Методы определения

В 70-80-е годы прошлого столетия определение фактора Kell среди больших контингентов лиц было весьма затруднительно главным образом из-за дефици­та типирующих реагентов. В настоящее время это исследование не представля­ет сложности ни в организационном, ни в методическом аспекте.

Для определения антигена К и антител используют метод конглютинации с 10% желатином, метод агглютинации в солевой среде, непрямую пробу Кумбса [55], капиллярный метод [190], адсорбционные методы [3].

Выявление анти-К-антител также не представляет проблемы, однако следу­ет иметь в виду, что анти-К-антитела реагируют слабее в среде с низкой ионной силой (LISS) [282, 285, 382]. В частности, Merry и соавт. [282] установили, что в этой среде значительно меньше молекул анти-К связываются с эритроцитами, чем в солевом растворе.

В отдельных случаях анти-К-антитела не выявляются при использовании ав­томатизированных методов исследования [394], что, по-видимому, обусловлено их относительно низкой авидностью по сравнению с aHTH-D-антителами, к ко­торым, в основном, адаптированы существующие методы выявления антител.

В последнее десятилетие созданы высокоактивные моноклональные реакти­вы IgM анти-Kell, позволяющие производить определение факторов Kell уско­ренным методом на плоскости.

Описаны методы определения генотипа К/к, основанные на полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для этого используют участки рестрикции Bsml (BsaMl) аллеля К, но не к [232, 239, 294]. Используются аллель-специфические праймеры [94,196,232], гибридизация аллель-специфических олигонуклеотидов [283].

У беременных женщин К-фенотип плода определяют используя амниоциты.

Молекулярно-генетические тесты не столь точны как серологические метода. Отмечены ложноположительные результаты при исследовании лиц с фенотипом К_о.