Th-активация

Th-полиагглютинабельность, изученная Bird и соавт. [23] в 1978 г., отлича­лась от Т-полиагглютинабельности реакцией эритроцитов с лектинами и, как позднее было показано, представляла собой начальную форму Т-активации.

Th-активация эритроцитов инициировалась сиалидазой бактерий Corynebacteriumaquaticum(Sondag-Thull и соавт. [94]). Сиалидаза Vibriochol-eraeв условиях мягкого гидролиза также вызывала Th-активацию invitro. Высвобождение сиаловых кислот в количестве менее 20 мкг на 10¹⁰ эритроци­тов вызывало Th-активацию. Применение более высокой концентрации сиали-даз приводило к Т-активации (Sondag-Thull и соавт. [94]). Возможно, в резуль­тате Th-активации происходит отщепление одного остатка сиаловой кислоты от тетрасахарида, экспрессирующего терминальную галактозу, но не от дисахари-Да Galpl ж 3GalNAc, характерного для Т-активации.

Эритроциты 22 из 200 новорожденных обладали признаками Th-активации без *1Шшагтаотинабельности, у матерей 6 из них также наблюдалась Th-активация (Wahl и соавт. [102]). Больной перитонитом, развившимся в результате перфорации стенки толстой кишки опухолью, умер в результате выраженного внутрисосуцистого гемо лиза, который мог быть обусловлен Th-активацией эритроцитов (Levene и соавт. [681) Не исключено, что персистирующая форма Th-активации клеток крови явля ется результатом незавершенного биосинтеза. Th-активация при отсутствии ин­фекции выявлена у 5 из 7 детей, больных гипопластической анемией (Herman и соавт. [50]), а также у больного миелодисплазией (Janvier и соавт. [57]).

Тк-активация

Криптантиген Тк появляется после обработки эритроцитов папаином. Тк-активация не сопровождается вымыванием из эритроцита сиаловой кисло­ты (Bird, Wingham [21]) и отличается от Т-активации характером реагирования активированных эритроцитов с лектином GSII из семян Griffoniasimplicifolia. Последний реагирует только с Tk-активированными клетками и считается Тк-специфическим (Judd и соавт. [61]).

Лектин Viciahyrcanicaсодержит разделяемые Т- и Tk-специфические фрак­ции, реагирующие с Т- и Tk-антигенами соответственно (Liew, Bird [69]).

Путем иммунизации мышей эритроцитами, модифицированными эндо-р-галактозилазой, были получены моноклональные антитела анти-Tk (Meichenin и соавт. [72]).

Тк-полиагглютинабельность отмечается при инфекции, вызываемой Bacteroudesfragilis(Inglis и соавт. [54]). В качестве других инфекционных аген­тов, способных вызвать Tk-полиагглютинабельность, отмечены Serraciamarc-escens, Candidaalbicans, Aspergillusniger(Judd и соавт. [58, 59]). Эндо- и экзо-Р-гликозилазы, вырабатываемые этими микроорганизмами, расщепляют оли-госахариды в положении Galpl —> 4GlcNAc. Эти олигосахариды обусловлива­ют АВН- и Ii-активность и содержат терминальные N-ацетилгалактозаминовые остатки, являющиеся Tk-рецепторами (Doinel и соавт. [38, 39], Judd [60]).

Таблица 33.2 Биохимическая природа полиагглютинабельности

Антиген Sd(a++) (Cad)

Антиген Sd^a встречается с частотой около 91 % и обладает выраженной ва­риабельностью экспрессии. Чрезвычайно редко встречается его высокоагглю-тинабельная форма, обозначенная как Sd(a++) или Cad. Иммунодоминантной группировкой антигена Sd^a является N-ацетил-О-галактозамин, связанный с га­лактозой через р-связь. Эритроциты фенотипа Sd(a++) агглютинируются лек-тинами Dolichosbiflorisи Helixpomatia, однако их можно различить от Тп-активированных клеток с помощью лектинов Salviasclareaи Leonuruscardiaca.

Дисэритропоэтическая анемия типа II (HEMPAS)

Эритроциты больных с редкой патологией - дисэритропоэтической анемией типа II, обусловленной гомозиготностью по редкому рецессивному гену, агглю­тинируются при 20 °С или подвергаются лизису при 37 °С в присутствии специ­фических антител класса IgM, связывающих комплемент. Такие антитела присут­ствуют в сыворотках крови примерно одной трети здоровых лиц (Crookston и со-авт. [32, 33]). Эритроциты больных несут ослабленный антиген Н, в то время как экспрессия i повышена (Bird, Wingham [19], Crookston и соавт. [32, 33], Rochant, Gerbal [85]). В литературе описано более 250 случаев указанной патологии, боль­шинство больных - выходцы из Южной Италии (Wickramasinghe [103]).

Биохимические дефекты эритроцитов больных с HEMPAS (врож­денная дизэритропоэтическая анемия тип II) обусловлены дефицитом N-ацетилглюкозаминтрансферазы II или а-маннозидазы П. Дефицит этих фер­ментов обусловливает необычное разветвление N-гликанов гликопротеинов, осо­бенно на протеинах полос 3 и 4.5 (транспортер глюкозы), содержащих повторяю­щиеся ацетиллактозаминовые группировки (Fukuda и соавт. [43,44]). В свою оче­редь это приводит к появлению криптантигена, полиагглютинабельности эритро­цитов и активации системы комплемента. При этом в избыточном количестве экс-прессируются N-ацетиллактозаминилцерамиды, обладающие i-антигенной актив­ностью. Возможной причиной является дефект регуляторных генов, ответствен­ных за транскрипцию. При обследовании итальянских семей был картирован па­тологический ген CDAN2, расположенный на хромосоме 20 в позиции 20qll.2 (Gasparini и соавт. [45]). У больных из других этнических групп (ирландцы, ан­гличане) выявлена другая мутация в участке сплайсинга, приводившая к наруше­нию транскрипции гена МП (Fukuda [42], Wickramasinghe [103]).

Полиагглютинабельность NOR

Полиагглютинабельность NOR обнаружена в 2 семьях. Ген, ответственный за появление этого феномена имел доминантный тип наследования (Harris и соавт. [49], Kusnierz-Alejska и соавт. [66]). Всего было выявлено 9 индивидов в 2 поколениях, их эритроциты агглютинировались IgM-антителами 70-75.

Тп-активация

Известен вариант Тп-полиагтлютинабельности, при которой наблюдается смешанная агглютинация эритроцитов. Полиагглютинабельность, таким обра­зом, распространяется лишь на часть клеток (Daussett и соавт. [36] Moreau и со­авт. [75]). От 30 до 90 % клеток агглютинируются антителами анти-Tn, осталь­ные имеют фенотип Tn(-) (Levene и соавт. [67]). Эпитопы Тп, подобно Т, распо­ложены на О-связанных олигосахаридах гликофоринов А и В (Dahr и соавт. [35]). Антигенная детерминанта Тп представляет собой /У-ацетилгазактозаминовый остаток, присоединенный к серину или треонину (Dahr и соавт. [34, 35], Sturgeon и соавт. [97]). Иногда он связан с сиаловыми кислотами и образует антигенную детерминанту сиалил-Тп (Kjeldsen и соавт. [64]).

Антигенная детерминанта Тп иногда экспрессируется в связи с дефектом био­синтеза олигосахаридов. Причина этого - соматическая мутация, но не воздей­ствие микробных протеаз (Bird и соавт. [14, 24]). Лиганд Тп является биосинтети­ческим предшественником Т - типичного сиалотетрасахарида, свойственного эри-троцитарным сиалогликопротеинам. На эритроцитах, обладающих свойствами Тп-полиагглютинабельности, трансформации детерминанты Тп в Т не происходит из-за дефицита фермента Т-трансферазы - р-З-Б-гапактозилтрансферазы (Berger и соавт. [6], Cartron и соавт. [29]). Недостаточное содержание указанного энзима обу­словлено соматической мутацией полипотентных стволовых кроветворных клеток и клональной пролиферацией Тп-активированных эритроцитов, тромбоцитов, гра-нулоцитов и лимфоцитов (Brouet и соавт. [28], Cartron, Nurden [30], Vainchenker и соавт. [100]). Тп-активированные эритроциты не являются полностью дефектными по содержанию Т-трансферазы, некоторое количество нормальных тетрасахаридов на таких клетках несут молекулы гликофоринов (Blumenfeld и соавт. [27]).

Тп-активированные эритроциты несут ослабленные антигены М и N, на них снижена экспрессия криптантигена Т (Bird и соавт. [20], Sturgeon и соавт. [97, 98]). Обработка эритроцитов папаином приводит к разрушению антигена Тп (Gunson и соавт. [48], Mylleyla и соавт. [76]).

Иммунодоминантной группировкой антигена Тп является iV-ацетилгалактозамин, поэтому Тп-активированные эритроциты агглютинируются лектинами, распозна­ющими антиген А, такими как Dolichosbiflorisи Helixpomatia(Bird и соавт. [14], Gunson и соавт. [48], Mylleyla и соавт. [76]). Лектин Salviasclareaболее специфи­чен по отношению к антигену Тп (Bird, Wingham [17]). Эритроциты, несущие анти­ген Тп, интенсивнее аплютинируются сыворотками, содержащими антитела анти-А (Mylleyla и соавт. [76]). Получено большое количество мышиных МКА со специ­фичностью анти-Tn (Metcalfe и соавт. [73], Longenecker и соавт. [71], Kjeldsen и со­авт. [64], Hironashi и соавт. [51], Roxby и соавт. [87], Springer и соавт. [96], Takahashi и соавт [99], Numata и соавт. [78], Bigbee и соавт. [7], King и соавт. [63], O'Boyle и соавт. [79]). Некоторые из них перекрестно реагировали с сиалил-Тп-детерминантой (O'Boyle и соавт. [79]). Все указанные моноклональные реагенты, подобно аллоген-ным анти-Tn, присутствующим у большинства взрослых, реагировали только с Тп-положительной популяцией эритроцитов и, таким образом, демонстрировали карти­ну смешанной агглютинации.

Tn-полиагглютинабельность часто ассоциирована с гемолитической анеми­ей, лейкопенией и тромбоцитопенией (Beck [3], Mollison и соавт. [74]).

Иногда Tn-полиагглютинабельность выявляли у здоровых доноров крови (Beck [3], Mylleyla и соавт. [76], Bird и соавт.. [25]).

Tn-полиагглютинабельность чаще временная, однако известны варианты, имеющие персистирующий характер, и переходящие из одного типа полиагглю-тинабельности в другой (Bird и соавт. [24]).

Имеются три сообщения о транзиторной форме Тп-полиагглютинабельности у маленьких детей. Эта форма, вероятно, обусловлена задержкой формирования полноценной Т-трансферазы (Wilson и соавт. [104], Schultz и соавт. [89], Rose и эййавт. [86]).

Bg^a, Bg^b и Bg^c

Эритроциты человека содержат некоторое количество HLA-антигенов, прису­щих лимфоцитам периферической крови и другим ядерным клеткам организма.

Этот факт впервые был установлен в середине 1960-х годов, когда было по­казано, что эритроцитарные антигены Bg^a, Bg^b и Bg^c тесно связаны с антигена­ми системы HLA (Buchanan и соавт. [13], Chown и соавт. [15], Morton и соавт. 29, 30], Seaman и соавт. [46]). Наличие на эритроцитах антигена Bg^a неизмен­но сочеталось с присутствием на лимфоцитах этого человека антигена HLA-B7 (Morton и соавт. [29]), присутствие на эритроцитах антигена Bg^b сопровожда­лось одновременным присутствием на лимфоцитах антигена HLA-B17, антиген Bg^c выявлялся на эритроцитах в тех случаях, когда на лимфоцитах присутство­вал антиген HLA-A28 (Morton и соавт. [30]).

Nordhagen и Orjasaeter [37, 40] нашли, что эритроциты Bg(c+) реагируют с антителами анти-НЬА-А28 и анти-НЬА-А2, обладающими перекрестной реак­тивностью.

На эритроцитах нередко достаточно сильно выражены антигены HLA-A10 и HLA-B8 (Morton и соавт. [30], Nordhagen [35]), выявляются также антигены HLA-A9, HLA-B12 и HLA-B15 (Nordhagen [34]).

В то же время эритроциты многих лиц не содержат HLA-антигенов, хотя на лимфоцитах эти антигены отчетливо выявляются (Issitt, Anstee [25], Reid, Lomas-Francis [42]).

По данным Crawford [16], Daniels [19,20] и Nordhagen [35], экспрессия HLA-антигенов у разных индивидов варьирует в широких пределах. У некоторых лиц она неодинакова в разные периоды года.

Степень экспрессии HLA-антигенов на эритроцитах не является строго на­следуемой в отличие от специфичности. HLA-антигены, выявляемые на эритро­цитах детей, могут отсутствовать на эритроцитах их родителей (Morton и соавт. [29], Nordhagen [36], Seaman и соавт. [46], Van Der Hart [49]).

hdC помощью высокочувствительнного микроколоночного теста, радиоиммун­ного метода и проточной цитофлюориметрии показано, что эритроциты при­мерно 50 % доноров связывают aHTH-HLA-антитела (Crawford и соавт. [17, 18], Rivera, Scornik [43]). Все исследованные сыворотки affra-HLA-B7 реагировали с эритроцитами лиц HLA-B7+ (Nordhagen [33]).

По данным Botto и соавт. [11], на эритроцитах расположено от 40 до 550 ан­тигенных участков HLA, на тимоцитах - около 100 тыс. Это объясняет, поче­му так сложно адсорбировать HLA-антитела эритроцитами, в то время как ак­тивность HLA-антител легко устраняется посредством адсорбции лейкоцитами (Morton и соавт. [29, 30], Nordhagen [32, 33]).

У лиц HLA-B7+ на эритроцитах содержится существенно больше антиген­ных детерминант HLA класса I по сравнению с индивидами HLA-B7- (Botto и соавт. [И], Salama и соавт. [45]). Усиление HLA-экспрессии на эритроцитах от­мечено у больных системной красной волчанкой, инфекционным мононуклео-зом, ревматоидным артритом, некоторыми гематологическими заболеваниями (Botto и соавт. [И], Giles и соавт. [23], Morton и соавт. [28, 31]). Сильно выра­женная экспрессия антигенов HLA на эритроцитах встречается редко, однако такие случаи в литературе описаны (Van Der Hart и соавт. [49], Nordhagen [38]).

HLA-антигены, присутствующие на эритроцитах, идентичны таковым на всех ядросодержащих клетках (Giles и соавт. [21]). Они представлены гетеро-димерами полипептидных цепей а,, а, и а₃ с мол. массой 45 кДа, связанными с р₂-микроглобулином - пептидом величиной 10 кДа. Специфические HLA-субстанции, циркулирующие в плазме крови, имеют мол. массу 39 кДа и отли­чаются от HLA-субстанций, располагающихся на эритроцитах, отсутствием ги­дрофобного участка (Giles и соавт. [22], Krangel [26], Nordhagen [35]).

Антигенные эпитопы HLA контролируются генным локусом HLA, располо­женным на коротком плече хромосомы 6, Р₂-микроглобулин контролируется ге­ном, находящимся на хромосоме 15 (Roitt [44]).

Анти-НЬА-антитела, реагирующие с эритроцитами, могут быть ингиби-рованы специфическими водорастворимыми HLA-субстанциями, содержа­щимися в плазме лиц, имеющих соответствующие антигены на лимфоцитах (Р.А. Голубенко [1-4], А.А. Рагимов [7], Nordhagen [35], Swanson [47]). Данный факт позволил Swanson и Sastamoinen [48] высказать предположение, что анти­гены HLA, выявляемые на эритроцитах, по своему происхождению не являются эритроцитарными, а адсорбируются на эритроциты из плазмы.

Существует и другая точка зрения, согласно которой эритроциты могут не­сти остатки антигенов HLA, которые синтезируются в ранних ядросодержащих предшественниках эритроцитов. При определенных условиях возможна их не­полная утрата зрелыми клетками (Brown и соавт. [12], Harris, Zervas [24]).

Giles и соавт. [22] показали, что обработка эритроцитов хлорохином* при­водит к разрушению р₂-микроглобулина и утрате HLA-антигенной активно­сти. Цепи а , а и а при этом также подвергаются конформационным измене­ниям. После контакта с очищенным р₂-микроглобулином эритроциты, обрабо­танные хлорохином и утратившие HLA-антигены, восстанавливали свою HLA-антигенную активность.

Препарат из группы производных 4-аминохинолина, тормозит синтез нукле-иновых теШшштиак, оказывает умеренно выраженное иммуносупрессивное действие.