французско-канадской семье (Taliano и соавт. [243]).

В основе возникновения редкого фенотипа Еп(а-) могут лежать разные при­чины. Одна из них - гомозиготность по редкому гену Еп, отличающемуся соче-танной делецией экзонов 2-7 гена GYPA и экзона 1 гена GYPB. В результате та­кой делеций на эритроцитах отсутствует гликофорин A (cell envelope).

Позднее установлено (Daniels [56]), что лица Еп(а-), выявленные Darnborough и соавт. [63], имели генотип GYPfA-BJ/M¹".

Для дифференциации генных нарушений, приводящих к возникновению фе­нотипа Еп(а-), ген Еп предложено обозначать как En(UK) и En(Fin) - ген Еп английского и ген Еп финского типов соответственно (Schenkel-Brunner [223], Walker и соавт. [256]).

На эритроцитах Еп(а-) отсутствуют антигены, ассоциированные с антиге­ном М, за исключением антигенов S и s, которые выражены нормально.

Эритроциты Еп(а-) не содержат антигенов Wr^a и Wr^b системы Diego, т. е. они одновременно Еп(а-) и Wr(a-b-) (Issitt и соавт. [116]).

Эритроциты Еп(а-) имеют, как указано выше, характерную особенность. Они, подобно энзимированным эритроцитам, непосредственно агглютинируют­ся в солевой среде сыворотками анти-D, анти-С, анти-с, анти-Е, анти-е и други­ми, содержащими неполные IgG-антитела. Эритроциты обычных людей (Еп+) такую способность не проявляют, их мембрана экранирована гликофоринами «становится доступной для агглютинирующего действия неполных антител только после обработки протеолитическими ферментами.

Ген Еп редкий, известно лишь несколько несвязанных родством индивидов, имеющих генотип Еп/Еп [75, 76,111,116,171,179,192,244,255]

Символ М^к предложен в 1964 г. Heiken и соавт. [92] для обозначения молчащего аллеля в локусе MN. В присутствии гена М^к синтеза антигенов М, N, S и s не про­исходит. Найдены лица гетеро- и гомозиготные по гену М^к (Hodson и соавт. [94], Metaxas и соавт. [159,162,163], Okubo и соавт. [178], Tokunaga и соавт. [248]).

На эритроцитах гомозигот М^к/М^к гликофорины А и В отсутствуют. В сероло­гических реакциях эритроциты М^к ведут себя так же, как и эритроциты Еп(а-) (Metaxas и соавт. [159], Norling и соавт. [176]).

Присутствие редких генов М^к и Еп может быть причиной ошибок при экспер­тизе спорного родства. Как правило, супружеская пара М х N, не может иметь де­тей М и N, а супружеская пара S х s не может иметь детей S и s, поскольку гено­тип лиц, имеющих фенотип М, N, S и s, расценивается как MJM, N/N, S/S и s/s. Присутствие молчащего гена у одного из родителей может сопровождаться фено­меном, именуемым судебными медиками как противоположная гомозиготность. Родители М/- х N/N могут иметь ребенка N, а родители S/- х s/s - ребенка s, что может послужить основанием для исключения родства родителя М и S.

Все лица М^к и Еп(а-) были соматически здоровы, каких-либо аномалий эри­троцитов у них не выявлено (Walker и соавт. [255]).

Причиной возникновения гена М^к является сочетанная делеция экзонов 2-7 гена GYPA, экзонов 1-6 гена GYPB и экзона 1 гена GYPE (Huang и соавт. [97], Reid [199]).

Обозначение анти-Еп^а является собирательным и распространяется на ан­титела, направленные к различным участкам гликофорина А. В зависимости от устойчивости антигенного субстрата к действию трипсина и фицина антитела анти-Еп^а подразделяют на affra-En^aTS (трипсинчувствительные), aHra-En^aFS (фицинчувствительные) и aHTH-En^aFR (фицинрезистентные).

Аллоиммунные анти-Еп^а-антитела описаны как причина посттрансфузион­ной гемолитической реакции (Postoway и соавт. [189]). Аутоантитела анти-Еп^а обнаруживали у больных аутоиммунной гемолитической анемией.