Напишите нам

Поиск по сайту

Наш блог

Как я заболел во время локдауна?

Это странная ситуация: вы соблюдали все меры предосторожности COVID-19 (вы почти все время дома), но, тем не менее, вы каким-то образом простудились. Вы можете задаться...

5 причин обратить внимание на средиземноморскую диету

Как диетолог, я вижу, что многие причудливые диеты приходят в нашу жизнь и быстро исчезают из нее. Многие из них это скорее наказание, чем способ питаться правильно и влиять на...

7 Фактов об овсе, которые могут вас удивить

Овес-это натуральное цельное зерно, богатое своего рода растворимой клетчаткой, которая может помочь вывести “плохой” низкий уровень холестерина ЛПНП из вашего организма....

В какое время дня лучше всего принимать витамины?

Если вы принимаете витаминные и минеральные добавки в надежде укрепить свое здоровье, вы можете задаться вопросом: “Есть ли лучшее время дня для приема витаминов?”

Ключ к счастливому партнерству

Ты хочешь жить долго и счастливо. Возможно, ты мечтал об этом с детства. Хотя никакие реальные отношения не могут сравниться со сказочными фильмами, многие люди наслаждаются...

Как получить сильные, подтянутые ноги без приседаний и выпадов

Приседания и выпады-типичные упражнения для укрепления мышц нижней части тела. Хотя они чрезвычайно распространены, они не могут быть безопасным вариантом для всех. Некоторые...

Создана программа предсказывающая смерть человека с точностью 90%Смерть научились предсказывать

Ученые из Стэнфордского университета разработали программу предсказывающую смерть человека с высокой точностью.

Зарплата врачей в 2018 году превысит средний доход россиян в два разаЗП докторов

Глава Минздрава РФ Вероника Скворцова опровергла сообщение о падении доходов медицинских работников в ближайшие годы. Она заявила об этом на встрече с журналистами ведущих...

Местная анестезия развивает кардиотоксичностьАнестетики вызывают остановку сердца

Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения озвучила тревожную статистику. Она касаются увеличения риска острой кардиотоксичности и роста сопутствующих осложнений от...

Закон о праве родителей находиться с детьми в реанимации внесен в ГосдумуРебенок в палате

Соответствующий законопроект внесен в палату на рассмотрение. Суть его заключается в нахождении одного из родителей в больничной палате бесплатно, в течении всего срока лечения...

В 70-80-е годы прошлого столетия определение фактора Kell среди больших контингентов лиц было весьма затруднительно главным образом из-за дефици­та типирующих реагентов. В настоящее время это исследование не представля­ет сложности ни в организационном, ни в методическом аспекте.

Для определения антигена К и антител используют метод конглютинации с 10% желатином, метод агглютинации в солевой среде, непрямую пробу Кумбса [55], капиллярный метод [190], адсорбционные методы [3].

Выявление анти-К-антител также не представляет проблемы, однако следу­ет иметь в виду, что анти-К-антитела реагируют слабее в среде с низкой ионной силой (LISS) [282, 285, 382]. В частности, Merry и соавт. [282] установили, что в этой среде значительно меньше молекул анти-К связываются с эритроцитами, чем в солевом растворе.

В отдельных случаях анти-К-антитела не выявляются при использовании ав­томатизированных методов исследования [394], что, по-видимому, обусловлено их относительно низкой авидностью по сравнению с aHTH-D-антителами, к ко­торым, в основном, адаптированы существующие методы выявления антител.

В последнее десятилетие созданы высокоактивные моноклональные реакти­вы IgM анти-Kell, позволяющие производить определение факторов Kell уско­ренным методом на плоскости.

Описаны методы определения генотипа К/к, основанные на полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для этого используют участки рестрикции Bsml (BsaMl) аллеля К, но не к [232, 239, 294]. Используются аллель-специфические праймеры [94,196,232], гибридизация аллель-специфических олигонуклеотидов [283].

У беременных женщин К-фенотип плода определяют используя амниоциты.

Молекулярно-генетические тесты не столь точны как серологические метода. Отмечены ложноположительные результаты при исследовании лиц с фенотипом Ко.

При анализе необычных форм Kell-антигенов сочетание методов молекулярной диагностики с серологическими методами может оказаться более информативным.

Большинство полученных МКА к компонентам Kell-гликопротеина имели широкую направленность и реагировали с эритроцитами большинства встречающихся фенотипов, за исключением Kell-дефицитных: Ко, McLeod и Kmod [128,144,179,202,302-304,329].*                                                      

Jaber и соавт. [211] получили мышиные МКА к К-гликопротеину с мол. мас­сой 93 кДа, выделенному с помощью электрофореза в полиакриламидном геле из эритроцитов человека К+k- и К-к+. Из эритроцитов Ко и McLeod ком­понент 93 кДа авторам выделить не удалось. Антитела не агглютинировали.

Эффект угнетения антигенов Kell в данном случае мог быть связан также с доминировани­ем гена    i расположенного в позиции цис, над другими генами KEL (см. Кра-эффект).

Ш^^НЁЩРэнзимированные эритроциты й, по-видимому, были направлены к цитоплазматическим доменам К-гликопротеина. Мембранные протеины, выде­ленные из человеческих тромбоцитов, лимфоцитов, гранулоцитов, моноцитов, а также эритроцитов животных, давали такие же результаты в методе с иммуно-окрашиванием, однако при сравнительном анализе в иммуноблоте обнаружено, что эти антитела реагируют с другими эпитопами К-гликопротеина, не являю­щимися К-антигеном.

Jaber и соавт. [210] выделили человеческие МКА анти-К из супернатанта В-клеточной линии, трансформированной вирусом Эпштейна - Барр. Антитела реагировали с компонентом 93 кДа, присутствовавшим на эритроцитах К+, но не реагировали с эритроцитами К- и К , поскольку они не содержали указанно­го компонента.

Parsons и соавт. [303] получили мышиные МКА (ВМС 203) со специфично­стью анти-КрЬс, которые реагировали с эпитопами Крьи Крс, но не Кра.

Nichols и соавт. [297] описали моноклональные антитела анти-К 14 и анти-к. Анти-к-антитела получили Sonneborn и соавт. [350].

Tearina Chu и соавт. [367] получили МКА анти-Кра иммунизацией мышей плазмидами, трансфектированными Kell-ДНК человека.

Активные МКА aHTH-Jsb получили Chu, Yazdanbakhsh и соавт. [128] иммуни­зацией мышей клеточной линией мышиной эритромиеломы (МЭЛ), экспресси-рующей человеческий Kell-гликопротеин.

Некоторые МКА, идентифицированные предварительно как анти-Kell, реа­гировали с эритроцитами, обработанными АЕТ .

В Российской Федерации также созданы [25, 26, 31-33] и серийно произво­дятся в Гематологическом научном центре моноклональные реагенты анти-К и анти-k, которые с успехом применяют в практической работе. Разработан экспресс-метод определения фактора Kell на плоскости без подогрева с помо­щью композита, включающего поликлональные сыворотки анти-Kell и смесь конглютининов (декстрана и других коллоидных соединений) [64, 72].

Посредством слияния лимфоцитов периферической крови донора, ис­кусственно иммунизированного энзимированными эритроцитами К+, и клеток мышиной миеломы Х-63, нам удалось получить гетерогибридому KEL1-D/D98, продуцирующую моноклональные анти-К (МКА анти-К) IgG-антитела, которые отличались от поликлональных анти-Kell (ПКА анти-К) IgG-антител, полученных от того же иммунного донора и двух других лиц, подвергшихся естественной иммунизации антигеном К вследствие беремен­ности и гемотрансфузии.

МКА анти-К агглютинировали как энзимированные, так и нативные эри­троциты К+ на плоскости при комнатной температуре в отличие от ПКА анти-К, которые обладали способностью агглютинировать только энзимирован­ные эритроциты К+. Другие серологические параметры ПКА анти-К и МКА анти-К практически не отличались: они имели одинаковый титр - 1 : 32 ± 64 в непрямой пробе Кумбса, слабо реагировали в реакции конглютинации в про­бирках с желатином, но в то же время выраженно агглютинировали нативные эритроциты К+ на плоскости при комнатной температуре в комбинации с кон-глютининами декстранового ряда.

Полученные данные свидетельствуют о своеобразии различий ПКА анти-К и МКА анти-К, а также о полиморфизме внутри такой серологически четко очерченной антигенной системы, как Kell-Cellano.

Клеточная линия, продуцирующая моноклональные анти-К-антитела, послу­жила основой промышленного производства тестовых реактивов для экспресс-определения фактора К и позволила устранить дефицит сывороток анти-К в лечебно-профилактических учреждениях Российской Федерации.

Моноклональные антитела со специфичностью анти-Кх получены Hattab и соавт. [Transfus. Med., 2003, V. 13, № 1, P. 43-48]. Антитела анти-Km не созданы.

Allen и соавт. [86] описали молодого здорового мужчину по фамилии МакЛеод (McLeod), эритроциты которого очень слабо реагировали с сыворот­ками анти-k, анти-Крь, анти-Js15 и анти-Ku (Peltz) и имели фенотип К-к± Кр(а-b±) Js(a-b±). Вскоре выяснилось, что эритроциты людей, имеющих фенотип McLeod, лишены большинства часто встречающихся Kell-антигенов и антигена Кх (продукта гена ХК1). Одновременно было отмечено, что Kell-дефицитный фенотип нередко сочетается с заболеваниями, так или иначе связанными с ано­малиями Х-хромосомы: хроническим гранулематозом (ХГМ), мышечной дис­трофией Дюшена, пигментным ретинитом, гипоплазией надпочечников [269]. Чаще всего фенотип McLeod сочетается с хроническим гранулематозом - на­следственным Х-сцепленным или аутосомным заболеванием, затрагивающим систему фагоцитоза.

McLeod-фенотип встречается относительно редко. Swash и соавт. [361] вы­явили его у 2 не связанных родством мужчин среди нескольких тысяч доноров Юго-Востока Англии, исследуя их эритроциты анти-к-сьюороткой. Большинство описанных в литературе лиц с фенотипом McLeod обнаружено среди белых (Marsh, Redman [268]), однако он зарегистрирован у японцев (Uchida и соавт. [372], Hanaoka и соавт. [188], Ueyama и соавт. [375]), негров (Fikrig и соавт. [163], Ueyama и соавт. [375]) и бразильцев (Wendel и соавт. [393]).

Клинические проявления, сопровождающие фенотип McLeod, получили на­звание McLeod-синдром, который выражается симптомокомплексом неврологи­ческих и мышечных нарушений, а также предрасположенностью к инфекциям [269]. Такие больные страдают возвратными бактериальными и грибковыми пи-огенными инфекциями. У них часто наблюдают гранулемы, мышечную дистро­фию с уменьшением мышечной массы, хореиформные движения, сниженные сухожильные рефлексы, кардиомиопатию, предрасположенность к гемолитиче­ским кризам (Danek и соавт. [139]). В некоторых случаях заболевание протекает в тяжелой форме и приводит к летальному исходу.

Jung и соавт. [219] наблюдали семью, в которой 5 из 7 мужчин с фенотипом McLeod страдали психическими расстройствами.

Мальчики с фенотипом McLeod, страдающие ХГМ, начиная с самого ранне­го возраста, подвержены тяжелым бактериальным инфекциям, вызывающим ле­гочные абсцессы. Мужчины с фенотипом McLeod, у которых нет ХГМ, живут дольше, но имеются наблюдения, что их здоровье не идеально. По мере взрос­ления у них проявляются те или иные признаки синдрома McLeod.

В крови при McLeod-синдроме обнаруживается анизоцитоз и аканто-цитоз (Swash и соавт. [361], Wimer и соавт. [398], Hardie и соавт. [189]), снижена эластичность мембраны эритроцитов, деформабельность (Ballas и соавт. [95]) и осмотическая резистентность [170], укорочено время при­живления эритроцитов in vivo (Brzica и соавт. [114]), повышена концен­трация карбоангидразы и сывороточной креатининфосфокиназы (Marsh и соавт. [259]). что характерно для разных форм миодистрофии (Swash и со­авт. [361]), отмечают р-липопротеинемию. В то же время физиологические

функции эритроцитов достаточно компенсированы, биохимическая структура скелета мембраны и транспорт электролитов в клетках близки к норме [170,178,230,326,364].

Фенотип McLeod формируется в результате делеции части Х-хромосомы или мутаций в АХ-локусе. Все носители фенотипа McLeod за редчайшим ис­ключением [189, 199] - мужчины, что подтверждает сцепленность заболевания с Х-хромосомой. У некоторых больных при анализе ДНК обнаруживают точеч­ные мутации Ж-гена. Как видно из табл. 5.11, McLeod-синдром характеризует­ся гетерозиготностью по различным мутациям, инактивирующим Кх.

Мутации в локусе ХК, сочетающиеся с фенотипом McLeod*

Мутация

Источник

Делеция всего гена

[103,137,165,167,152,161, 1981

Делеция промотора и экзона 1

[198]

Делеция экзона 1

[139]

Делеция экзона 2

[347]

Делеция интрона 2 и экзона 3

[139,222]

Trp 36 Stop в экзоне 1

[139]

Одиночная нуклеотидная (Т) делеция в экзоне 2 кодона 90

[199]

Arg 133S top в экзоне 2

[139,158]

Gin 145 Stop в экзоне 2

[139]

Одиночная нуклеотидная (С) инсерция в экзоне 2 кодона 151

[375]

Trp 236 Stop в экзоне 3

[139]

Двойная нуклеотидная (ТТ) делеция в кодоне 229

Одиночная нуклеотидная (G) делеция в экзоне 3 кодона 257

5-нуклеотидная (СТСТА) делеция в экзоне 3 кодона 285

Cys 294 Arg в экзоне 3

Gin 299 Stop в экзоне 3

[219]

14-нуклеотидная делеция в экзоне 3 кодона 313

[139]

Trp 314 Stop в экзоне 3

[359]

Одиночная нуклеотидная (Т) делеция в экзоне 3 кодона 338

[188]

g-c в интроне 1, участок 5' сплайсинга

[332]

g-a в интроне 2, участок 51 сплайсинга

[198]

g-a в интроне 2, участок 5' сплайсинга

[371]

g-a в интроне 2, участок | сплайсинга

[198]

Singleton и соавт. [347] наблюдали делецию в экзоне 2 локуса ХК у мужчины с McLeod-синдромом и его внука. Это позволило предположить, что мальчик в будущем также заболеет.

Но и соавт. [199] зафиксировали McLeod-синдром у женщины, имеющей де­лецию в экзоне 2 ХК (см. табл. 5.11). О наличии этого синдрома у пациентки свидетельствовали неврологические и мышечные симптомы, сочетающиеся со слабовыраженными Kell-антигенами.

Daniels и соавт. [150] обнаружили мутацию в 5'донорском сплайс-участке интрона 2 у мужчины, у которого почти отсутствовали Kell-антигены на эри­троцитах, а также у 2 его дочерей. По мнению авторов, редукция Kell-антигена обусловлена комбинированным эффектом: с одной стороны, дефицитом Кх-антигена, с другой - гомозиготностью по Хр*-аллелю (феномен Кра-ингибиции).

Curnutte и Bemiller [137] нашли большую интерстициальную делецию Хр21.1 у 3 из 46 пациентов с фенотипом McLeod и Х-сцепленным ХГМ. У 40 пациентов выявлены одиночные нуклеотидные мутации.

Нарушение функции Ж7-аллеля приводит к дефициту Кх-протеина, что в свою очередь резко снижает экспрессию антигенов системы Kell, регистриру­емую в норме. У разных больных наблюдается неодинаковое угнетение анти­генов системы Kell, что отражается на многообразии клинических проявлений.

По мнению Issitt и Anstee [204], синдром McLeod обусловлен несколькими ал-лельными генами, контролирующими выработку антигена Кх, который выполняет определенную функцию не только на эритроцитах, но и на гранулоцитах:

  • аллель Хк1 присутствует у здоровых людей и кодирует продукцию нор­мального количества Кх-протеина на эритроцитах и гранулоцитах;
  • аллель Хк° обусловливает фенотип McLeod в сочетании с пигментным ретинитом, мышечной дистрофией Дюшенна, гипоплазией надпочеч­ников или различные сочетания симптомов этих болезней с хрониче­ским гранулематозом;
  • аллель Хк2 вызывает хронический гранулематоз II типа, т. е. и заболева­ние, и фенотип McLeod. При этом белок Кх отсутствует на эритроцитах и гранулоцитах;
  • аллель Хк3 приводит к хроническому гранулематозу I типа, когда бе­лок Кх присутствует на эритроцитах, но отсутствует на гранулоцитах. В этом случае мужчины больны гранулематозом, но имеют нормальный фенотип по системе Kell;
  • аллель Хк4 обусловливает отсутствие белка Кх на эритроцитах при нор­мальном уровне Кх на гранулоцитах. В этом случае мужчины имеют фенотип McLeod, но не страдают хроническим гранулематозом.

Основанием для такого заключения послужили данные о том, что некоторые мужчины с нормальным Kell-фенотипом болели наследственным Х-связанным хроническим гранулематозом, в то время как другие имели фенотип McLeod, но це страдали этим заболеванием.

В настоящее время считается, что перечисленные заболевания возникают в результате частичных делеций на участке р21 Х-хромосомы. У некоторых па­циентов делеция на участке Хр21 вызывает хронический гранулематоз и фе­нотип McLeod. У других пациентов, с более широкой делецией Хр21, возника­ет фенотип McLeod, пигментный ретинит или мышечная дистрофия Дюшенна. Наличие нескольких симптомов у пациента указывает на то, что соответству­ющие гены находятся близко друг к другу, и относительно небольшая делеция может одновременно инициировать клинические проявления, свойственные разным нозологиям. По оценке Marsh и соавт. [266], до 30 % пациентов с ХГМ, связанным с Х-хромосомой, имели делецию, которая приводила также к появ­лению фенотипа McLeod.

Как далее было выяснено [103, 137, 152, 161, 165, 167, 197], ген Х-сцеплен-ного ХГМ и Ж-ген, ответственный за фенотип McLeod, независимы, и сочета­ние McLeod-фенотипа с хроническим гранулематозом происходит вследствие делеций части Х-хромосомы, которая затрагивает оба гена.

Помимо влияния на экспрессию антигенов Kell, субстанция Кх участвует в формировании других структурных элементов мембраны эритроцитов. Об этом свидетельствует тот факт, что у лиц с фенотипом McLeod, лишенных, как ука­зывалось выше, Кх-антигена, не только изменяется форма эритроцитов, но и повышается проницаемость и хрупкость мембраны.

Интересно отметить, что женщины с Х-хромосомой, переносящей ген McLeod (гетерозиготы ХкЧХк), часто имеют кровяную химеру. Одна часть эритроцитов, циркулирующих в их кровеносном русле, является Кх+, дру­гая - Кх-. Первая из упомянутых популяций несет нормально выраженные Kell-антигены, вторая популяция - слабовыраженные Kell-антигены [114, 140, 362,398]. Пропорция эритроцитов с фенотипом McLeod варьирует от 5 до 85 % [268]. Многие авторы подчеркивают, что такую химеру весьма трудно иден­тифицировать с помощью серологических методов, особенно при отсутствии анти-Кх-сывороток. Проточная цитометрия в этих случаях предпочтительнее

с268'316

Считается, что в основе патогенеза синдрома McLeod лежит феномен Х-хромосомной инактивации или эффект Lyon [141, 204]. Установлено, что одна из Х-хромосом у женщин в период ее эмбрионального развития инак-тивируется и весь Х-хромосомный продукт производится только одной Х-хромосомой, причем инактивируется, как правило, Х-хромосома, имеющая аномалии (в рассматриваемом случае имеющая делеций или мутации, иници­ирующие McLeod-синдром). Таким образом, у женщин-гетерозигот ХкЧХк -носительниц М£ео^-ген-несущей Х-хромосомы - McLeod-синдром не раз­вивается, а у мужчин-гетерозигот ХкЧХк развивается. Наличие у женщин-гетерозигот химеричных эритроцитов Кх+ и Кх- объясняют неполной или ча­стичной Х-хромосомной инактивацией.

"mod

Фенотип Kmod - собирательное понятие, используемое для обозначения феноти­пов с угнетенной экспрессией, если не всех, то большинства антигенов Kell. Как полагают Marsh, Redman [268, 269] и другие авторы [324], этот фенотип наследу­ется через вариабельный аллель локуса KEL, Kmod. В клетках Kmod уменьшено ко­личество Kell-гликопротеина (Byrne и соавт. [П5]), в то время как экспрессия Кх-антигена на эритроцитах Kmod повышена (Brown и соавт. [113], Peloquin и соавт. [308], Winkler и соавт. [400], Pehta и соавт. [306], Byrne и соавт. [115]). Эритроциты Kmod содержат больше Кх-антигена, чем эритроциты лиц с фенотипом McLeod и Ко.

Некоторые обладатели фенотипа Kmod вырабатывают антитела, которые по специфичности напоминают анти-Ku, но отличаются от последних отсутстви­ем реакции с эритроцитами Kmod (Marsh, Redman [268], Brown и соавт. [113], Peloquin и соавт. [308], Byrne и соавт. [115]).

Считается, что Kmod наследуется как рецессивный признак, однако это окон­чательно не доказано. Так, Peloquin и соавт. [308] описали мужчину с нарушен­ным Kell-фенотипом. Двое из четверых его братьев также имели нарушение Kell-фенотипа, но у 7 детей и 13 внуков пробанда Kell-фенотип не был нарушен.

В другом наблюдении (Pehta и соавт. [306]) женщина Kmod имела брата с по­добным слабым Kell-фенотипом.

Pool и соавт. [312] обнаружили слабые антигены Кра и к в шведской семье у 2 сибсов, имевших фенотип K-k+ Kp(a+b+w), и 3-го сибса, имевшего фенотип K+k+w Kp(a-b+). Указанные антигены выявили только с помощью адсорбции -элюции. Авторы полагали, что сибсы гетерозиготны по К™"1, а также по кКр" или ККрь. Как показали далее Pool и соавт. [312], из 70 образцов эритроцитов, типированных как Кр(а+Ь-), в 13 образцах присутствовал слабый антиген Крь, выявляемый с помощью адсорбции - элюции анти-Крь-антител. Возможно, эти 13 человек являлись гетерозиготами по гену Kmod. Полученные Pool и соавт. данные указывают на то, что ген Kmod встречается часто. Однако тот факт, что он фенотипически себя почти не проявляет, свидетельствует в пользу рецессив­ного характера его наследования.

Lee и соавт. [237] исследовали интрон-экзонную область локуса KEL, включая 19 экзонов гена KEL, у 4 не связанных родством лиц, имевших К -фенотип. С тем чтобы понять механизмы, с помощью которых мутации приво­дят к депрессии Kell-антигенов, авторы трансфектировали в Т-клетки 293 ДНК 4 пробандов и соответствующие участки ДНК здоровых лиц (контроль). Далее подсчитывали количество мутантных Kell-протеинов и Kell-протеинов дикого типа, экспрессированных на поверхности трансфертных клеток. Пробанды име­ли следующие точки мутаций:

  • Kmod-l - гомозигота по замене G 1208 А, приводящей к замещению Ser 363 Asg;
  • Kmod-2 — гетерозигота: замена G 1208 А, приводящая к замещению Ser 363 Asg, и замена А 2150 G, приводящая к замещению Tir 677 Cis;
  • Kmod-3 - (предварительно типирован как К: -13) - гетерозигота: замена  Т 1106 С, приводящая к замещению Leu 329 Pro, и замена G 1716 А, приводящая к замещению Trp 532 Stop; Kmod-4 - гетерозигота: замена G 2227 А, приводящая к замещению Gly 703 Arg, и молчащая мутация С 1839 Т. В Т-клетках 293 мутантные Kell-протеины транспортировались к поверх­ности в значительно меньшей степени по сравнению с Kell-протеином дико­го типа. Мутации Gly 703 Arg и Leu 329 Pro, сопровождающие фенотип Kmod, в экспрессированном на поверхности Т-клеток 293 протеине были редки, му­тации Tir 677 Cis и Ser 363 Asg отсутствовали. Авторы пришли к заключению, что обнаруженные ими точки мутаций затрудняют транспорт мутантных Kell-протеинов к клеточной поверхности, в связи с чем Kell-антигены на эритроци­тах Kmod выражены крайне слабо.

Uchikawa и соавт. [374], обследовав 4 человек со слабыми Kell-антигенами, включая очень слабый К, нашли, что все были гомозиготны по ££Х-мутации, кодирующей замену Thr 193 Arg.

 

Day и Mullins

Некоторые лица из числа обладателей фенотипа Kmod вырабатывают антите­ла со специфичностью, напоминающей анти-Ku [113, 115, 269, 308].Однако в отличие от истинных анти-Ки-антител они не реагируют с другими образцами эритроцитов К ., что указывает на качественные различия антигенов, объеди­няемых под названием Kmod.

Один из таких фенотипов, Day, обнаружен Brown и соавт. [113] у 84-лет­ней белой женщины. Фенотип Day оказался новым Kell-дефицитным феноти­пом. Его нельзя было отнести ни к Ко, ни к McLeod, так как он включал слабо-выраженные антигены К, Kpb, Jsb, КП, К12, К13, К14, К18, К19, К22, а так­же Ku и Кх. Родители женщины были двоюродными братом и сестрой, что, по-видимому, и обусловило столь необычный фенотип.

Другой фенотип из группы Kmod, получивший название Mullins, обнаружили Peloquin и соавт. [308] у 62-летнего пациента и 2 из 4 его братьев. Ни один из членов семьи в следующем поколении семьи Mullins не унаследовал этого фе­нотипа. Поскольку антитела, обнаруженные в сыворотке упомянутого пациента реагировали с эритроцитами, имевшими фенотип Day, было сделано заключе­ние, что фенотип Mullins качественно отличается от ранее обнаруженных.

Allen

История обнаружения этого редко встречающегося фенотипа такова. В 1988 г. Norman и Daniels [298] обследовали донора крови и его сестру. Оба были Кр(а+Ь+), но вопреки ожидаемой имели крайне низкую выраженность анти­генов k, Kpb, Jsb и КП. У мужчины, кроме того, была снижена экспрессия ан­тигенов К12, К14, К18 и К19. Экспрессия Кра у обоих сибсов, наоборот, была повышена по сравнению с уровнем этого антигена на эритроцитах Кр(а+Ь+) контрольных доноров. Дочь обследованного мужчины, считавшегося генетиче­ски Кра/Крь, унаследовала от отца Кра, однако подавленной экспрессии анти­генов Kell и napa-Kell у нее не наблюдалось. На основании полученных дан­ных авторы пришли к заключению, что низкая экспрессия антигенов Kell у мужчины и его сестры была обусловлена не геном К, поскольку оба сибса име­ли эритроциты Kp(a+b+w), а другим геном - Kmod. Обследованный и его сестра были гетерозиготы по генам kKpaJsb и гену Kmod, который кодировал продукцию уменьшенного количества антигенов k, Kpb, Jsb и других*. Этот необычный фе­нотип был назван фенотипом Allen в честь Фреда Аллена, известного иммуно-серолога, много сделавшего для изучения серологии и генетики антигенов си­стемы Kell и других антигенов эритроцитов.

Для фенотипа Allen характерно снижение экспрессии нескольких (но не всех) антигенов Kell. Слабо выражены антигены k, Rautenberg, Ku, Jsb, Cote, Bockman, Santini, Marshall, Sublett, Ikar. Другие антигены выражены нор­мально.

Leach

Антигены Kell слабо выражены на эритроцитах лиц с фенотипом Leach [149, 204]. Этот фенотип обусловлен влиянием на систему Kell другой систе­мы групповых антигенов эритроцитов - Gerbich. Люди, эритроциты которых не имеют 2 или 3 наиболее частых антигенов Gerbich (фенотип Ge:-2,-3,+4 или Ge:-2,-3,-4), содержат в 3 раза меньшее количество антигена KEL1 на эритроцитах по сравнению с людьми, имеющими обычный фенотип по си­стеме Gerbich - Ge:+2,+3,+4 [210]. О частичной сцепленности генов KEL и Ge свидетельствует следующее. У лиц Ge:-2,-3,-4, наряду с дефицитом ан­тигена KEL1, отмечают дефицит гликофорина С. В то же время при фенотипе Ge:-2,+3,-4 экспрессия антигена KEL1 и концентрация гликофорина С не из­менены. Указанное обстоятельство позволило предположить, что влияние гена Ge на ген KEL обусловлено тем, что Kell-протеин взаимодействует с частью мо­лекулы гликофорина С, которая кодируется экзоном 3.

Описано несколько редких фенотипов, отнесенных к группе Kell-дефицитных: Ко, McLeod, Kmod, Allen, Leach, Mullins. Их общим серологическим признаком яв­ляется крайне слабая выраженность или полное отсутствие антигенов Kell.

Количественные вариации антигенов Kell на Kell-дефицитных эритроцитах весьма многообразны - от вариантов, относительно легко обнаруживаемых ме­тодами прямой агглютинации и непрямой пробы Кумбса, до вариантов, выявля­емых только с помощью адсорбции - элюции [319].

Kell-дефицитные фенотипы располагаются по убыванию количества Kell-антигенов и одновременно возрастанию количества Кх-антигена в следующей последовательности: К    , > Allen > К   > McLeod > К . Фенотипы Leach и normal Mullins можно отнести к разновидностям Kmod.

Транзиторную депрессию Kell-антигенов наблюдали при аутоиммунных за­болеваниях - гемолитической анемии, тромбоцитопении [112, 344, 380, 397]. Иногда она сопровождалась выработкой антител к собственным Kell-антигенам. Нагруженные аутоантителами эритроциты утрачивали способность реагиро­вать с диагностическими анти-К-сыворотками (см. Аутоантитела к антигенам Kell. Трансформация К- в К+, К+ в К-).

Приводим краткое описание Kell-дефицитных фенотипов.

Мутации, сочетающиеся с фенотипом К *

Мутация

Экзон

Популяция

Источник

Cys 83 Stop

4

Югославы

[238]

Arg 128 Stop

4

Афроамериканцы

Arg 192 Stop

6

Американцы

Gin 348 Stop

9

Португальцы

Ser 363 Asn

10

Американцы

Ser 676 Asn

18

Израильтяне, американцы

g-a, участок 5' сплайсинга

интрон 3

Исландцы, американцы

g-c, участок Ц сплайсинга

интрон 3

Тайваньцы

[405]

Фенотип К (Knull), нулевой фенотип, обнаружили случайно Chown, Lewis и Kaita в 1957 г. [125] при исследовании эритроцитов женщины по фамилии Peltz. В сыво­ротке крови миссис Peltz имелись антитела анти-Ku (см. антиген Ки). Второй об­разец Ко найден теми же авторами в результате целенаправленного обследования эритроцитов более 10 тыс лиц с помощью оригинальной сыворотки миссис Peltz (анти-Ku). В настоящее время описано более 20 случаев этого редкого фенотипа [125,187,220,299]. Носителями Ко могут быть как мужчины, так и женщины.

Большинство гомозигот ^выявлено среди европеоидов, поскольку исследо­вания в основном проводили среди европейского населения. Один человек с фе­нотипом К° обнаружен Humphreys и соавт. среди канадских индейцев, 2 найде­ны Judd среди негров [цит. по 204].

Среди лиц белой расы (доноров крови) фенотип Ко найден с частотой 1 на 16 518 обследованных (Chown и соавт. [127]), среди японцев -1 на 14 541 обследо­ванного (Hamilton и Nakahara [187]), что соответствует частоте гена А? около 0,007.

Эритроциты Ко не содержат антигенов Kell и napa-Kell, включая Ku и Km. Их фенотип выражается формулой K-k-, Kp(a-b-c-), Js(a-b-), Ul(a-), Wk(a-), К:-11,-12,-13,~14,~16,-18,-19-20,"22,--23,-24,-25. В отличие от фенотипа McLeod эритроциты Ко содержат Кх-антиген и имеют нормальную морфоло­гию и выживаемость in vivo [269].

Особенностью лиц К является то, что они легко вырабатывают антитела анти-К широкой специфичности, поскольку вероятность совместимой трансфу­зии эритроцитов или беременности от индивида Ко ничтожна мала. Люди ^яв­ляются источником анти-Ки-антител, которые реагируют с эритроцитами прак­тически 100 % доноров, и им сложно подобрать совместимую кровь [324]. Как правило, фенотип Ко выявляли у пациентов в связи с идентификацией присут­ствующих у них антиэритроцитарных антител.

Поскольку родители лиц, не содержащих Kell-антигенов, часто оказывались кровными родственниками (двоюродными братьями и сестрами) высказано пред­положение, что фенотип Ко обусловлен гомозиготностью по редкому немому ал-лелю локуса KEL, названному Allen и соавт. [88] К. Семейные исследования в основном подтвердили это предположение: большинство родительских пар, у ко­торых рождались дети Ко, были £°-гетерозиготы [164, 220, 262, 267]. В этом от­ношении показательна семья, обследованная Kaita и соавт. [220]. Эритроциты отца были К-к+, эритроциты матери - К+к-, а у 3 детей - К+к+, К+к- и К-к-Очевидно, что родители имели генотип к/К и К/К, а их дети - К/к, К/К°иК°/К°.

Не исключены также механизмы формирования фенотипа Ко, подобные опи­санным Redman и Marsh [324] для фенотипа McLeod, т. е. в результате делеции части Х-хромосомы или мутаций в ХК-локусе.

Redman и соавт. [320], Jaber и соавт. [211], Lee и соавт. [238] установили, что Kell-гликопротеин на клетках Ко практически отсутствует. В то же время эри­троциты Ко не имеют морфологических нарушений (Marsh и соавт. [266]).

Yu и соавт. [405], Lee и соавт. [238], исследуя молекулярную основу феноти­па Ко у 9 не связанных родством пробандов (табл. 5.10), нашли в полипепти­дах, экспрессируемых в эмбриональных почечных клетках человека, ряд мута­ций: Ser 363 Asn, Ser 676 Asn, Arg 128 Stop, что могло свидетельствовать о пре­ждевременной остановке трансляции. Указанные полипептиды оставались вну­три клетки и не транспортировались к поверхности клеточной мембраны.

Lee и соавт. [239] обнаружили у 2 людей с фенотипом Ко нормальную КеП-мРНК, присущую людям с обычным Kell-фенотипом.




Тесты для врачей

Наши партнеры