Поиск по сайту
- Вы здесь:
-
Главная
-
Медицинские автомобили
-
book
-
Группы крови человека
- Полиагглютинабельность эритроцитов
Наш блог
Это странная ситуация: вы соблюдали все меры предосторожности COVID-19 (вы почти все время дома), но, тем не менее, вы каким-то образом простудились. Вы можете задаться...
Как диетолог, я вижу, что многие причудливые диеты приходят в нашу жизнь и быстро исчезают из нее. Многие из них это скорее наказание, чем способ питаться правильно и влиять на...
Овес-это натуральное цельное зерно, богатое своего рода растворимой клетчаткой, которая может помочь вывести “плохой” низкий уровень холестерина ЛПНП из вашего организма....
Если вы принимаете витаминные и минеральные добавки в надежде укрепить свое здоровье, вы можете задаться вопросом: “Есть ли лучшее время дня для приема витаминов?”
Ты хочешь жить долго и счастливо. Возможно, ты мечтал об этом с детства. Хотя никакие реальные отношения не могут сравниться со сказочными фильмами, многие люди наслаждаются...
Приседания и выпады-типичные упражнения для укрепления мышц нижней части тела. Хотя они чрезвычайно распространены, они не могут быть безопасным вариантом для всех. Некоторые...
Ученые из Стэнфордского университета разработали программу предсказывающую смерть человека с высокой точностью.
Глава Минздрава РФ Вероника Скворцова опровергла сообщение о падении доходов медицинских работников в ближайшие годы. Она заявила об этом на встрече с журналистами ведущих...
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения озвучила тревожную статистику. Она касаются увеличения риска острой кардиотоксичности и роста сопутствующих осложнений от...
Соответствующий законопроект внесен в палату на рассмотрение. Суть его заключается в нахождении одного из родителей в больничной палате бесплатно, в течении всего срока лечения...
Полиагглютинабельность эритроцитов
Bga, Bgb и Bgc
Эритроциты человека содержат некоторое количество HLA-антигенов, присущих лимфоцитам периферической крови и другим ядерным клеткам организма.
Этот факт впервые был установлен в середине 1960-х годов, когда было показано, что эритроцитарные антигены Bga, Bgb и Bgc тесно связаны с антигенами системы HLA (Buchanan и соавт. [13], Chown и соавт. [15], Morton и соавт. 29, 30], Seaman и соавт. [46]). Наличие на эритроцитах антигена Bga неизменно сочеталось с присутствием на лимфоцитах этого человека антигена HLA-B7 (Morton и соавт. [29]), присутствие на эритроцитах антигена Bgb сопровождалось одновременным присутствием на лимфоцитах антигена HLA-B17, антиген Bgc выявлялся на эритроцитах в тех случаях, когда на лимфоцитах присутствовал антиген HLA-A28 (Morton и соавт. [30]).
Nordhagen и Orjasaeter [37, 40] нашли, что эритроциты Bg(c+) реагируют с антителами анти-НЬА-А28 и анти-НЬА-А2, обладающими перекрестной реактивностью.
На эритроцитах нередко достаточно сильно выражены антигены HLA-A10 и HLA-B8 (Morton и соавт. [30], Nordhagen [35]), выявляются также антигены HLA-A9, HLA-B12 и HLA-B15 (Nordhagen [34]).
В то же время эритроциты многих лиц не содержат HLA-антигенов, хотя на лимфоцитах эти антигены отчетливо выявляются (Issitt, Anstee [25], Reid, Lomas-Francis [42]).
По данным Crawford [16], Daniels [19,20] и Nordhagen [35], экспрессия HLA-антигенов у разных индивидов варьирует в широких пределах. У некоторых лиц она неодинакова в разные периоды года.
Степень экспрессии HLA-антигенов на эритроцитах не является строго наследуемой в отличие от специфичности. HLA-антигены, выявляемые на эритроцитах детей, могут отсутствовать на эритроцитах их родителей (Morton и соавт. [29], Nordhagen [36], Seaman и соавт. [46], Van Der Hart [49]).
hdC помощью высокочувствительнного микроколоночного теста, радиоиммунного метода и проточной цитофлюориметрии показано, что эритроциты примерно 50 % доноров связывают aHTH-HLA-антитела (Crawford и соавт. [17, 18], Rivera, Scornik [43]). Все исследованные сыворотки affra-HLA-B7 реагировали с эритроцитами лиц HLA-B7+ (Nordhagen [33]).
По данным Botto и соавт. [11], на эритроцитах расположено от 40 до 550 антигенных участков HLA, на тимоцитах - около 100 тыс. Это объясняет, почему так сложно адсорбировать HLA-антитела эритроцитами, в то время как активность HLA-антител легко устраняется посредством адсорбции лейкоцитами (Morton и соавт. [29, 30], Nordhagen [32, 33]).
У лиц HLA-B7+ на эритроцитах содержится существенно больше антигенных детерминант HLA класса I по сравнению с индивидами HLA-B7- (Botto и соавт. [И], Salama и соавт. [45]). Усиление HLA-экспрессии на эритроцитах отмечено у больных системной красной волчанкой, инфекционным мононуклео-зом, ревматоидным артритом, некоторыми гематологическими заболеваниями (Botto и соавт. [И], Giles и соавт. [23], Morton и соавт. [28, 31]). Сильно выраженная экспрессия антигенов HLA на эритроцитах встречается редко, однако такие случаи в литературе описаны (Van Der Hart и соавт. [49], Nordhagen [38]).
HLA-антигены, присутствующие на эритроцитах, идентичны таковым на всех ядросодержащих клетках (Giles и соавт. [21]). Они представлены гетеро-димерами полипептидных цепей а,, а, и а3 с мол. массой 45 кДа, связанными с р2-микроглобулином - пептидом величиной 10 кДа. Специфические HLA-субстанции, циркулирующие в плазме крови, имеют мол. массу 39 кДа и отличаются от HLA-субстанций, располагающихся на эритроцитах, отсутствием гидрофобного участка (Giles и соавт. [22], Krangel [26], Nordhagen [35]).
Антигенные эпитопы HLA контролируются генным локусом HLA, расположенным на коротком плече хромосомы 6, Р2-микроглобулин контролируется геном, находящимся на хромосоме 15 (Roitt [44]).
Анти-НЬА-антитела, реагирующие с эритроцитами, могут быть ингиби-рованы специфическими водорастворимыми HLA-субстанциями, содержащимися в плазме лиц, имеющих соответствующие антигены на лимфоцитах (Р.А. Голубенко [1-4], А.А. Рагимов [7], Nordhagen [35], Swanson [47]). Данный факт позволил Swanson и Sastamoinen [48] высказать предположение, что антигены HLA, выявляемые на эритроцитах, по своему происхождению не являются эритроцитарными, а адсорбируются на эритроциты из плазмы.
Существует и другая точка зрения, согласно которой эритроциты могут нести остатки антигенов HLA, которые синтезируются в ранних ядросодержащих предшественниках эритроцитов. При определенных условиях возможна их неполная утрата зрелыми клетками (Brown и соавт. [12], Harris, Zervas [24]).
Giles и соавт. [22] показали, что обработка эритроцитов хлорохином* приводит к разрушению р2-микроглобулина и утрате HLA-антигенной активности. Цепи а , а и а при этом также подвергаются конформационным изменениям. После контакта с очищенным р2-микроглобулином эритроциты, обработанные хлорохином и утратившие HLA-антигены, восстанавливали свою HLA-антигенную активность.
Препарат из группы производных 4-аминохинолина, тормозит синтез нукле-иновых теШшштиак, оказывает умеренно выраженное иммуносупрессивное действие.
Установлено (Botto и соавт. [11]), что концентрация р2-микроглобулина в эритроидных клетках-предшественниках снижалась по мере их превращения в зрелые эритроциты. Одновременно клетки утрачивали HLA-антигенную активность.
HLA-антигены эритроцитов устойчивы к обработке протеолитическими ферментами и сульфгидрильными реагентами.
Клиническое значение
Клиническое значение антигенов HLA, присутствующих на эритроцитах, не столь велико в сравнении с собственно эритроцитарными антигенами.
Latoni и соавт. [27] описали один случай гемолитической посттрансфузион-ной реакции, обусловленной анти-НЬА-антителами, однако приведенные авторами данные не позволили сделать окончательное заключение относительно истинной причины имевшей место гемолитической реакции
Имеются сообщения об ускоренном разрушении радиоактивно меченных эритроцитов invivoпод действием анти-НЬА-антител, однако разрушение затрагивало лишь небольшую часть эритроцитов, циркулирующих в кровотоке (Nordhagen, Aas [39], Panzer и соавт. [41], Van Der Hart и соавт., [49]).
ГБН, обусловленная анти-НЬА-антителами, не описана. Эти антитела могут быть причиной привычного невынашивания беременности (Е.А. Зотиков и др. [5], O.K. Сницарук и соавт. [8]), а также лейкопении новорожденных (Н.С. Кисляк и др. [6], Н.А. Финогенова и др. [9, 10]).
Анти-НЬА-антитела в некоторых случаях затрудняют идентификацию анти-эритроцитарных антител и могут искажать результаты индивидуального подбора крови донора и реципиента, показывая положительный результат в непрямой реакции Кумбса.
Как отмечают Champagne и соавт. [14], указанные затруднения устраняют посредством обработки эритроцитов растворами хлорохина или ЭДТА-глицин-НС1, которые ингибируют на эритроцитах антигены HLA, но не оказывают влияния на экспрессию истинно эритроцитарных антигенов.
Отдельные публикации свидетельствуют о том, что HLA-антигены создают определенные трудности при производстве панелей стандартных эритроцитов для выявления и идентификации антиэритроцитарных антител, поскольку некоторые высокоактивные анти-НЬА-антитела реагируют с эритроцитами и вводят исследователей в заблуждение, создавая видимость присутствия антиэритроцитарных антител.
С подобной проблемой сталкивались производители типирующих реагентов, использовавшие плазму гипериммуннных доноров, которая содержала примесь высокоактивных анти-НЬА-антител. Замена аллогенных сывороток монокло-нальными реагентами устранила проблему
Антиген Sd(a++) (Cad)
Антиген Sda встречается с частотой около 91 % и обладает выраженной вариабельностью экспрессии. Чрезвычайно редко встречается его высокоагглю-тинабельная форма, обозначенная как Sd(a++) или Cad. Иммунодоминантной группировкой антигена Sda является N-ацетил-О-галактозамин, связанный с галактозой через р-связь. Эритроциты фенотипа Sd(a++) агглютинируются лек-тинами Dolichosbiflorisи Helixpomatia, однако их можно различить от Тп-активированных клеток с помощью лектинов Salviasclareaи Leonuruscardiaca.
Дисэритропоэтическая анемия типа II (HEMPAS)
Эритроциты больных с редкой патологией - дисэритропоэтической анемией типа II, обусловленной гомозиготностью по редкому рецессивному гену, агглютинируются при 20 °С или подвергаются лизису при 37 °С в присутствии специфических антител класса IgM, связывающих комплемент. Такие антитела присутствуют в сыворотках крови примерно одной трети здоровых лиц (Crookston и со-авт. [32, 33]). Эритроциты больных несут ослабленный антиген Н, в то время как экспрессия i повышена (Bird, Wingham [19], Crookston и соавт. [32, 33], Rochant, Gerbal [85]). В литературе описано более 250 случаев указанной патологии, большинство больных - выходцы из Южной Италии (Wickramasinghe [103]).
Биохимические дефекты эритроцитов больных с HEMPAS (врожденная дизэритропоэтическая анемия тип II) обусловлены дефицитом N-ацетилглюкозаминтрансферазы II или а-маннозидазы П. Дефицит этих ферментов обусловливает необычное разветвление N-гликанов гликопротеинов, особенно на протеинах полос 3 и 4.5 (транспортер глюкозы), содержащих повторяющиеся ацетиллактозаминовые группировки (Fukuda и соавт. [43,44]). В свою очередь это приводит к появлению криптантигена, полиагглютинабельности эритроцитов и активации системы комплемента. При этом в избыточном количестве экс-прессируются N-ацетиллактозаминилцерамиды, обладающие i-антигенной активностью. Возможной причиной является дефект регуляторных генов, ответственных за транскрипцию. При обследовании итальянских семей был картирован патологический ген CDAN2, расположенный на хромосоме 20 в позиции 20qll.2 (Gasparini и соавт. [45]). У больных из других этнических групп (ирландцы, англичане) выявлена другая мутация в участке сплайсинга, приводившая к нарушению транскрипции гена МП (Fukuda [42], Wickramasinghe [103]).
Полиагглютинабельность NOR
Полиагглютинабельность NOR обнаружена в 2 семьях. Ген, ответственный за появление этого феномена имел доминантный тип наследования (Harris и соавт. [49], Kusnierz-Alejska и соавт. [66]). Всего было выявлено 9 индивидов в 2 поколениях, их эритроциты агглютинировались IgM-антителами 70-75.
АВО-совместимых сывороток взрослых. Сыворотки новорожденных с их эритроцитами не взаимодействовали. Реакции эритроцитов фенотипа NOR усиливались после их обработки папаином и сиалидазой, но ослабевали в результате действия а-галактозидазы. Полиагглютинабельность NOR полностью устранялась при добавлении жидкости из кист яичников. Путем тонкослойной хроматографии гликолипидов из эритроцитов NOR была выделена одна большая полоса и несколько полос, значительно меньших размеров. Эти клетки содержали нейтральные гликолипиды в сочетании с необычной олигосахарид-ной структурой, вероятно, связанной с а-галактозными остатками (Kusnierz-Alejska и соавт. [66]).
Полиагглютинабельность HydePark
Полиагглютинабельные свойства эритроцитов в сочетании с редким вариантом гемоглобина выявлены в одной большой южноафриканской семье. Среди членов семьи были представители различных этнических групп. Обследованы 35 членов семьи, у 12 был редкий вариант гемоглобина Hyde Park и полиагглютинабельные эритроциты. Этого не отмечено среди остальных 23 лиц (Bird и соавт. [8]). Поскольку ранее не наблюдалось сочетания редких типов гемоглобина и полиагтлютинабельности, термин «Гайд-Парк» был предложен для обозначения еще одного вида полиагглютинабельности.
Эритроциты фенотипа О, N+ Hyde Park в серологических реакциях демонстрировали следующие характеристики.
1. Агглютинация с небольшим (7 из 40) количеством нормальных сывороток здоровых лиц.
Повышенные агтлютинабельные свойства с лектинами Viciagramineaи Ulexeueropaeus, аллогенными анти-I и анти-i, реакции обычной интенсивности с кроличьими и моноклональными антителами анти-N.
- Агглютинация с анти-Tn МКА, но отрицательные результаты реакции с лектином Salviasclarea, специфичным в отношении антигена Тп.
- Агглютинация с лектинами Glycinesoja, Sophorajaponicaи Arachishy-pogaea, выявляющими десиалилированные О-гликаны.
- Агглютинация с лектином Viciahyrcanica, специфично реагирующим с N-ацетиглюкозамина.
Такие серологические характеристики в сочетании с результатами биохимических исследований дают основания полагать, что причиной полиагглютинабельности в данном случае являются две не связанные между собой аномалии. Одна из них связана с необычным сиалилированием О-гликанов, другая | с присутствием N-ацетиглюкозаминовых остатков на N-гликанах белков полос 3 (транспортер анионов) и 4.5 (транспортер глюкозы).(King и соавт. [62]). Природа взаимосвязей между указанными аномалиями неясна.
Полиагглютинабельность с неопределенным статусом
Полиагглютинабельность VA
Полиагглютинабельность VA встречается очень редко. Эритроциты с этим типом полиагглютинабельности реагируют с лектинами Arachishypogaeaи Dolichosbifloris, однако дают картину смешанной агглютинации с лектином Helixpomatia(Graninger и соавт. [46, 47]). Сочетание данного вида полиагглютинабельности со слабым антигеном Н наводит на мысль, что она может являться результатом действия микробной а-фукозилазы (Beck и соавт. [5], Graninger и соавт. [47]). В случае, описанном Graninger и соавт. [46, 47], VA-полиагглютинабельность носила персистирующий характер и сопровождалась гемолитической анемией. В другом случае (Beck и соавт. [5]) VA-полиагтлютинабельность эритроцитов сочеталась с Тк-полиагтлютинабельностью.
Полиагглютинабельность Тг
Полиагглютинабельность Тг выявлена всего у одного индивида (Reid и соавт. [84]). Характер реагирования эритроцитов Тг с панелью лектинов оказался уникальным (см. табл. 33.1), и это отличало их от всех ранее известных. Тг-активные эритроциты реагировали с МКА анти-Т+Тп и анти-Tk. Результаты тестов с лектинами на окрашивание гликофоринов А, В и С в сочетании с повышенной элек-трофоретической подвижностью белка полосы 3 позволили предположить, что в этом случае снижено сиалилирование как N-, так и О-гликанов с наличием остатков pi —> 4Gal и pi —> 3Gal. Высказано предположение, что полиагтлютинабель-ность Тг может быть результатом нарушения функций одной из гликозилтрансфе-раз, предположительно а1,6-сиалитрансферазы (Reid и соавт. [84]).
Тп-активация
Известен вариант Тп-полиагтлютинабельности, при которой наблюдается смешанная агглютинация эритроцитов. Полиагглютинабельность, таким образом, распространяется лишь на часть клеток (Daussett и соавт. [36] Moreau и соавт. [75]). От 30 до 90 % клеток агглютинируются антителами анти-Tn, остальные имеют фенотип Tn(-) (Levene и соавт. [67]). Эпитопы Тп, подобно Т, расположены на О-связанных олигосахаридах гликофоринов А и В (Dahr и соавт. [35]). Антигенная детерминанта Тп представляет собой /У-ацетилгазактозаминовый остаток, присоединенный к серину или треонину (Dahr и соавт. [34, 35], Sturgeon и соавт. [97]). Иногда он связан с сиаловыми кислотами и образует антигенную детерминанту сиалил-Тп (Kjeldsen и соавт. [64]).
Антигенная детерминанта Тп иногда экспрессируется в связи с дефектом биосинтеза олигосахаридов. Причина этого - соматическая мутация, но не воздействие микробных протеаз (Bird и соавт. [14, 24]). Лиганд Тп является биосинтетическим предшественником Т - типичного сиалотетрасахарида, свойственного эри-троцитарным сиалогликопротеинам. На эритроцитах, обладающих свойствами Тп-полиагглютинабельности, трансформации детерминанты Тп в Т не происходит из-за дефицита фермента Т-трансферазы - р-З-Б-гапактозилтрансферазы (Berger и соавт. [6], Cartron и соавт. [29]). Недостаточное содержание указанного энзима обусловлено соматической мутацией полипотентных стволовых кроветворных клеток и клональной пролиферацией Тп-активированных эритроцитов, тромбоцитов, гра-нулоцитов и лимфоцитов (Brouet и соавт. [28], Cartron, Nurden [30], Vainchenker и соавт. [100]). Тп-активированные эритроциты не являются полностью дефектными по содержанию Т-трансферазы, некоторое количество нормальных тетрасахаридов на таких клетках несут молекулы гликофоринов (Blumenfeld и соавт. [27]).
Тп-активированные эритроциты несут ослабленные антигены М и N, на них снижена экспрессия криптантигена Т (Bird и соавт. [20], Sturgeon и соавт. [97, 98]). Обработка эритроцитов папаином приводит к разрушению антигена Тп (Gunson и соавт. [48], Mylleyla и соавт. [76]).
Иммунодоминантной группировкой антигена Тп является iV-ацетилгалактозамин, поэтому Тп-активированные эритроциты агглютинируются лектинами, распознающими антиген А, такими как Dolichosbiflorisи Helixpomatia(Bird и соавт. [14], Gunson и соавт. [48], Mylleyla и соавт. [76]). Лектин Salviasclareaболее специфичен по отношению к антигену Тп (Bird, Wingham [17]). Эритроциты, несущие антиген Тп, интенсивнее аплютинируются сыворотками, содержащими антитела анти-А (Mylleyla и соавт. [76]). Получено большое количество мышиных МКА со специфичностью анти-Tn (Metcalfe и соавт. [73], Longenecker и соавт. [71], Kjeldsen и соавт. [64], Hironashi и соавт. [51], Roxby и соавт. [87], Springer и соавт. [96], Takahashi и соавт [99], Numata и соавт. [78], Bigbee и соавт. [7], King и соавт. [63], O'Boyle и соавт. [79]). Некоторые из них перекрестно реагировали с сиалил-Тп-детерминантой (O'Boyle и соавт. [79]). Все указанные моноклональные реагенты, подобно аллоген-ным анти-Tn, присутствующим у большинства взрослых, реагировали только с Тп-положительной популяцией эритроцитов и, таким образом, демонстрировали картину смешанной агглютинации.
Tn-полиагглютинабельность часто ассоциирована с гемолитической анемией, лейкопенией и тромбоцитопенией (Beck [3], Mollison и соавт. [74]).
Иногда Tn-полиагглютинабельность выявляли у здоровых доноров крови (Beck [3], Mylleyla и соавт. [76], Bird и соавт.. [25]).
Tn-полиагглютинабельность чаще временная, однако известны варианты, имеющие персистирующий характер, и переходящие из одного типа полиагглю-тинабельности в другой (Bird и соавт. [24]).
Имеются три сообщения о транзиторной форме Тп-полиагглютинабельности у маленьких детей. Эта форма, вероятно, обусловлена задержкой формирования полноценной Т-трансферазы (Wilson и соавт. [104], Schultz и соавт. [89], Rose и эййавт. [86]).
Bigbee и соавт. [7] с помощью МКА анти-Tn и проточной цитофлюориме-трии показали, что содержание Tn-актививрованных эритроцитов в периферической крови здоровых доноров менее 1 х Ю-6.
Baldwin и соавт. [2], Bird и соавт. [24] наблюдали больных острым миелолей-козом, эритроциты которых проявляли Тп-полиагглютинабельность.
Ness и соавт. [77] высказали предположение, что Тп-полиагглютинабельность может являться маркером предлейкемического состояния. Соответственно, такие лица должны быть подвергнуты тщательному клиническому обследованию.
В одном из исследований Тп-активные клетки были выявлены в 5 из 725 пун-ктатов костного мозга. По результатам этих 5 анализив у 2 лиц был впервые диагностирован острый миелолейкоз, у 3 он развился позднее (Roxby и соавт. [88]). Тп-активные клетки исчезали на фоне проводившейся химиотерапии. Их обнаруживали в пунктатах костного мозга на протяжении 8-12 мес. до того, как в периферической крови появились Тп-полиагтлютинабельные эритроциты. У некоторых больных острым миелолейкозом количество Тп-активных эритроцитов и грануло-цитов в периферической крови, а также Тп-активных эритроидных предшественников в костном мозге увеличивалось по мере прогрессирования заболевания (Roxby и соавт. [87, 88]). Тп-полиагпгютинабельность эритроцитов была также ассоциирована с миелодисплазическими состояниями (Bird и соавт. [25], Janvier и соавт. [57]).
Полиагглютинабельность опухолевых клеток
Т и Тп являются криптантигенами и присутствуют на эпителиальных клетках в области карбогидратных цепей гликопротеинов и гликолипидов. Установлено, что указанные антигены экспрессирует до 90 % клеток карцином (как первичных опухолей, так и метастазов) в результате незавершенного синтеза нормальных групповых антигенов (Springer [95]). Сиалилированная форма Тп также нередко экспрессируется клетками карцином. Вместе с тем сиалил-Tn выявляли также в здоровых тканях. Было установлено, что преобладание эпитопной плотности Тп по сравнению с Т на клетках опухолей свидетельствует о их высокой способности к метастазированию. Установление корреляции между злокачественностью опухоли и снижением титра циркулирующих анти-Т-антител привело к разработке диагностического теста на озлокачествление, а иммунотерапия с помощью вакцин, приготовленных из Т-и Tn-активированных клеток, оказалась эффективной при профилактике рецидивов рака молочной железы (Desai [37]).
Анти-Tk МКА реагировали с 48 % клеток карцином толстой и прямой киш-Ш человека (Meichenin и соавт. [72]). Вакцинация крыс Тк-активированными эритроцитами предупреждала их заражение опухолями. При этом протектив-ный эффект наблюдали только в тех случаях, когда животным прививали опухши Тк+, но не Тк-£*
Th-активация
Th-полиагглютинабельность, изученная Bird и соавт. [23] в 1978 г., отличалась от Т-полиагглютинабельности реакцией эритроцитов с лектинами и, как позднее было показано, представляла собой начальную форму Т-активации.
Th-активация эритроцитов инициировалась сиалидазой бактерий Corynebacteriumaquaticum(Sondag-Thull и соавт. [94]). Сиалидаза Vibriochol-eraeв условиях мягкого гидролиза также вызывала Th-активацию invitro. Высвобождение сиаловых кислот в количестве менее 20 мкг на 1010 эритроцитов вызывало Th-активацию. Применение более высокой концентрации сиали-даз приводило к Т-активации (Sondag-Thull и соавт. [94]). Возможно, в результате Th-активации происходит отщепление одного остатка сиаловой кислоты от тетрасахарида, экспрессирующего терминальную галактозу, но не от дисахари-Да Galpl ж 3GalNAc, характерного для Т-активации.
Эритроциты 22 из 200 новорожденных обладали признаками Th-активации без *1Шшагтаотинабельности, у матерей 6 из них также наблюдалась Th-активация (Wahl и соавт. [102]). Больной перитонитом, развившимся в результате перфорации стенки толстой кишки опухолью, умер в результате выраженного внутрисосуцистого гемо лиза, который мог быть обусловлен Th-активацией эритроцитов (Levene и соавт. [681) Не исключено, что персистирующая форма Th-активации клеток крови явля ется результатом незавершенного биосинтеза. Th-активация при отсутствии инфекции выявлена у 5 из 7 детей, больных гипопластической анемией (Herman и соавт. [50]), а также у больного миелодисплазией (Janvier и соавт. [57]).
Тк-активация
Криптантиген Тк появляется после обработки эритроцитов папаином. Тк-активация не сопровождается вымыванием из эритроцита сиаловой кислоты (Bird, Wingham [21]) и отличается от Т-активации характером реагирования активированных эритроцитов с лектином GSII из семян Griffoniasimplicifolia. Последний реагирует только с Tk-активированными клетками и считается Тк-специфическим (Judd и соавт. [61]).
Лектин Viciahyrcanicaсодержит разделяемые Т- и Tk-специфические фракции, реагирующие с Т- и Tk-антигенами соответственно (Liew, Bird [69]).
Путем иммунизации мышей эритроцитами, модифицированными эндо-р-галактозилазой, были получены моноклональные антитела анти-Tk (Meichenin и соавт. [72]).
Тк-полиагглютинабельность отмечается при инфекции, вызываемой Bacteroudesfragilis(Inglis и соавт. [54]). В качестве других инфекционных агентов, способных вызвать Tk-полиагглютинабельность, отмечены Serraciamarc-escens, Candidaalbicans, Aspergillusniger(Judd и соавт. [58, 59]). Эндо- и экзо-Р-гликозилазы, вырабатываемые этими микроорганизмами, расщепляют оли-госахариды в положении Galpl —> 4GlcNAc. Эти олигосахариды обусловливают АВН- и Ii-активность и содержат терминальные N-ацетилгалактозаминовые остатки, являющиеся Tk-рецепторами (Doinel и соавт. [38, 39], Judd [60]).
Таблица 33.2 Биохимическая природа полиагглютинабельности
|
Полиагглютинабельность |
Обусловливающая структура |
|
Т |
Gaip 1 ^3GalNAc-Ser/ Thr |
|
Тп |
GalNAc-Ser/Thr |
|
Сиалил-Тп |
GalNAc-Ser/Thr 6 t NeuAca2 |
|
Нормальный полисахарид |
NeuAca2->3Gal|31 ^3GalNAc-Ser/Thr т NeuAca2 |
Эритроциты, подвергшиеся Тк-трансформации, содержат уменьшенное количество антигенов АВО и Ii (Andreu и соавт. [1], Inglis и соавт. [55]). Активность лекти-на GSII ингибировалась N-ацетилглюкозамином (Judd и соавт. [61], Iyer и соавт. [56]). Моноклональные антитела анти-Тк нейтрализовались полисахаридом GlcNAcpl —► 3Gaipi m4Galc(3 —> R, адсорбированным на силиконовых частицах (Meichenin и соавт. [72]). Эндо-Р-галактозидазы, продуцируемые Bacteroudesfragilis, Escherihiafreun-dtiи Flavobacteriumkeratolyticus, также оказались способными вызвать Тк-активацию эритроцитов invitro(Meichenin и соавт. [72], Doinel и соавт. [39], Liew и соавт. [70]).
Tk-полиагглютинабельность часто ассоциирована с приобретенным В-анти-геном.
Скрытый антиген Тх
Антиген Тх на эритроцитах детей с пневмококковой инфекцией идентифицировали Bird и соавт. [26]. Модификацию эритроцитов вызывали также суперна-танты культур пневмококков, выделенные от больных. Антиген Тх отличается от Т реакцией с лектином Viciacretica. Обработка Тх-активированных эритроцитов папаином приводила лишь к незначительному снижению экспрессии антигена Тх (Bird и соавт. [26]). У одной женщины с миелодисплазическим синдромом, у которой отсутствовали признаки инфекции, описана персистирующая форма Тх-полиаггаютинабельности, наблюдавшейся в течение 5 лет (Pisacka и соавт. [80]).
Приобретенный В-антиген
Феномен приобретенного антигена В описан в разделе Системы АВО и Hh. Он обусловлен микробным деацетилированием, превращающим /У-ацетилгалактозамин на эритроцитах группы А(П) в галактозамин. Такая модификация приводит к появлению на эритроцитах В-подобного антигена, который распознают многие образцы моноклональных анти-В-антител. Эритроциты с приобретенным антигеном В часто проявляют Тк- и иногда Т- или ТЪ-полиагглютинабельность.
Способность эритроцитов агглютинироваться многими сыворотками полиагглютинабельность - не связана с их принадлежностью к той или иной группе крови. Эритроциты приобретают полиагглютинабельные свойства под действием бактериальных и вирусных гликозилаз. Эти ферменты, отщепляя поверхностные моноса-харидные и ацетильные группы гликопротеинов и гликолипидов мембраны эритроцитов, высвобождают скрытые в ее толще криптагглютиногены (криптантигены). Модифицированные таким образом эритроциты легко агопогинируются иммуноглобулинами класса М, присутствующими в крови подавляющего большинства людей.
Гомозиготность по редким генам и соматические мутации, нарушающие синтез олигосахаридов на клеточной мембране, также могут служить причиной появления криптантигенов на эритроцитах (см. сводку 33.1).
Весьма ценными для изучения и идентификации типов полиагглютинабель-ности оказались лектины. Не будучи по своей природе иммуноглобулинами, они тем не менее реагируют с определенными структурами мембраны эритроцитов как специфические антитела (табл. 33.2) (Beck [3, 4], Bird [10, 11, 13], Horn [52], Judd [58, 59], Levene и соавт. [67], Vaith, Uhlenbruck [101]).
Приобретенная полиагглютинабельность
Приобретенная полиагглютинабельность может быть микробного и не микробного генеза.
Полиагглютинабельность микробного генеза наблюдается при септицемии, кишечных, респираторных, раневых инфекциях, опухолях и обструктивных процессах, когда микробные ферменты в изобилии попадают в кровоток (Beck [3], Bird [10]). Кратковременные эпизоды полиагглютинабельности эритроцитов описаны у здоровых лиц. Это имеет место при бессимптомных инфекциях (Judd [58], Bird [10]).
Криптантигены на эритроцитах больных выявляют с помощью лек-тинов иногда задолго до развития симптомов инфекции (Bird [10]). Полиагглютинабельность микробного генеза имеет переходящий характер: ослабевает по мере уменьшения клинических проявлений инфекционного заболевания и прекращается по выздоровлении.
Эритроциты могут обрести полиагглютинабельные свойства invitroв результате контаминации бактериями или обработки ферментами растительного, животного и бактериального происхождения.
Сводка 33.1. Классификация полиагглютинабельности I. Приобретенная
Микробная - высвобождение микробными энзимами криптантигенов Т, Tk, Th, Tx и приобретенного В-антигена. 1.2 Немикробная (персистентная) - блокада биосинтеза соматическими мутациями, образование криптантигенов Тп и Th. П. Наследственно обусловленная. Наследование антигенов Sd(a++) (Cad), HEMPAS, NOR и Hyde Park. HI. Неизвестного генеза Образование антигенов VA и Tr.
Т-активация
В 30-х годах XX века Hubener, Thomsen и Friedenreich [41] описали явление Т-активации, или Т-полиагглютинабельности, получившее название «феномен Хюбнера - Томсена - Фриденрейха». Этот серологический феномен является результатом воздействия на эритроциты микробных сиалидаз, которые расщепляют О-связанные дисиалотетрасахариды, входящие в состав сиалогликопротеинов, гликофорина А и В, а также ряда других гликопротеинов и гликолипидов.
Антигенная Т-детерминанта располагается в области терминальной D-галактозы, связанной в положении 01,3 с N-ацетилгалактозамином (табл. 33.2). Активация антигенной Т-детерминанты приводит к ослаблению экспрессии антигенов М и N системы MNS (Vaith, Uhlenbruck [101]) и одновременно уменьшает электрический заряд эритроцитов. Такие клетки приобретают способность агглютинироваться лектином Glycinesoja(Bird [12]). Сиалидазы бактерий Clostridiumperfringens, Vibriocholerae, пневмококков и вируса инфлюэнцы также способны вызвать активацию криптантигена Т. Последняя чаще происходит у детей, чем у взрослых. Особенно часто Т-активация отмечалась у детей с нарушениями функции тонкого кишечника (Seger и соавт. [91,92]).
Таблица 33.1 Реакции лектинов с крипт- и панагглютиногенами
|
Лектин |
T |
Th |
Tk |
Tx |
Tn |
Sd (a++) |
Hyde Park |
Tr |
Источник |
|
Arachis hypogaea |
+ |
+ |
+ |
+ |
НД |
- |
СЛ |
+ |
[9] |
|
Vicia hyrcanica |
+ |
+ |
+ |
|
НД |
- |
+ |
нд |
[69] |
|
Vkia cretica |
+ |
+ |
- |
,■ - |
ВД |
- |
СЛ |
нд |
[22] |
|
Vicia villosa |
+ |
+ |
- |
|
+ |
+ |
+ |
+ |
[18] |
|
Griffonia simplicitofolia |
- |
(Ц* -А |
+ |
- |
нд |
- |
+ |
+ |
[61] |
|
Medicago disciform^ |
+ |
+ |
{4j»j |
- |
нд |
нд |
+ |
нд |
[15] |
|
Dolichos bifloris |
Ьшя |
^„ |
ijjgft^ |
- |
+ |
+ |
- |
нд |
[12] |
|
Salvia sclarea |
- |
-. |
- |
- , |
+ |
- • |
- |
+ |
[17] |
|
Salvia horminum |
- |
- |
- |
,^~m^ |
+ |
+ |
СЛ |
+ |
Ш] |
|
Leonurus cardiaca |
ел |
uJZLa |
v.^J |
Z:Mil |
l^&z., |
+ |
- |
нд |
[16] |
|
Glycine soja |
+ |
-„£-,.,, |
^£-j |
taaj |
+ |
+ |
0/± |
нд |
П2] |
Ъимечание. ел 1 слабая реакция, «0/±» 1 реакция толыю с сильным образцом, нд - нет данных.
Как «арахисассоциированную полиагтлютинабельность» обозначают активацию криптантигенов Т, Tk, Th, Tx или Тг. Указанные детерминанты реагируют с лектином Arachishypogaea. Эритроциты 52 из 9672 больных агглютинировались этим лектином, однако лишь у одного имела место полиагтлютинабельность (Rawlinson, Stratton [83]).
Получены моноклональные антитела со специфичностью анти-Т. Для этого предварительно иммунизировали грызунов десиалилированными эритроцитами (Metcalfe и соавт. [73], Rahman и соавт. [82], Seitz и соавт. [93]) или синтетическими гликоконъюгатами (Clausen и соавт. [31], Longenecker и соавт. [71]).
Некоторые моноклональные антитела анти-Ьеа перекрестно реагировали с Т-активированными эритроцитами Le(a-) (Pisacka, Strambergova [81]).
Т-полиагглютинабельность иногда сочеталась с развитием гемолиза (Mollison и соавт. [74]). Не установлено, обусловлено это хрупкостью мембраны эритроцитов или способностью анти-Т-антител активировать комплемент. Уремический синдром и гемолиз, отмеченный у детей при пневмококковой инфекции, мог быть опосредован бактериальными сиалидазами.
Гемолитические реакции у новорожденных с некротическим энтероколитом после переливания им плазмы или цельной крови Mollison и соавт. [74], Engelfriet и соавт. [40] связывали с наличием у детей Т-активированных эритроцитов, с которыми реагировали анти-Т-антитела, содержащиеся в использованных трансфузионных средах.
Т-активация эритроцитов, тромбоцитов и эпителия почечных клубочков описана Klein и соавт. [65], Seger и соавт. [90] у больных гемолитической анемией, тромбоцитопенией и почечной недостаточностью соответственно.
Лейкоциты и тромбоциты лиц, имевших Т-полиагглютинабельные эритроциты, экспрессировали Т-антиген (Hysell и соавт. [53]).
