Напишите нам

Поиск по сайту

Система Colton (Колтон) представлена тремя антигенами. Два из них, Соа (частый) и Соь (редкий), находятся в антитетичных отношениях. Третий анти­ген, СоЗ, присутствует на всех эритроцитах, за исключением эритроцитов лиц с нулевым фенотипом, Со(а-Ь-) (табл. 17.1). Групповые детерминанты Colton расположены на белке, получившем название аквапорин-1 (AQP-1).

Генный локус СО картирован на коротком плече хромосомы 7. Нулевой фенотип Со(а-Ь-) может быть обусловлен моносомией по хромосоме 7. Антигенные различия Colton обусловлены одиночными мутациями гена СО, приводящими к замене аланина в позиции 45 валином.

Таблица 17.1

Антигены Colton

Обозначение

Частота

Примечание

традиционное

ISBT

Соа

С01

Высокая

Антитетичен Со\ Ala 45

Соь

С02

Низкая

Антитетичен Соа, Val 45

СоЗ

СОЗ

Очень высокая

Отсутствует у лиц Со(а-Ь-)

Негликозилированный вариант AQP-1 имеет мол. массу 28 кДа, гликозили-рованный - от 40 до 60 кДа (Denker et al [14]. Количество молекул AQP-1 на одну клетку составляет 120-160 тыс.

Методом ПЦР с использованием олигонуклеотидных праймеров исследова­на кДНК клеток эмбриональной печени человека. Это позволило сначала уста­новить аминокислотную последовательность N-терминального участка аквапо-рина-1, а затем изолировать кДНК аквапорина-1 из библиотеки генов костно­мозговых клеток человека. Найден участок ДНК величиной 807 пар нуклео-тидов, кодирующий синтез полипептида из шести трансмембранных доменов (рис. 17.1 и 17.2). N- и С-терминальные участки полипептида расположены вну­три клетки (Preston, Agre [43]). Полипептид, несущий антигены Colton, состоит из 269 аминокислот (рис. 17.3).

Обе половины молекулы аквапорина (по три трансмембранных домена в каждой) имеют участки NPA со сходной последовательностью аминокислот. Согласно предложенной трехмерной модели, участки NPA между трансмем­бранными доменами образуют канал транспорта воды и функционируют как целое.

Система Colton

Система Colton (Колтон) представлена тремя антигенами. Два из них, Соа (частый) и Соь (редкий), находятся в антитетичных отношениях. Третий анти­ген, СоЗ, присутствует на всех эритроцитах, за исключением эритроцитов лиц с нулевым фенотипом, Со(а-Ь-) (табл. 17.1). Групповые детерминанты Colton расположены на белке, получившем название аквапорин-1 (AQP-1).

Генный локус СО картирован на коротком плече хромосомы 7. Нулевой фенотип Со(а-Ь-) может быть обусловлен моносомией по хромосоме 7. Антигенные различия Colton обусловлены одиночными мутациями гена СО, приводящими к замене аланина в позиции 45 валином.

Таблица 17.1

Антигены Colton

Обозначение

Частота

Примечание

традиционное

ISBT

Соа

С01

Высокая

Антитетичен Со\ Ala 45

Соь

С02

Низкая

Антитетичен Соа, Val 45

СоЗ

СОЗ

Очень высокая

Отсутствует у лиц Со(а-Ь-)

Негликозилированный вариант AQP-1 имеет мол. массу 28 кДа, гликозили-рованный - от 40 до 60 кДа (Denker et al [14]. Количество молекул AQP-1 на одну клетку составляет 120-160 тыс.

Методом ПЦР с использованием олигонуклеотидных праймеров исследова­на кДНК клеток эмбриональной печени человека. Это позволило сначала уста­новить аминокислотную последовательность N-терминального участка аквапо-рина-1, а затем изолировать кДНК аквапорина-1 из библиотеки генов костно­мозговых клеток человека. Найден участок ДНК величиной 807 пар нуклео-тидов, кодирующий синтез полипептида из шести трансмембранных доменов (рис. 17.1 и 17.2). N- и С-терминальные участки полипептида расположены вну­три клетки (Preston, Agre [43]). Полипептид, несущий антигены Colton, состоит из 269 аминокислот (рис. 17.3).

Обе половины молекулы аквапорина (по три трансмембранных домена в каждой) имеют участки NPA со сходной последовательностью аминокислот. Согласно предложенной трехмерной модели, участки NPA между трансмем­бранными доменами образуют канал транспорта воды и функционируют как

 

Сист

Первая экстрацеллюлярная петля молекулы аквапорина может быть N-гликозилирована и, подобно протеину полосы 3, обладать АВН-антигенной активностью (Smith и соавт. [52]).

Ген AQP-1 локализован в позиции 7р14, имеет величину 17 кб и представлен четырьмя экзонами (рис. 17.4), кодирующими аминокислоты в позициях 1-128


Вскоре после обнаружения того факта, что локусы СО и AQP-1 находятся в одном и том же участке хромосомы 7, были получены новые данные. Установлено, что антитела анти-Соа и анти-Соь могут избирательно преципитировать молекулы аквапорина на эритроцитах, содержащих антиген Соа или
Соь соответственно (Smith и соавт. [52]). Анти-СоЗ-антитела позволяли посредством иммунопреципитации выделить аквапорин из эритроцитов Со(а+Ь-) и Co(a-b+).

СоаиСоь

В 1967 г. Heisto и соавт. [19] сообщили о выявлении трех образцов сыворо­ток, открывавших новый антиген с высокой частотой встречаемости. Антиген был обозначен как Соа, или Colton, по имени первого пробанда. Любопытен тот факт, что в действительности его фамилия была Calton, но она, как отметили Reid и Lomas-Francis [46], была неразборчиво написана на пробирке с кровью.

Тремя годами позже Giles и соавт. [18] идентифицировали антитела, откры­вавшие антиген Соь, антитетичный Соа.

С использованием сыворотки анти-Соа обследованы 1706 американских не­гров, все оказались Соа+ (Race, Sanger [45]). Среди 13 460 европейцев (жите­лей стран Северной Европы, США и Канады), обследованных разными автора­ми, выявлены 27 человек Со(а-) (Heisto и соавт. [19], Lewis и соавт. [30], Race, Sanger [45]), Smith и соавт. [53], (Wray, Simpson [58]). Частота антигена Соа, та­ким образом, составила 99,8 %.

Сыворотка анти-Соь использована при обследовании 799 испанцев, прожи­вающих в Майами (Issitt и соавт. [23]), 100 канадских индейцев племени кри (Lucciola и соавт. [31]) и 2244 японцев (Nagao и соавт. [38]. Частота выявления антигена Соь в указанных популяциях составила 4,6 %, 2 % и 0,22 % соответ­ственно.

Из 5186 доноров, обследованных Giles и соавт. [18] в Англии, Lewis и соавт. [30] в Канаде, Case [7], Brackenridge и соавт. [5] в Австралии и Новой Зеландии, 443 (8,5 %) имели фенотип Со(Ь+) (табл. 17.2).

Результаты посемейных исследований [19, 30,45] свидетельствуют, что гены Со и Соb наследуются кодоминантно.

Описаны две семьи с необычным характером наследования генов Соа и Cob (Moulds и соавт. [35], Swanson, Eckman [55]). Количественное исследо­вание антигенов эритроцитов членов этих семей путем титрования антител анти-Соа и анти-СоЗ показало, что они несли по одной дозе указанных анти­генов, что, по-видимому, было обусловлено передачей от одного из родителей молчащего аллеля Со.Таблица 17.2

Частота признаков Colton у европеоидов

Частота, %

антигена

гена

генотипа

Соа 99,8

Соа 95,5

CoVCo* 91,2 Coa/Cob 8,6

Соь 8,5

Соь 4,5

Cob/Cob 0,2

Антигенный полиморфизм Colton связан с заменой нуклеотидов С 134 Т в экзоне 1 гена СО. Аллель Соа кодирует аланин в позиции 45, в то время как при наличии гена Соъ это положение занимает валин. Антигенные эпитопы Colton расположены на экстрацеллюлярной петле второго домена AQP-1 (см. рис. 17.1 и 17.2) вблизи участка N-гликозилирования Asn 42. Нарушение процесса глико-зилирования влияет на экспрессию антигенов Colton (Smith и соавт. [52]).

Антигены Соа и Соь устойчивы к действию протеолитических ферментов: папа­ша, трипсина, химотрипсина, проназы, сиалидазы и сульфгидрильных реагентов.

Dunstan [15], используя метод проточной цитофлюориметрии, показал, что антиген Соа отсутствует на лимфоцитах, моноцитах и гранулоцитах.

Антиген Соь полностью развит на эритроцитах к моменту рождения (Henke и соавт. [20]).

СоЗ

В 1974 г. Rogers и соавт. [47] идентифицировали фенотип Со(а-Ь-). Его обна­ружение было ожидаемым. Указанная редкая группа крови была установлена у жительницы Канады французского происхождения и у 2 из ее 4 сибсов. Родители женщины и 2 других сибса имели фенотип Со(а+Ь-). Сыворотка крови женщи­ны содержала анти-СоЗ-антитела, которые реагировали со всеми образцами эри­троцитов, за исключением собственных эритроцитов и 2 ее сибсов. Исследования методом адсорбции - элюции показали, что анти-СоЗ-антитела не являются про­стой смесью антител анти-Соа и анти-Соь, а представляют собой несепарируемый комплекс анти-СоаЬ. Активность этих антител полностью истощалась посред­ством адсорбции эритроцитами как Со(а+Ь-), так и Со(а-Ь+). Элюаты с эритро­цитов Со(а+Ь-) реагировали перекрестно с эритроцитами Со(а-Ь+) и, наоборот, элюаты с эритроцитов Со(а-Ь+) реагировали с эритроцитами Со(а+Ь-).

Вслед за Rogers и соавт. [47] другие исследрватели описали 5 лиц с нулевым фенотипом Со(а-Ь-), не состоявших в родстве. Все они были европейцами и были выявлены в связи с обнаружением у них анти-СоЗ-антител (Fuhrmann и соавт. [17], Theuriere и соавт. [56], Savona-Ventura и соавт. [49], Lacey и соавт. [27], Chretien и соавт. [9]).

Поиск других лиц с нулевым фенотипом Colton среди 40 тыс. американских, 9 тыс. австралийских и 2 тыс. финских доноров не дал положительного резуль­тата (Lacey и соавт. [27]).

Молекулярно-генетическое обследование лиц Со(а-Ь-) показало, что ука­занный редкий фенотип могут обусловливать четыре фактора:

  1. Гомозиготность по полной или частичной делеций экзона 1 гена СО (Preston и соавт. [44]).
  2. Гомозиготность по вставке одной пары нуклеотидов в позиции 307 экзо­на 1 (Preston и соавт. [44]). Оба фактора блокировали синтез аквапорина. Его не удавалось обнаружить на эритроцитах методом иммуноблоттин-га (Preston и соавт. [44]).
  3. Гомозиготность по мутации С 614 А в экзоне 3, которая приводит к ами­нокислотной замене Asn 192 Lys в экстрацеллюлярном участке третьего домена аквапорина с преобразованием аминокислотной последовательно­сти Asn-Pro-Ala в Lys-Pro-Ala (Chretien и соавт. [9]). При таких измене­ниях протеин утрачивает способность транспортироваться к поверхности мембраны эритроцита. Двое детей пробанда Со(а-Ь-) были гетерозигот­ны по мутации С 614 А, в результате чего имели фенотип Со(а+Ь~).
  4. Гомозиготность по мутации С 113 Т в экзоне 1 с аминокислотной за­меной Pro 38 Leu (Preston и соавт. [44]). В этом случае на эритроци­тах выявлялись следовые количества аквапорина. Эритроциты давали слабоположительные реакции с мощными (титр 1 :32 ООО) анти-СоЗ-антителами (Lacey и соавт. [27]).

У лиц Со(а-Ь-) эритроциты были нормальными по физиологическим показа­телям, содержание гемоглобина и гематокрит были в пределах нормы, отмечено уменьшение продолжительности жизни эритроцитов in vivo (Mathaj и соавт. [33]).

Эритроциты одного ребенка с редкой формой конгенитальной дизэритропоэ-тической анемии без мутаций гена AQP-1 содержали аквапорин-1 в количестве менее 10 % от нормы, были Со(а-Ь-), однако при этом реагировали с анти-СоЗ-антителами (Parsons и соавт. [41], Agre и соавт. [2]). Эритроциты ребенка, так же как и его родителей, были дефицитны по содержанию CD44, имели группу In(a-b-) AnWj - по системе Indian, слабый антиген LWab системы LW, обладали очень низкой проницаемостью для воды. Эритроциты больных с другими фор­мами конгенитальной дизэритропоэтической анемии содержали нормально вы­раженные антигены Colton.

Антиген СоЗ, как и факторы Соа и Соь, устойчив к действию протеолитиче-ских ферментов и сульфгидрильных реагентов.

 

Добавить комментарий




Тесты для врачей

Наши партнеры