Категория: Система RH

Нами [28, 30] была исследована ассоциативная связь резус-принадлежности с предрасположенностью к опухолевым заболеваниям. Проанализировали дан­ные обследования 1457 онкологических больных и 18 090 здоровых лиц (кон­трольная группа).

Частота антигена Rh_o(D) в большинстве обследованных групп больных не отличалось от таковой у здоровых (табл. 4.32). Исключение составили больные с опухолями толстой кишки, кожи, щитовидной железы, желудка (мужчины) и гемобластозами. Среди них чаще встречались Rh-отрицательные (16,26-25,76%).

Распределение антигенов Rh-Hr у больных с злокачественными опухолями

Фенотипирование эритроцитов больных по минорным антигенам - G, С, с, Е, е, D^u - позволило выявить некоторые особенности их распределения
(см. табл. 4.32). Так, антиген Е встречался с низкой частотой у мужчин, больных раком желудка и толстой кишки (25,6 и 20,9 % соответственно, при норме
37,17%).

По сравнению со здоровыми людьми больные с опухолями реже имели фено­тип ccDEE (2,99 % при норме 4,35 %). Среди больных женщин очень редко встре­чался антиген который был обнаружен лишь в 2 случаях среди 1854 больных с гормонально-зависимыми опухолями (рак матки, яичника, молочной железы, тол­стой кишки). Среди здоровых лиц антиген D^u имеет частоту 1,37 % (табл. 4.33).

Вместе с тем у больных с опухолями желудка, толстой кишки, легких и брон­хов чаще определялись сочетания CcDee (31,85%), ccDee (2,92%) и Ccddee (1,39 %), гаплотипы cDe (4,16 %), Cde (2,68 %).

Распределение фенотипов Rh-Hr у больных с злокачественными опухолями

* Различия достоверны: p < 0,001-0,05.

Таким образом, выявленные различия частоты антигенов системы Rh связа­ны главным образом с распределением минорных специфичностей Rh и редких генных комплексов cDe и Cde. Среди большинства обследованных групп боль­ных реже встречалось сочетание генов cDE. Можно предположить, что лица с этим гаплотипом менее склонны к накоплению мутаций, приводящих в итоге к опухолевому росту. Полученные нами данные не противоречат гипотезе транс­формации нормальной клетки в опухолевую в результате многоступенчатого процесса накопления генетических изменений (Ю.Н. Кобзев, Е.В. Флейшман [66]). К патогенетическим факторам мутаций относят транспозоны ретрови-русного происхождения. Такие мобильные элементы, несущие онкогены, встра­иваясь в клеточную ДНК вблизи протоонкогенов, могут активировать их экс­прессию. В частности, изменение функций антионкогена АВЫ в позиции 9.q.34.1 (рядом с локусом генов ABO, 9.q.34.2) при образовании гибридно­го гена BCR/ABL способствует развитию миело- и лимфолейкоза (Г.И. Абелев [2]). Утрата антионкогена р73 в позиции 1р.36.3 локуса RH (1р.36.1-1р34.3) в 47 % случаев связана с возникновением гемобластоза, а также рака молочной железы, прямой кишки, легких, нейробластомы (И.Б. Зборовская [57]). Эти дан­ные позволяют предположить, что изменения структуры генов RH могут быть ассоциированы с возникновением некоторых видов онкопатологии. Вместе с тем следует признать, что гены, контролирующие синтез эритроцитарных ан­тигенов, к процессу канцерогенеза могут иметь лишь косвенное отношение.

Показатель относительного риска (RR) онкологических заболеваний, рассчи­танный нами для лиц, имеющих гены cDe и Cde, составляет 2,06 и 2,98 соот­ветственно. Это несравненно ниже, чем риск возникновения болезни Бехтерева, синдрома Рейтера, ювенильного ревматоидного артрита у носителей гена HLA-B27, где величина RR достигает 90 (Ю.М. Зарецкая [54], В.Н. Шабалин, Л.Д. Серова [128]). Таким образом, выявленные нами коррелятивные связи можно квалифицировать как слабые ассоциативные. Вместе с тем они являются статистически значимыми и могут служить основанием для разработки профи­лактических мероприятий.

Н.Д. Герасимова [29] отметила интересную особенность онкологических больных. Способность вырабатывать антиэритроцитарные антитела у них ока­залась наиболее низкой (индекс аллоиммунизации 0,15 %) из всех категорий об­следованных, включая здоровых лиц - доноров крови.

Van der Schroeff и соавт. [676] выявили генетическую связь между вариа­бельной эритродермией (заболеванием, имеющим аутосомно-доминантный ха­рактер наследования) и локусом RH. Наследственная передача этого заболева­ния у большой группы детей была связана с генным комплексом cde. Среди 27 обследованных детей только у одного ребенка c^fe-комплекс и эритродермия на­следовались раздельно.

Категория: Система RH

Химеры вследствие диспермии*

Эритроцитарный химеризм у детей из разнополых близнецовых пар (табл. 4.36) сопровождался присутствием в некоторой части лимфоцитов одно­временно обеих гетерохромосом - X и Y. Подобную картину наблюдали при хи­мерах, вызванных диспермией (табл. 4.37).

При диспермии наблюдают химеризм почти во всех тканях, включая поло­вые железы. У таких лиц часто регистрируется гермафродитизм.

Van Dijk и соавт. [677] полагают, что эритроцитарный химеризм у человека яв­ление не столь редкое, как это было принято считать. Химеры, при которых соот­ношение разногруппных эритроцитов 15/85-5/95 %, обычные методы серологи­ческого исследования не распознают, в связи с чем существующие данные о ча­стоте кровяного химеризма не совсем точны. Авторы применили для учета хи­мер чувствительный люминесцентный метод, позволяющий распознавать в крови менее 1 % иногруппных эритроцитов. При исследовании этим методом 415 пар близнецов-двоен и 57 пар близнецов-троен частота химер составила 32 (8 %) и 12 (21 %) соответственно, что существенно выше, чем регистрировалось ранее. К этому следует добавить, что химеризм может проявляться в двух формах:

• присутствие в кровяном русле человека 2 популяций эритроцитов, отли­чающихся по групповым антигенам. Такую химеру можно диагности­ровать с помощью серологических методов исследования;
• присутствие в кровяном русле человека 2 популяций эритроцитов, не отличающихся по групповым антигенам, однако принадлежащих гене­тически разным росткам. Такую химеру невозможно зарегистрировать серологическими методами исследования. Она может быть распознана только с помощью молекулярно-генетических методов.

Если исследовать обе указанные формы химеризма не только у близнецов и гематологических больных, но и у доноров, то истинная частота химер, очевид­но, превысит частоту регистрируемую.
* Диспермия - редкое явление, при котором организм развивается из яйцеклетки, опло­дотворенной двумя сперматозоидами, или из двух слившихся оплодотворенных яйце­клеток.

Прогресс в М изучении эритроцитарного химеризма достигнут благо­даря трансплантации аллогенного костного мозга (Л.С. Любимова [76], Л.П. Порешина и др. [88, 89], Е.А. Зотиков и др. [58], Ren и соавт. [560]). В ли­тературе обсуждаются 2 типа трансплантационных химер. Первый тип - пол­ные химеры - полная замена эритроцитов реципиента на эритроциты донора. В буквальном смысле полная замена это уже не химера, поскольку присутству­ет только одна популяция эритроцитов донорского фенотипа. Второй тип - сме­шанные, или истинные, химеры - частичная замена эритроцитов реципиента на эритроциты донора.

Оригинальная классификация трансплантационных химер предложе­на Л.П. Порешинной и соавт. [88, 89]. Авторы отметили вариабельность эри­троцитарного химеризма и выделили несколько типов, подтипов, вариантов и подвариантов химер. Варианты химер по антигенам Rh отражают характер при­живления костного мозга.

Категория: Система RH

Таблица 4.34

Распределение D-антигена у больных анемией*

* По М.А. Умновой, Ю.И. Лорие и Ф.Э. Файнштейну [115].

Категория: Система RH

Мы наблюдали при искусственной иммунизации добровольцев переключе­ние синтеза антител с полных на неполные [121]. У одной из иммунизирован­ных женщин после первого курса иммунизации (6 внутривенных введений по 8-10 мл эритроцитов Rh+) сразу выработались неполные антитела с титром 1 : 8, у другой - полные антитела с титром 1 : 2. После второго курса иммуни­зации (3 инъекции эритроцитов Rh+) титр неполных антител достиг у первой -1: 256, у второй - 1 : 32. Полные антитела отсутствовали.

Учитывая большую роль неполных резус-антител как в клинической, так и в лабораторной практике, в частности в работе по приготовлению тестовых ан-тирезусных сывороток, считаем необходимым более подробно остановиться на описании их серологических свойств.

В первые годы после открытия резус-фактора многие исследователи отме­чали, что при помощи существующего в то время метода солевой агглютина­ции у 40-50 % лиц, сенсибилизация которых позже подтвердилась тяжелы­ми посттрансфузионными осложнениями или смертью плода от эритробласто-за, не удавалось выявить резус-антитела (Diamond и Denton [263]). Это обстоя­тельство ставило под сомнение этиологическую роль резус-фактора в развитии указанных осложнений. Однако в 1944 г. Race [542] показал, что причиной этих осложнений были неполные резус-антитела, качественно иные, чем те, которые выявляют реакцией агглютинации в солевой среде.

В том же году Wiener [705] показал, что если к эритроцитам, нагруженным неполными резус-антителами, добавить агглютинирующие, полные, резус-антитела, то агглютинации эритроцитов не происходит. Фактором, ингибиру-ющим агглютинацию, являлись неполные антитела, которые блокировали по­верхность эритроцитов, делая ее недоступной для агглютинирующих антител. Wiener назвал такие антитела блокирующими, а несколько позднее они получи­ли название ингибирующих (Diamond, Abelson [262]).

Далее Diamond и Abelson [262], Diamond и Denton [263] нашли, что непол­ные антитела не только связываются с эритроцитами, но и могут вызывать их агглютинацию, однако для этого необходимо солевой раствор заменить плазмой или альбумином.

Wiener высказал предположение, что этот феномен обусловлен конглютини-нами плазмы и предложил назвать эту реакцию реакцией конглютинации в от­личие от аггаютинации, наблюдаемой в солевой среде.

Это предположение в некоторой степени подтвердили исследования Cameron и Diamond [192], которые установили, что все известные компоненты плаз­мы (за исключением а-глобулинов) обладают конглютинационными свойства­ми, т. е. в их присутствии неполные антитела проявляют агглютинирующую ак­тивность.

Вскоре было показано, что конглютинационные свойства присущи не только коллоидам плазмы, но и целому ряду природных и синтетических коллоидных растворов: желатину (Fick, Мс Gee [286]), декстрану (Grubb [324]), поливинил-пирролидону (А.Я. Ашкенази [13]), гепарину (Spielmann [624]).

Вопрос о конглютинирующем действии коллоидов и механизме реакции конглютинации различные авторы рассматривают по-разному.

Wiener полагал, что агглютинация эритроцитов неполными антителами воз­можна лишь под воздействием сложного белкового комплекса, содержащегося в плазме и представляющего собой комбинацию альбуминов, глобулинов, фи­бриногена и фосфолипидов. По мнению Wiener, этот третий компонент реак­ции, адсорбируясь на сенсибилизированных неполными антителами эритроци­тах, способствует их агглютинации.

Bocci [175] связывает конглютинационную активность плазмы с содержани­ем в ней Х-протеина. В подтверждение этого автор приводит данные о том, что бедная Х-протеином плацентарная сыворотка в отличие от нормальной донор­ской не обладает конглютинационными свойствами.

Dausset [252] предложил другое объяснение. Согласно его концепции, непол­ные резус-антитела являются не одновалентными, как считают многие авторы, а двухвалентными. Одной из валентностей неполные антитела могут связывать­ся с эритроцитами в солевой среде подобно агглютининам, в то время как дру­гая, «неполная», валентность проявляет свою активность только в растворе кол­лоида.

По мнению Dausset, действие коллоида основано не на создании недостаю­щей неполным антителам валентности, как считал Wiener, а на создании усло­вий, обеспечивающих фиксацию «неполного» конца антитела к соответствую­щему антигену.

С точки зрения Hummel [367], агглютинация эритроцитов неполными ан­тителами в коллоидной среде обусловлена свойством коллоидов нарушать су­спензионную стабильность эритроцитов дегидратацией их водных оболочек. Агглютинация наступает только в том случае, если водные оболочки эритроци­тов (водные перемычки, отделяющие эритроциты друг от друга) полностью де­гидратированы, т. е. переведены в гидрофобное состояние.

Hummel полагал, что неполные резус-антитела в отличие от полных не об­ладают способностью дегидратировать водные оболочки эритроцитов, поэто­му агглютинации не происходит. Добавление какого-либо конглютинирующего коллоида завершает процесс дегидратации эритроцитов и приводит к их агглю­тинации.

Hummel объясняет механизм реакции конглютинации суммарным дегидра-ирующим эффектом неполных антител и коллоида, приводящим эритроциты к потере суспензионной стабильности и последующему склеиванию.

СС. Харамоненко [124] считает, что в основе агглютинации сенсибилизиро­ванных неполными антителами эритроцитов в коллоидной среде лежат 2 взаи­мосвязанных фактора: с одной стороны, дегидратация эритроцитов, с другой -снижение их электрического заряда.

Определенный интерес представляют данные, полученные Punin [539]. Автор установил зависимость конглютинационных свойств коллоидов от их мол. массы и силы электрического заряда. В роли конглютининов, по мнению Punin, могут выступать только высокомолекулярные отрицательно заряжен­ные коллоиды, которые вступают в связь с положительно заряженными группа­ми сенсибилизированных неполными антителами эритроцитов и вызывают их склеивание.

Hirszfeld и Dubiski [350] придерживаются иного мнения. Известно, что эри­троциты в коллоидных средах - декстране, желатине и др. - легче агрегиру­ются, быстрее оседают и их осадок занимает меньший объем по сравнению с осадком в изотоническом растворе натрия хлорида. Это обстоятельство авторы положили в основу своей концепции. Они полагают, что неполные антитела в данном растворе не вызывают агглютинации эритроцитов, поскольку их моле­кулы значительно короче молекул полных антител. Добавление конглютиниру-ющих коллоидов способствует сближению эритроцитов.

Hirszfeld, Dubiski установили также, что агглютинацию эритроцитов непол­ными антителами можно вызвать и в солевой среде ультрацентрифугировани­ем эритроцитов при 12 ООО об/мин. При этом эритроциты приближаются друг к другу на короткое расстояние, достаточное для проявления агглютинирующей способности неполных антител.

Таким образом, авторам удалось экспериментально подтвердить свое пред­положение и доказать, что сближение эритроцитов является основным услови­ем, способствующим их агглютинации неполными антителами. По-видимому, подобное объяснение роли коллоидов в механизме реакции конглютинации наи­более близко к действительности.

Значительным достижением в изучении неполных резус-антител явилось от­крытие ферментных реакций.

В 1946 г. Pickles [525] было обнаружено, что неполные резус-антитела при­обретают способность агглютинировать эритроциты, обработанные фильтратом культуры холерного вибриона.

Через год Morton и Pickles [490] получили аналогичный эффект после обра­ботки эритроцитов раствором трипсина.

С этого времени началось интенсивное изучение протеолитических фермен-ШШ с целью использования в серологических методиках. За короткий срок, с 1946 по 1960 год, различными авторами был предложен целый ряд ферментов животного и растительного происхождения, из которых наиболее широкое при­менение получили трипсин (Morton и Pickles [489]); папаин (Kuhns и Bailoy [401], Berger [164], Stratton [633], Kriipe [400]); бромелин (Pirofsky, Mangum

[529], Dybkjaer [268]); фицин (Unger и Katz [667], Makinodan и Macris [457]) и протелин (RC. Сахаров [95]).

Механизм усиления серологической активности полипептидов Rh под дей­ствием ферментов изучен недостаточно, хотя аминокислотная последователь­ность полипептидов Rh известна.

Dausset [251, 252] полагал, что ферменты вызывают специфическое измене­ние резус-антигена, в силу чего он приобретает способность связываться с «не­полной» валентностью антитела.

Существует и другое мнение: протеолитические ферменты освобождают глубокорасположенные антигенные рецепторы. Об этом свидетельствует тот факт, что обработанные ферментом эритроциты адсорбируют повышенное ко­личество антител (Hubinont [360]). Другим доказательством могут служить ис­следования Е.А. Зотикова, A.M. Уголева [59] и Е.А. Зотикова, P.M. Уринсон [60]. Авторы установили, что обработка эритроцитов растворами трипсина и химо-трипсина приводит к разрушению поверхностно расположенных антигенов.

Hughes-Jones и соавт. [365] при работе с фицином и сыворотками антирезус, меченными радиоактивным йодом, нашли, что этот фермент не открывает но­вых антигенных зон на поверхности эритроцитов, а повышает скорость связы­вания неполных антител с антигеном.

Действие различных протеолитических ферментов на эритроциты неодина­ково, однако можно полагать, что оно направлено главным образом на разру­шение определенных белков мембраны эритроцитов, в том числе адсорбиро­ванных на ней, которые при обычных условиях препятствуют взаимодействию резус-антигена с антителом.