М.А. Умнова и др. [2, 7, 8] отметили особенности посттрансфузионных осложнений, вызванных антителами анти-Fy³, в частности низкая активность антител не соответствовала тяжести клинического течения посттрансфузион­ных реакций. Авторы полагают, что в первые дни после трансфузии крови, не совместимой по антигену Fy³, происходит адсорбция антител на перелитых эри­троцитах, в связи с чем титр антител крайне низок или их не обнаруживают во­все. Эти авторы наблюдали появление сопутствующих антител анти-Fy³ у боль­ных с гемотрансфузионными осложнениями по антигену D. На 14-21-й день после D-несовместимой гемотрансфузии в сыворотках крови некоторых реци­пиентов, помимо высокоактивных антител анти-D и анти-С, появлялись анти-Ру³-антитела, реагирующие в непрямой антиглобулиновой пробе в разведении 1 : 4 ± 1 : 8. У одной больной с гемотрансфузионным осложнением по антиге­ну Fy³ обнаружены необычные агглютинины, активные при температуре 22 °С [8]. Авторы рекомендовали воздерживаться от переливания эритроцитов в пер­вые дни после трансфузионного осложнения, поскольку риск образования со­путствующих антител в этот период высок.

Гемолитическая посттрансфузионная реакция, обусловленная анти-Fy ^а-антителами, описана В.А. Мороковым [5] у онкологической больной, полу­чившей несколько переливаний эритроцитов в связи с анемией. У больной от­мечали внесосудистый гемолиз и гипербилирубинемию. Больная имела фено­тип B(III)CCDeekkFy(a-). В первые дни после несовместимой трансфузии титр анти-Ру³-антител был 1 : 2 ± 1 : 4. Через 10 дней после трансфузии антитела реа­гировали в разведении 1 :128 и проявляли феномен зоны. Подбор совместимых доноров для указанной больной представлял определенные трудности из-за вы­сокой частоты антигена Fy³ (до 90 %) среди жителей Республики Коми [4, 5].

Mollison и Cutbush [112] отметили, что эритроциты Fy(a+) с радиоактивной меткой, введенные внутривенно лицам, содержащим анти-Ру^а-антитела, исчеза­ли из кровотока в течение 10 мин.

Gover и Morton [56] наблюдали гемолитическую реакцию у реципиента Fy(a+b+), которому перелили донорскую плазму, содержащую антитела анти-Fy³.

Гемолитическая болезнь у новорожденных Fy(a+b+), родившихся от сен­сибилизированных женщин, чаще протекала легко, хотя имеются описа­ния тяжелых случаев ГБН, обусловленных антителами анти-Fy³ (Baker и со­авт. [15], Goodrick и соавт. [55], Greenwalt и соавт. [57], Shah, Gilja [147], Weistein, Tayler [175]). По наблюдениям Goodrick и соавт. [55], у 3 из 69 жен­щин с наличием антител анти-Fy³ родились дети, страдавшие тяжелой ане­мической формой ГБН, двоим новорожденным потребовалось обменное пе­реливание крови.

Несмотря на то что гибридомные технологии моноклональных антиэри-троцитарных антител были разработаны еще в 1975 г. j гибридомы, синтези­рующие антитела анти-Fy³, удалось получить лишь в 1999 г. Мышиные МКА анти-Fy³ были получены Halverson и соавт. [64] культивированием лимфоцитов трансгенных мышей, которым предварительно был введен ген Fy^b. Далее жи­вотных иммунизировали клетками эмбриональной линии почечных клеток че­ловека, экспрессирующей антиген Fy³.

По расчетам Marsh [101], антитела анти-Fy^b встречаются в 20 раз реже, чем антитела анти-Fy³. Их, как правило, обнаруживают одновременно с другими ан­тителами, появившимися вследствие беременностей (Hon и соавт. [73], Vetter, Wegner [169]) и гемотрансфузии (Giblett и соавт. [54], Levine и соавт. [90]).

Contreras и соавт. [38] описали случай появления указанных антител у жен­щины после внутриматочного переливания крови.

Антитела aHTH-Fy^b естественного происхождения выявляли у лиц, не имев­ших беременностей и гемотрансфузии (Issitt, Anstee [76], Michalewski [105]). Некоторые образцы антител aHra-Fy^b обладали комплементсвязывающей актив­ностью (Marsh [101]), они описаны в качестве причины тяжелых гемолитиче­ских трансфузионных реакций, в том числе с летальным исходом (Badakere и соавт. [14], Boyland и соавт. [22]).

Kim и соавт. [84] описали 1 случай отсроченной посттрансфузионной реак­ции, обусловленной анти-Ру^ь-антителами, a Carreras Vescio и соавт. [24] - 1 слу­чай ГБН, купированный двумя заменными гемотрансфузиями.

Dickstein и соавт. [48], Harris [66], van't Veer и соавт. [167] сообщили о 4 слу­чаях выявления у лиц Fy(a+b-) аутоантител, напоминавших анти-Fy^ь, кото­рые реагировали с эритроцитами Fy(a-b+), Fy(a+b+) и слабо с эритроцитами Fy(a+b-). С эритроцитами Fy(a-b-) реакция была отрицательной. В одном слу­чае указанные аутоантитела вызвали гемолитическую анемию [167].

Colligan и соавт. [37] получили моноклональные антитела анти-Fy^ь, иммуни­зируя мышей синтетическими пептидами.

Действие ферментов

Антигены Fy^a и Fy^b разрушаются большинством протеолитических фермен­тов: папаином, фицином, бромелином, проназой и химотрипсином. Трипсин не влияет на указанные антигены (Judson, Anstee [83], Miller и соавт. [ПО], Morton [116]). Обработка эритроцитов сиалидазой также не сказывается на факторах Fy^a и Fy^b. Ранние сообщения о влиянии трипсина на антигены системы Duffy были обусловлены, как полагают Daniels [43] и Issitt, Anstee [76], искажением результатов из-за примеси химотрипсина.

Хранение нативных эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия при 12 °С в течение 2 недель приводит к частичой утрате антигенной активно­сти факторов Fy^a, Fy^b, Fy3 и других Fy-субстанций, специфически ингибирую-щих соответствующие антитела (Williams и соавт. [179]).

Антигены Fy^a и Fy^b

Как уже указывалось выше, антитела анти-Fy³ были впервые обнаружены Cutbush и соавт. [40,41] в 1950 г. у больного гемофилией, получившего большое количество гемотрансфузии. Вновь открытый антиген был обозначен последни­ми буквами фамилии больного, мистера Duffy, поскольку к тому времени буквы Du уже обозначали слабый антиген D^u системы резус.

Через год, в 1951 г., Ikin и соавт. [73] описали антитела, открывавшие антите­тичный антиген Fy^b.

Race и соавт. [137] отметили, что некоторые образцы антител анти-Fy³, осо­бенно агглютинины, проявляли отчетливый эффект дозы. Буквами Fy^x Chown и соавт. [35] обозначили ген, кодирующий слабый вариант антигена Fy^b.

Частота антигенов Fy^a и Fy^b среди представителей разных рас и этнических групп неодинакова (табл. 10.2).

Таблица 10.2

Распределение фенотипов и генотипов Duffy у представителей разных рас*

* по Mourant и соавт. [118].

Chown и соавт. [35], Lewis и соавт. 92] обследовали 2182 канадца с помощью сыворотки aHTH-Fy^b₅ выявляющей сильный и слабый варианты указанного ан­тигена. Авторы установили, что частота генов Fy^a, Fy^b и F^x составляет 0,425, 0,557 и 0,016, а частота фенотипов Fy(a+b~), Fy(a+b+) и Fy(a-b+^w) - 0,1823, 0,4735 и 0,004 соответственно. Лиц Fy(a-b-) среди канадцев не обнаружено.

Среди жителей Северной Европы чаще встречался ген Fy^b, чем Fy^a. Среди жителей Дальнего Востока, наоборот, аллель Fy^b выявляли реже, чем Fy^a (Lewis и соавт. [91], Mourant и соавт. [118], Shimizu и соавт. [148]).

Частота генов Fy^anFy^by негроидов оказалась более низкой по сравнению с ев­ропеоидами (табл. 10.2). Среди монголоидов частота антигена Fy^a превышает 96 %.

В табл. 10.3 приведены данные генотипирования европеоидов и негроидов, полученные Olsson и соавт. [127] с помощью ПЦР.

Частота фенотипов и генотипов Duffy у негров Южной Африки и шведов

Гены Fy^a и Fy^h наследуются кодоминантно. При обследовании членов 1091 семьи с помощью сывороток aHra-Fy^a и aHTH-Fy^b ожидаемая и фактическая ча­стота фенотипов Dufly совпала (Chown и соавт. [35], Lewis и соавт. [92]).

Среди 1445 обследованных жителей Москвы 1077 (74,84 %) были Ру^а-положительными, 368 (25,16 %) - Ру^а-отрицательными (Т.М. Пискунова [6]).

Фенотип Fy^x проявляет себя наличием необычного антигена Fy^b, который реа­гирует не со всеми образцами сывороток aHTH-Fy^b. Специфических антител анти-Fy^x не найдено. Это свидетельствует в пользу того, что антиген Fy^x как самосто­ятельная единица не существует. Тем не менее признак Fy* наследуется кодоми­нантно, так же как Fy^a nFy^b (Chown и соавт. [34, 35], Lewis и соавт. [92]).

Некоторые образцы сывороток анти-Fy³ реагируют слабо с эритроцитами Fy^aFy^x (Chown и соавт. [35], Lewis и соавт. [92]). По адсорбции - элюции высо­коактивных анти-Ру^ь-антител можно отличить лиц, имеющих генотип Fy^b/Fy^bот лиц, имеющих генотип Fy^b/Fy*, однако более четкие результаты получают при использовании ПЦР (Murphy и соавт. [121]).

Фенотип Fy^x [Fy(a+b^w)] описывали главным образом у лиц белой расы, среди которых он встречается не столь редко. Среди 1108 обследованных 11 человек были Fy(a+b^w), 1 Fy(a~b+^W); частота гена Fy^x составила 0,015 (Lewis и соавт. [92]).

Фенотип Fy* описан у индейцев Канады (Buchanan и соавт. [23]). Сообщалось о нескольких лицах, которые были гомозиготны по гену Fy*. Фенотип двоих при первичном тестировании был определен как Fy(a-b-) (Cedergren, Giles [25], Cook и соавт. [39], Habibi и соавт. [58], Lewis и соавт. [92], Parasol и соавт. [131]).

Помимо супрессии антигена Fy^by гомозигот Fy*/Fy* заметно снижена вы­раженность других часто встречающихся антигенов Duffy: Fy3, Fy5 и Fy6 (Buchanan и соавт. [23], Habibi et al [58, 59], Mallinson и соавт. [99], Marsh [101], Olsson и соавт. [128], Tournamille и соавт. [162], Yazdanbakhsh и соавт. [183]). Подсчет антигенных участков Fy6 с помощью проточной цитофлюориметрии показал, что их количество на эритроцитах Fy(a-b+) составляет 2200-2400, на эритроцитах Fy^x - от 150 до 250 (Tournamille и соавт. [162]). низкий уровень связывания антител анти-Руб, обусловленный геном Fy*, наблюдали Tournamille и соавт. [162], Yazdanbakhsh и соавт. [183], используя метод иммуноблоттинга. Авторы полагают, что в присутствии гена Fy* имеет место угнетение синтеза ликопротеина Fy, но не конформация его молекулярной структуры с образова­нием новой специфичности.

Гены Fy^a₉ Fy^b и Fy* имеют одинаковые кодирующие последовательности за исключением одной нуклеотидной замены (С 265 Т), приводящей к заме­щению Arg 89 Cys (Gassner и соавт. [53], Li и соавт. [93], Olsson и соавт. [128], Tournamille и соавт. [162]) (табл. 10.4). Указанная замена затрагивает первую экстрацеллюлярную петлю гликопротеина Fy (рис. 10.1).

Трехмерная модель Fy-гликопротеина по Mallinson и соавт. [99]. Экстрацеллюлярный домен со­держит 3 участка N-гликозилирования. Черными круж­ками отмечены 5 цистеиновых остатков.