INFIи INJA

В 2006 г. к системе Indian отнесены еще 2 часто встречающихся антигена -INFI и INJA (Daniels и соавт. [17]). Оба антигена идентифицированы Poole и соавт. [49, 50]. Авторы собрали 5 сывороток с высокой частотой реагирования, но отличающиеся специфической направленностью. Сыворотки были получе­ны от беременных женщин: 3 марокканок и 2 пакистанок, и изучались в тече­ние 10 лет. Посредством иммобилизации моноклональных антител удалось по­казать, что антитела всех 5 сывороток реагируют с детерминантами, располо­женными на гликопротеине CD44. Далее Poole и соавт. провели секвенирование гена CD44 указанных женщин. Оказалось, что марокканки гомозиготны по му­тации С 255 G в экзоне 3, пакистанки гомозиготны по мутации С 488 А в экзо-не 5. Первая мутация вызвала аминокислотную замену His 85 Glu, вторая - Tre 163 Arg. Антиген, открываемый сыворотками марокканок, получил обозначение INFI, открываемый сыворотками пакистанок - INJA. После включения в систе­му Indian антигены получили обозначение ISBT - IN3 и IN4 соответственно.

Известно, что одиночные аминокислотные замены в субстрате способны стимулировать синтез специфических антител, распознающих эти участки. В связи с этим не исключено, что замены Glu 85 и Arg 163 могут проявляться фе-нотипически как редко встречающиеся антигены, антитетичные часто встреча­ющимся антигенам INFI и INJA, подобно редкому фактору 1п^а по отношению к часто встречающемуся In^b.

AnWj

Как отмечают Race и Sanger [52], часто встречающийся антиген Anton (An) впервые обнаружили Boorman и Tippett в 1972 г., однако эта находка не была опубликована. Вторую сыворотку со специфичностью анти-Ап нашел в 1980 г. Daniels [14]. Оба образца антител не реагировали с эритроцитами Lu_nuH(Lutheran,.) и эритроцитами новорожденных, на основании чего выявляемый ими антиген сначала был причислен к системе Lutheran и получил обозначение LU15. Однако Poole и Giles [47] показали, что антитела анти-Ап реагируют с эритроцитами Lu_null рецессивного типа и следовательно выявляемый ими анти­ген не может быть производным гена LU.

В 1983 г. Marsh и соавт. [40] нашли аутоантитела, получившие обозначение анти-Wj. Они реагировали с эритроцитами 415 случайно выбранных лиц и тре­мя образцами эритроцитов Lu „ рецессивного типа. С помощью метода адсорбции авторы установили, что эритроциты Lu_null доминантногоэритроциты новорожденных, не реагировавшие в реакции агглютинации с ан­тителами анти-Wj, все же содержат некоторое количество антигена Wj.

В 1985 г. Poole и Giles [46] высказали предположение, что антитела анти-An и анти-Wj идентичны и открывают один и тот же антиген. Вскоре это предполо­жение нашло подтверждение. Mannessier и соавт. [39] наблюдали пациента с бо­лезнью Ходжкина, у которого констатировали временную утрату антигенов Wj и An. Его эритроциты не реагировали с сывороткой анти-Wj и сывороткой анти-Ап. В крови больного присутствовали антитела, идентифицированные как ауто­иммунные анти-Wj. Через 6 мес. на фоне ремиссии антитела исчезли, а больной обрел фенотип An+Wj+. Полученные данные сочли доказательными для заклю­чения о том, что антигены An и Wj идентичны. Новый антиген получил обозна­чение AnWj и был включен в серию 901 «Часто встречающиеся антигены» под номером 901009. Обозначение Ш15 (005015) по отношению к этому антигену больше не используют и из классификации ISBT исключили.

Нулевой фенотип AnWj- обычно приобретенный транзиторный, вместе с тем, как показали Poole и соавт. [48], он может быть генетически детермини­рованным. Так, из 7 детей, родившихся у арабской женщины AnWj-, имевшей анти-AnWj-антитела, 2 были AnWj-. Поскольку другие дети женщины имели фенотип AnWj+, а ее муж приходился ей кровным родственником, возникло предположение, что носителями фенотипа AnWj- могут быть лица, гомозигот­ные по редко встречающемуся рецессивному молчащему гену.

Посемейное исследование показало, что антиген AnWj не связан с локусом LU, так же как и с локусами ABO, MNS, RH, KEL, FY, Ж, XGи ХК.

Среди 2400 американских доноров, эритроциты которых были исследованы сывороткой анти-AnWj, 3 имели фенотип Lu_nu„. Лица AnWj- с нормально выра­женными антигенами Lutheran отсутствовали (Lukasavage [37]), в связи с чем воз­никли сомнения относительно полной независимости антигена AnWj от гена LU.

Следует отметить, что антиген In^b, не входящий в систему Lutheran, и антиген AnWj, не входящий ни в систему Indian, ни в систему Lutheran, одинаково слабо выражены на эритроцитах Lu_null доминантного типа. На таких эритроцитах при­сутствие антигена AnWj удается показать только с помощью адсорбции - элюции (Poole и соавт. [48]). На эритроцитах Lu_nul, рецессивного и Х-ассоциированного типа антиген AnWj выражен нормально (Poole, Giles [47], Norman и соавт. [41]).

Антиген AnWj в противоположность антигенам Indian и Lutheran устойчив к трипсину, химотрипсину и сульфгидрильным реагентам.

Своеобразным является онтогенез антигена AnWj. У новорожденных фено­тип AnWj- меняется на AnWj+ на 3^16 день после рождения, причем преобразова­ние происходит в течение суток (Poole, Van Alphen [51]). Этот феномен пока не име­ет объяснения. Эритроциты поступают в кровоток постепенно. Полагать, что в кро­вяном русле появляется фактор конверсии, одномоментно превращающий эритроци-IpAnWj- в AnWj+, нет оснований. Возможно, растворимая форма вещества AnWj, -'Мздой критической концентрации в плазме крови, адсорбируется на эритроцитах.

Локализация антигенов INи AnWj

Spring и соавт. [57] показали, что антигены системы Indian располагаются на гликопротеине CD44. Иммунопреципитация мембранных белков эритроцитов In(a+b-) и In(a-b+) анти-1п^а- и анти-1п^ь-антителами позволила выделить про­теин с мол. массой 80 кДа. Последний оказался идентичным протеину CD44. Он не преципитировался специфическими антителами, когда эритроциты не со­держали соответствующего антигена. Гликопротеин CD44, выделенный из эри­троцитов человека, взаимодействовал с анти-1п^ь-антителами в иммуноблоттин-ге (Spring и соавт. [57]). Указанные антитела взаимодействовали с CD44 из эри­троцитов и лейкоцитов человека (Nunomura и соавт. [42], Telen, Ferguson [61]). Аналогичные результаты получены при использовании моноклональных анти-СБ44-антител (Rao и соавт. [53], Petty и соавт. [45]). Аминокислотная последо­вательность CD44 расшифрована (рис. 23.1).

Рис. 23.1. Аминокислотная последовательность CD44.

Полагают, что антиген AnWj, так же как антигены Indian, расположен на глико­протеине CD44. На это косвенно указывают данные, полученные Parsons и соавт. [44] при обследовании больной с врожденной дизэритропоэтической анемией. У больной отмечался дефицит CD44 и одновременно отсутствовали антигены AnWj и Indian, что свидетельствует о возможной одинаковой локализации указанных субстратов.

На одинаковое размещение антигенов CD44, In^b и AnWj указывают результа­ты экспериментов с антигенспецифической иммобилизацией эритроцитов анти­телами aHTH-CD44, анти-1п^ь и анти-AnWj (Dalchau и соавт. [13], Rao и соавт. [53]). НИВННШ клетки линии Jurkat, дефицитные по CD44, после трансфек-ции НИ CD44 начинали реагировать с анти- AnWj -антителами.

Антитела Indian

Антитела анти-1п^а и анти-1п^ь не обладают способностью связывать ком­племент (Reid, Lomas-Francis [54]), лучше выявляются в непрямой анти-ННВИ пробе (Giles [24], Longster, Robinson [35], Bhatia и соавт. [8]). ИННИ вызывали прямую агглютинацию эритроцитов донора и выявлялись при проведении пробы на индивидуальную совместимость перед гемотрансфузией.

Аллоиммунизация антигенами Indian развивается достаточно быстро, по­скольку они обладают относительно высокой иммуногенностью.

По данным Bhatia и соавт. [8], у 30 из 39 добровольцев D-In(a-), искус­ственно иммунизацированных эритроцитами D+In(a+) с целью получения сы­рья для производства иммуноглобулина резус, помимо анти-О-антител, вырабо­тались анти-1п^а-антитела.

Joshi и соавт. [31] наблюдали реципиента, у которого анти-1п^а-антитела обра­зовались после переливания одной дозы эритроцитов 1п(а+).

Ferguson и Gaal [21] описали анти-1п^ь-антитела у первобеременной, не имев­шей гемотрансфузий.

Изучение выживаемости эритроцитов 1п(а+) в кровяном русле сенсибилизи­рованных лиц показало, что анти-1п^а-антитела быстро разрушают иногруппные эритроциты. Последние исчезали из кровотока реципиента по истечении 20 мин с момента введения (Bhatia и соавт. [8]).

Быструю убыль 1п^ь-положительных эритроцитов наблюдали Ferguson и Gaal [21] у больного, сенсибилизированного указанным антигеном.

Описан случай немедленной гемолитической реакции, обусловленной анти-1п^ь-антителами, после переливания 50 мл несовместимой крови (Joshi [29]).

При очевидной трансфузионной значимости антитела Indian не проявляли себя в качестве причины ГБН. Прямой антиглобулиновый тест с эритроцита­ми новорожденных лишь иногда был положительным, однако клинических про­явлений ГБН не наблюдалось (Garner, Devenish [23], Reid, Lomas-Francis [54], Sosler и соавт. [56]).

Получены моноклональные анти-СБ44-антитела (Stoll и соавт. [58], Blancher и соавт. [9]) и анти-1п^ь (Stoll и соавт. [58]).

Анти-AnWj

Антитела анти-AnWj могут быть как аутоиммунными, так и аллоиммун-ными. Описаны две женщины AnWj- с наличием аллоиммунных анти-AnWj-антител. Обе имели беременности. В сыворотке крови их брата, также AnWj-, указанные антитела отсутствовали.

Poole et al [48] выразили сомнение относительно того, что образование анти-AnWj-антител может быть инициировано ничтожно малыми количествами ан­тигена, имеющимися на эритроцитах плода.

Антитела анти-AnWj вызывали гемолитические посттрансфузионные реак­ции (Magrin и соавт. [38], De Man и соавт. [19]), но ни разу не были описаны как причина ГБН.

Считается, что наилучшей трансфузионной средой для реципиентов, имею­щих анти-AnWj-антитела, являются эритроциты доноров Lu_null. Политический потенциал анти-АпМ^-антител характеризует приживаемость (продолжительность циркуляции) эритроцитов invivo(De Man и соавт. [19], Davis и соавт. [18], Harrison и соавт. [28]).

Функции CD44

Гликопротеин CD44 широко представлен в организме человека и лишь не­многие клетки его не содержат. Он имеется на эритроцитах, Т- и В-лимфоцитах, гранулоцитах, моноцитах (Spring и соавт. [57], Telen и соавт. [65, 66], Dalchau и соавт. [13]). CD44 присутствует в клетках тимуса, печени, легких, кожи, молоч­ной железы, мышцах, а также в эпителии желудка, тонкой кишки и желчного пузыря (Anstee и соавт. [1], Flanagan и соавт. [22]).

Лиганд CD44 выполняет многочисленные биологические функции: участвует в адгезии стромальных, эпителиальных и эндотелиальных клеток, взаимодействии Т-и В-лимфоцитов в процессе иммунного ответа, фиксации лимфоцитов в очаге вос­паления. Лиганду CD44 приписывается участие в формировании матрикса зажи­вающей раны, альтернативном сплайсинге, а также в метастазировании опухолей (Bajorath [5], Borland и соавт. [10]). Многие из перечисленных взаимодействий про­исходят при участии гиалуроновой кислоты, которая, являясь высокомолекулярным гликозаминогликаном, входит в состав межклеточного вещества, а также структуру мембраны клеток. CD44 взаимодействует с коллагеном, фибронектином и ламини-ном, участвует в адгезии стромальных эритроидных предшественников в процессе образования колоний (Chan, Watt [11], Ostendorp и соавт. [43]).