Биосинтез. Растворимые формы

Биосинтез

Для биосинтеза вещества i требуется последовательное воздействие снача­ла р1,3-Л^-ацетилгалактозаминтрансферазы, а затем р1,4-]У-ацетилгалактоза-минтрансферазы. Антиген i превращается в антиген I под действием pi,6-iV-ацетилгалактозаминтрансферазы, которая обеспечивает разветвление углевод­ных остатков (Feizi [40], Hakomori [67], Koscielak и соавт. [89], Piller и соавт. [119],FukudaHcoaBT. [52]).

Клетки яичников китайских хомячков (линия СНО) обычно экспрессиру-ют антиген i, а антиген I на них отсутствует. Bierhuizen и соавт. [7] примени­ли метод трансфекции генов фукозил- и ацетилгалактозаминтрансферазы. Этот эксперимент привел к экспрессии на клетках СНО I-активных структур. Далее авторам удалось клонировать ген ЮпТ, обеспечивающий разветвление 1-цепей и формирование собственно антигена I (Bierhuizen и соавт. [6]).

В настоящее время аминокислотная последовательность фермента, кодируе­мого геном / (ЮпТ) расшифрована (рис. 27.1).

Рис. 27.1. Аминокислотная последовательность гена pGlcNAc-трансферазы, формиру­ющего антиген I.

Фермент, обеспечивающий разветвление I-цепей, обладает низкой актив­ностью в период внутриутробного развития организма, и это объясняет низ­кий уровень экспрессии антигена I у новорожденных. При этом i-антигенная активность указанных цепей высокая (Bierhuizen и соавт. [6, 7]). На эритроци-Ж взрослых с фенотипом i имеются неразветвленные цепи олигосахаридов НЯНИ мутации или делеции гена ЮпТ, что приводит к утрате активности(Yu и соавт. [185]). Присутствие нормальных количества вещества в слюне, плазме и гудном молоке лиц с фенотипом i дает основания полагать что существует несколько вариантов I-трансфераз, активность кото­рых проявляется в различных тканях организма.

Растворимые формы

Антиген I присутствует в слюне, что было установлено с помощью мето­да нейтрализации специфических антител (Burnie [12], Marsh и соавт. [101], Dzierzkowa-Borodej и соавт. [35]). Образцы слюны 181 донора ингибировали анти-1-антитела независимо от наличия других групповых субстанций, присут­ствующих в слюне: ABO, H и Lewis (Dzierzkowa-Borodej и соавт. [35]). Однако с одним образцом анти-1-антител были получены результаты, которые указыва­ли на более высокую концентрацию вещества I в слюне лиц, не выделяющих субстанции А, В и Н, по сравнению с лицами, выделяющими их. Эта находка не явилась неожиданной, поскольку у невыделителей отсутствует Н-трансфераза, способная присоединять фукозу к 1-активным цепям (Rouger и соавт. [145, 146]). Слюна лиц с фенотипом «взрослый i», не выделяющих субстанции А, В и Н, содержит нормальное количество вещества I в отличие от слюны лиц, выде­ляющих указанные групповые субстанции.

Вещество I присутствует в большем количестве в грудном молоке, чем в слюне. Молоко гораздо сильнее ингибировало активность сывороток анти-1 (Burnie [12], Marsh и соавт. [101], Dzierzkowa-Borodej, Osinska [34]). По на­блюдениям Dzierzkowa-Borodej, Osinska [34], молоко женщины с фенотипом «взрослый i» содержало нормальное количество субстанции I и вызывало инги-бицию анти-1-антител, содержащихся в сыворотке ее крови.

В слюне присутствует также субстанция i, о чем свидетельствует спо­собность слюны нейтрализовать некоторые анти-ьсыворотки (Burnie [12], De Boissezon и соавт. [25]).

В грудном молоке наряду с субстанцией I обнаружена субстанция i (Marsh и соавт. [98], Burnie [12]).

Как показали Rouger и соавт. [147], некоторые сыворотки анти-1 ингибирова-лись плазмой крови I-положительных лиц, что указывало на присутствие этой антигенной субстанции в плазме крови. При этом установлено, что содержа­ние вещества I в плазме новорожденных составляет 25 % от его концентрации в плазме взрослых.

Плазма взрослых, имевших фенотип i, содержала нормальные количества субстанции I. Снижение концентрации вещества I отмечено у лиц с редким фе­нотипом I-i- (Rouger и соавт. [145]). В отличие от слюны содержание вещества I в плазме не зависело от статуса выделительства субстанций А, В и Н и их ко­личества в плазме (Rouger и соавт. [145-147]).

Гемагглютинационная активность антител анти-i угнеталась сыворотка-Ш1<или плазмой крови большинства взрослых и новорожденных (Burnie [12], ^ЛBoissezon и соавт. [25], Rouger и соавт. [147], Cooper, Brown [20]).