Достижения последних лет

Система Gerbich

Selleng и соавт. [64] описали больного с анти-Ое2-антителами, которому во время операции на сердце по жизненным показаниям была перелита сероло­гически несовместимая кровь (из-за отсутствия подходящего донора). После биологической пробы больному перелили 2 дозы крови Ge2+. Клинических проявлений несовместимости во время трансфузии и после нее не отмече­но. Авторы пришли к выводу, что антитела affra-Ge2 не являются клинически значимыми.

Система Cromer

Win и Needs [79] наблюдали беременную, имевшую анти-Сг^а-антитела, ре­агировавшие в непрямой антиглобулиновой пробе в разведении 1 : 32. К 35-й неделе беременности титр антител снизился до 1 : 1, затем антитела исчезли. Женщина родила здорового ребенка. Авторы констатировали, что указанная си­туация не создавала риска развития ГБН и ПТО, если бы женщине понадоби­лось переливание эритроцитов. Это избавило их от необходимости поиска до­норов Сг(а-), встречающихся крайне редко.

Система Knops

Covas и соавт. [15] изучили распределение гаплотипов системы Knops сре­ди представителей различных рас, населяющих Бразилию. Частота единич­ных замен нуклеотидов у европеоидов и монголоидов существенно не отли­чалась. У негроидов высокую частоту имели аллели McC^b, S12 и КАМ+. Из 12 идентифицированных гаплотипов Knops чаще других встречались Кп^а, МсС^а, 57/, S14, КАМ+ и КАМ-. Последний имел наиболее высокую часто­ту во всех обследованных группах. Авторы предположили, что часто встре­чающийся гаплотип КАМ- является результатом метисации с негроидами. Повышенная частота его в Бразилии, вероятно, обусловлена селективным преимуществом.

Система RAPH

Crew и соавт. [16] установлена молекулярная основа фенотипа MER2-, по­лучены доказательства клинической значимости аллоантител к указанному ан­тигену. Описаны 2 женщины MER2- (одна пакистанского, другая - турецкого происхождения) с наличием аллоантител анти-МЕЯ2. У обеих отмечались при­знаки гемолитической посттрансфузионной реакции после переливания эри­троцитов MER2+. Молекулярно-генетические исследования показали, что обе женщины гомозиготны по мутации 513>Т в гене, кодирующем синтез лиган-да CD151 (тетраспанина). Указанная мутация проявлялась аминокислотной за­меной Arg 17 Lys, которая, однако, не оказывала существенного влияния на пространственную структуру тетраспанина - протеина, на котором располага­ются антигенные детерминанты MER2.

Система Scianna

Идентификация антител к часто встречающимся антигенам Scianna явля­ется сложной задачей из-за чрезвычайной редкости эритроцитов, не содержа­щих этих антигенов.

Seltsam и соавт. [67] получили рекомбинантный растворимый протеин, несущий все часто встречающиеся антигены Scianna (Sc: 1,-2,3,-4,5,6,7). Исследования показали, что указанный протеин адсорбирует из сыворо­ток антитела к часто встречающимся антигенам Scianna, но не адсорбиру­ет антитела к редко встречающимся антигенам, в частности к антигену Sc2. Авторы отмечают, что ими сделан первый шаг в области идентификации ан­тител системы Scianna, и полагают, что использование рекомбинантных про­теинов со специфичностью антигенов различных групповых систем являет­ся принципиально новым перспективным методическим подходом в имму-носерологии.

Система Dombrock

Westhoff и соавт. [77] обследовали больного, у которого на эритроцитах от­сутствовали все антигены Dombrock, а в сыворотке крови определялись алло-иммунные антитела к одному из часто встречающихся антигенов этой систе­мы - Gy^a. Протеин Dombrock на эритроцитах больного полностью отсутство­вал. Молекулярно-генетические исследования выявили точковую мутацию Т 185 С, ведущую к аминокислотной замене Phe 62 Ser.

Fernandes и соавт. [23] исследовали генный локус DOу представителей народности теке, проживающей в Конго (Африка). В указанной этнической группе аллели DO*A, DO*B, НУи JOвыявлены с частотой 18, 68, 7 и 3 % со­ответственно. Идентифицированы 2 новых аллеля. Первый имел одиночную аминокислотную замену Gin 149 Lys, произошедшую в результате точковой мутации 447>А. Этот вариант получил обозначение DO-DOB-SH. Второй ал­лель также имел одиночную мутацию (Т 524 А), проявлявшую себя амино­кислотной заменой Не 1746 sn. Обе мутации локализовались в локусе DO*Bи формировали антиген Do^b, который не выявлялся некоторыми моноклональ-ными антителами, а реакции с другими образцами были слабовыраженными. Авторы рекомендовали учитывать уровень экспрессии антигенов Dombrock Ври проведении гемотрансфузий^

Система Duffy

Hughes и соавт. [30] проследили исход беременности у 15 женщин, имев­ших анти-Гу^а-антитела, и показали, что антитела этой специфичности спо­собны вызвать клинически значимый гемолиз эритроцитов плода. И хотя ни у одно из новорожденных не наблюдали отечной формы ГБН и не было ни одного летального исхода, авторами публикации даны рекомендации ве­сти наблюдение беременных с анти-Ру^а-антителами так же, как в случаях анти-О-сенсибилизации.

Afenyi-Annan и соавт. [3] выявили случаи приобретенного феноти­па Fy(a-b-). Его наблюдали у больных серповидно-клеточной анеми­ей в последней стадии заболевания. Авторы указывают, что этот феномен—и во внутренних органах больных,

Picard и соавт. [58] провели генотипирование локуса HLA-DRB1 у 69 лиц, сенсииили^риьсшных к антигену Fy^a. Оказалось, что среди этого континген-та достоверно чаще встречались аллели DRB1*04 и HLA-DRB145. Отмечена выраженная корреляция с аллелями DRB1*0401 и DRB1*0403. Среди сенси­билизированных к антигену Fy^a обладатели этих генов составили 51 и 19 %, в то время как в контрольной группе 24 и 9 % соответственно. Авторы вы­сказали предположение, что для лиц, имеющих указанные аллели, проте­ин Fy^a является более сильным иммуногеном, чем для лиц, лишенных их. Аналогичные данные получены другой группой французских исследовате­лей (Noizat-Pirenne и соавт. [51]). Они также установили связь между пред­расположенностью к аллоиммунизации антигеном Fy^a и присутствием алле-mHLA-DRBl.

Система Kidd

Причиной возникновения нулевого фенотипа Кидд (Jk:-1,-2,-3) явля­ются нарушения структуры аллелей гена Ж. В дополнение к ранее извест­ным семи вариантам аллеля Ж""" Wester и соавт. [76] открыли четыре новых. Два из них обусловлены нонсенс-мутациями 203>Т (Gin 68 Stop) и 723delA (Не 262 Stop) в аллелях Ж*1 и Ж*2 соответственно. Другая мутация, 958>Т (Thr 312let), обнаружена в гене Ж*1 у афроамериканцев. Такая же мутация присутствовала в аллеле Ж*2 у выходцев из Индии. Показано, что при ука­занных мутациях Кидд-гликопротеин на эритроцитах полностью отсутствует.

Liu и соавт. [42] при обследовании тайваньцев Jk_nulI нашли две мутации гена Ж: 223>А в экзоне 5 и 896G>A в экзоне 9. Это, по мнению авторов, отличает Jk китайского происхождения от Jk_null полинезийского происхо­ждения.

Система Diego

Описано два случая острых гемолитических посттрансфузионных реак­ций, обусловленных анти-\М:^а-антителами (Boctor и соавт. [8], Cherian и соавт. [12]). Авторы отмечают, что вероятность переливания эритроцитов Wr(a+) сенсибилизированным реципиентам составляет 1 на 10 000 гемотрансфу-зий. В процессе скрининга анти-Ч¥г^а-антитела остаются невыявленными, по­скольку коммерческие панели эритроцитов, как правило, не содержат образ­цов Wr(a+).

Японскими исследователями Mochizuki и соавт. [49] описан случай ГБН, «^условленный антителами анти-Б1^ь. Фототерапия в сочетании с внутривен-ным введением донорского иммуноглобулина дала положительный лечебный

1003

Система Lutheran

Karamatic Crew и соавт. [33] получили новые данные о генетических ме­ханизмах возникновения нулевого фенотипа Lutheran. При обследовании 3 лиц Lu рецессивного типа авторы выявили четыре вида генетических из­менений, способствовавших инактивации гена LU. У одного из обследо­ванных выявлены мутация 691>Т в экзоне 6 с образованием стоп-кодона (Arg 231 STOP), а также делеция экзонов 3 и 4 гена LU. Двое других лиц оказались гомозиготными по мутациям 711>А в экзоне 6 (Cys 237 STOP) и 364>Т в экзоне 3 (Arg 121 STOP). Таким образом, во всех 3 случаях причи­ной фенотипа Lu    явились точковые мутации с образованием стоп-кодонов.

Появилось сообщение об успешном выявлении антител анти-Ьи^ь с ис­пользованием магнитизированных частиц, предварительно сенсибилизиро­ванных рекомбинантным протеином Lu^b через стрептавидин (Seltsam и со­авт. [65]). Антитела обнаружены во всех 13 использованных сыворотках aHTH-Lu^b. Последние имели при использовании указанного метода с эритро­цитами Lu(a-b+) более высокий титр, чем в стандартных серологических тестах.

Поскольку антитела анти-Lu¹⁵ не вызывают ГБН и посттрансфузионных реакций, использование столь чувствительного метода скрининга указанных антител не представляется перспективным. Тем не менее упомянутый метод может оказаться полезным при дифференцировке антител в мультиспецифических сыворотках.

Используя новейшие фаговые рекомбинантные технологии, группа француз­ских и канадских исследователей впервые получила моноклональные антитела анти-Lu³ IgG, (Richard и соавт. [63]).

Системы Kellи Кх

Yuan и соавт. [86] описали 12-летнего нигерийского мальчика, которому были произведены множественные гемотрансфузии в связи с серповидно-клеточной Р-талассемией. Больной имел фенотип Js(a+b-) по системе Kell, в сыворотке его крови содержались антитела анти-Js¹³. Из-за отсутствия до­нора Js(a+b-) по жизненным показаниям ему было перелито несколько доз серологически несовместимых эритроцитов. После трансфузий гемолиза invivoне отмечено. Однако последующее изучение приживаемости мечен­ных Сг⁵¹ эритроцитов invivoи тесты с монослоем моноцитов invitroпока­зали, что антитела способны снижать продолжительность циркуляции пере­литых эритроцитов. Авторы считают антитела anti-Js^b клинически значимыми и рекомендуют избегать трансфузий эритроцитов Js(b+) больным, имеющим аш1-^т8^ь-антитела.

Lee-Stroka и соавт. [40] выявили вариант антигена К. У 53-летнего муж­чины с фенотипом К+ эритроциты реагировали с тремя образцами поликло-нальных и двумя образцами моноклональных анти-К-антител. В то же время были получены отрицательные реакции с одним образцом поликлональных и двумя другими образцами моноклональных анти-К-антител. Молекулярно-генетическими исследованиями выявлена точковая мутация А 577 Т с заменой треонина на серии в положении 193 Kell-гликопротеина. Авторами даны ре­комендации подвергать производимые реагенты анти-К тестированию на их способность выявлять описанный выше вариант антигена К.

Аналогичные данные получены другой группой исследователей (Poole и со­авт. [60]), которые установили, что мутация 577>Т и расположение серила в позиции 193 ведут к появлению необычного антигена К, выявляемого не все­ми образцами как поликлональных, так и моноклональных анти-К-антител. Авторы отметили, что и ген К в данном случае не всегда выявляется в стандарт­ной процедуре генотипирования (идентифицируется мутация 578>Т в гене KEL, ведущая к аминокислотной замене Thr 193 Met), что может привести к ошибоч­ным результатам.

Kormoczi и соавт. [35] исследовали молекулярно-генетический механизм возникновения фенотипов К_о и К_е1 у жителей Австралии. Произведено геноти-пирование лиц с фенотипом Кк и КК. В 14 случаях были выявлены расхожде­ния в результатах серологических и молекулярно-генетических исследований. Так, у лиц с фенотипом КК установлен генотип KEL*J/KEL*2. Выявлено 8 ра­нее неизвестных молчащих аллелей Ки два - K^el. Проведенные исследования позволили уточнить частоту распределения аллелей К и к у австралийцев.

В Голландии провели скрининг антиэритроцитарных [ у женщин в первом триместре беременности. Особое внимание обра­щали на антитела системы Kell. Сравнивали показатели смертности новорож­денных до и после 1998 г., а также оценивали уровень гемоглобина у плода при внутриутробном переливании крови, которое проводили с целью лечения пло­дов в случае обнаружения антител системы Kell и возникновении подозрения на анемию плода, обусловленную указанными антителами. Авторы отметили, что проведение внутриутробных переливаний плоду в случае сенсибилизации беременных к антигенам системы Kell позволило улучшить показатели перина­тальной выживаемости.

Описана посттрансфузионная реакция замедленного типа, обусловленная антителами анти-Кр^а (Koshy и соавт. [36]). Реципиент, 52-летняя женщина, ев­ропейка, получила трансфузию нескольких доз эритроцитов, одна из которых оказалась Кр(а+). Аллоиммунизация к указанному антигену до гемотрансфузии не была выявлена. Отмечено тяжелое посттрансфузионное осложнение: глубо­кая анемия, почечная и печеночная недостаточность.

Lee и соавт. [38] привели случай, когда анти-К-антитела матери блокирова­ли эритроциты К-положительного новорожденного и антиген К на них не выяв­лялся при исследовании с помощью гелевого метода. В элюатах с эритроцитов определялись материнские анти-К-антитела.

Описан больной, имевший аутоантитела anti-Kp^b IgM (Bosco и соавт. [9]). Антиглобулиновый тест с aHTH-IgG-сывороткой был отрицательным. Положительные реакции получены с aHTH-IgM-сывороткой, элюаты с эритроци­тов больного содержали апй-Кр^ь-антитела, которые реагировали в прямой аг-глютинационной пробе. Аутоантитела экранировали антигенные эпитопы, поэ­тому при первичном исследовании эритроциты больного были тестированы как K-k-Kp(a-)Kp(b~). Фенотип больного мог быть расценен как K_null, если бы не положительная реакция с анти-^-антителами, указывающая на присутствие в эритроцитах Kell-гликопротеина. Позднее реакции с антителами анти-k и анти-Кр^ь стали положительными. Молекулярно-генетическими исследованиями по­казано отсутствие каких-либо мутаций в гене KELобследуемого. Пациент ока­зался гомозиготным по генам киКр .

При обследовании 87 665 доноров китайцев Yang и соавт. [83] выявили 2 женщин с фенотипом К_о. Последующие молекулярно-генетические исследо­вания показали, что у них имелись точковые мутации с образованием стоп-кодонов. В одном случае были затронуты экзоны 3 и 4 -185insT (Ser 62 Phe) и стоп-кодон в экзоне 4. В другом случае выявлена мутация G 715 Т (Glu 239 Stop) в экзоне 7. Указанные мутации обнаружены впервые. Частота фенотипа К_о сре­ди китайцев составила 0,00228 %.

В системе Kell найден аллель, кодирующий синтез антигенов К и Кр^а од­новременно (Kormoczi и соавт. [34]). При рутинном Kell-фенотипировании обнаружены два не связанных родством лица с фенотипом К+к+Кр(а+Ь+). Они имели генотип ККр^а/кКр^ь. С помощью проточной цитофлюориметрии установлено, что присутствие Кр^ав положении цис оказывает выраженное ингибирующее действие на экспрессию антигена К, которая снизилась на 80 % по сравнению с таковой в контрольных образцах K+k+Kp(a-b+). При секвенировании ДНК обследованных лиц выявлены специфические коди­рующие нуклеотиды Т 578 для К и Т 841 для Кр^а соответственно. Антиген К не выявлялся пятью из использованных образцов моноклональных анти-К-антител.